缩略语表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
前言 | 第13-15页 |
文献回顾 | 第15-26页 |
一、Notch 信号通路 | 第15-18页 |
二、Notch 信号通路对血管形成的作用 | 第18-21页 |
三、Notch 在肿瘤血管中的作用 | 第21-25页 |
五、Notch 信号通路与黑色素瘤生长的关系 | 第25-26页 |
实验一 载体的构建 | 第26-36页 |
1 实验材料和仪器 | 第26-28页 |
·菌株、质粒和工具酶 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·主要工作试剂配制 | 第26-27页 |
·主要仪器 | 第27-28页 |
2 实验方法 | 第28-29页 |
·引物设计 | 第28页 |
·目的基因的扩增 | 第28页 |
·目的基因表达载体构建 | 第28-29页 |
3 实验结果 | 第29-34页 |
·D1、D2 基因片段的PCR扩增 | 第29-30页 |
·D1、D2 PCR片段的测序 | 第30-33页 |
·pIRES2-EGFP-DLL1 质粒的鉴定和测序 | 第33-34页 |
讨论 | 第34-36页 |
实验二 DLL1 基因在小鼠黑色素瘤细胞中的表达及功能 | 第36-46页 |
1 材料与仪器 | 第36-37页 |
·细胞 | 第36页 |
·主要试剂 | 第36页 |
·主要溶液 | 第36页 |
·主要仪器 | 第36-37页 |
2 实验方法 | 第37-41页 |
·细胞转染 | 第37-38页 |
·DLL1 在细胞中表达的鉴定 | 第38-39页 |
·细胞体外实验 | 第39-41页 |
3 结果 | 第41-43页 |
·细胞的转染 | 第41页 |
·DLL1 在转染细胞中的表达 | 第41-42页 |
·DLL1 对下游靶基因的激活 | 第42-43页 |
·DLL1 对肿瘤细胞体外增殖的作用 | 第43页 |
4 讨论 | 第43-46页 |
实验三 DLL1 对肿瘤体内生长的作用 | 第46-54页 |
1 仪器与材料 | 第46-47页 |
·实验材料 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46页 |
·主要溶液 | 第46-47页 |
·主要仪器 | 第47页 |
2 实验方法 | 第47-49页 |
·肿瘤细胞接种 | 第47页 |
·肿瘤生长观察 | 第47页 |
·Evans blue 灌注实验 | 第47页 |
·肿瘤组织RNA的提取 | 第47页 |
·Real-time PCR 检测 | 第47-48页 |
·组织学分析 | 第48-49页 |
3 结果 | 第49-51页 |
·小鼠荷瘤实验 | 第49页 |
·Notch信号通路在肿瘤组织中的激活 | 第49-50页 |
·Notch对肿瘤血管的影响 | 第50-51页 |
·肿瘤的缺血和坏死 | 第51页 |
4 讨论 | 第51-54页 |
小结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-65页 |
个人简历和研究成果 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |