| 中文摘要 | 第1-16页 |
| ABSTRACT | 第16-20页 |
| 符号说明及缩写词 | 第20-22页 |
| 第一章 文献综述 | 第22-44页 |
| ·粘细菌简介 | 第22-25页 |
| ·粘细菌的遗传学研究 | 第25-33页 |
| ·粘细菌的分子生物学操作方法 | 第25-26页 |
| ·粘细菌来源或可以应用于粘细菌的噬菌体 | 第26-27页 |
| ·在粘球菌中应用的转座子 | 第27-28页 |
| ·粘细菌的遗传学研究 | 第28-29页 |
| ·粘细菌的基因组学研究 | 第29-33页 |
| ·环形质粒的类型及复制机制 | 第33-36页 |
| ·θ复制 | 第33-34页 |
| ·链置换复制 | 第34-35页 |
| ·滚环复制 | 第35-36页 |
| ·Myxococcus xanthus细胞的群体运动 | 第36-40页 |
| ·粘细菌的滑动运动 | 第36-37页 |
| ·M.xanthus群体运动机制 | 第37-38页 |
| ·M.xanthus群体运动机制相关基因 | 第38-40页 |
| ·细菌对氨基糖甙类抗生素耐受机制 | 第40-42页 |
| ·氨基糖甙类抗生素性质介绍 | 第40页 |
| ·细菌对氨基糖甙类抗生素的耐受机制 | 第40-42页 |
| ·本论文工作开展思路和研究内容 | 第42-44页 |
| 第二章 粘球菌内源质粒的发现和复制区性质分析 | 第44-93页 |
| ·实验材料与仪器试剂 | 第44-53页 |
| ·菌株和质粒 | 第44-47页 |
| ·主要培养基 | 第47-48页 |
| ·主要实验试剂 | 第48-51页 |
| ·常用溶液 | 第48-51页 |
| ·常用试剂盒、限制性内切酶和抗生素 | 第51页 |
| ·主要仪器设备与耗材 | 第51-52页 |
| ·数据库及分析软件 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-74页 |
| ·粘细菌环形质粒的检测 | 第53页 |
| ·粘细菌线性质粒的检测 | 第53-55页 |
| ·胶块制作 | 第53-54页 |
| ·脉冲场电泳检测 | 第54-55页 |
| ·粘细菌总DNA提取 | 第55页 |
| ·菌株124B02的性质测定 | 第55-59页 |
| ·菌株124B02营养细胞大小测定 | 第55-56页 |
| ·菌株124B02粘孢子大小测定 | 第56页 |
| ·菌株124B02球形子实体的拍照观察 | 第56页 |
| ·菌株124B02球形子实体的扫描电镜观察 | 第56页 |
| ·粘细菌染色体DNA提取 | 第56-57页 |
| ·菌株124B02的16S rDNA序列测定 | 第57-59页 |
| ·菌株124B02的保藏 | 第59-60页 |
| ·环形质粒pMF1的亚克隆测序 | 第60-63页 |
| ·E.coli感受态细胞的制备 | 第60页 |
| ·连接产物或质粒转化E.coli方法 | 第60页 |
| ·E.coli转化子质粒提取 | 第60-61页 |
| ·PCR产物或酶处理体系纯化 | 第61-62页 |
| ·质粒pMF1的亚克隆 | 第62-63页 |
| ·质粒pMF1序列分析 | 第63-64页 |
| ·质粒pMF1复制功能区的定位 | 第64-69页 |
| ·克隆载体pZJY1的构建 | 第64-65页 |
| ·同源重组质粒pK1的构建 | 第65页 |
| ·粘球菌电转化流程 | 第65-66页 |
| ·质粒pMF1复制功能区的定位 | 第66-69页 |
| ·pMF1.14基因在E.coli中异源表达 | 第69-72页 |
| ·表达质粒制备 | 第69-71页 |
| ·pMF1.14基因在E.coli中异源表达 | 第71-72页 |
| ·检测异源表达蛋白是否形成包涵体 | 第72页 |
| ·M.xanthus DK1622染色体复制区oriC的探索 | 第72-73页 |
| ·Sorangium cellulosum So0157-2染色体复制区oriC探索 | 第73-74页 |
| ·粘细菌染色体提取方法 | 第73-74页 |
| ·S.cellulosum So0157-2染色体复制区oriC的克隆 | 第74页 |
| ·实验结果与讨论 | 第74-90页 |
| ·粘细菌中自主复制质粒的筛选 | 第74-77页 |
| ·粘细菌中环形质粒的筛选 | 第75-76页 |
| ·粘细菌中线性质粒的筛选 | 第76-77页 |
| ·菌株124B02的种属鉴定 | 第77页 |
| ·质粒pMF1的亚克隆测序及序列分析 | 第77-80页 |
| ·质粒pMF1复制功能区定位 | 第80-84页 |
| ·pMF1.14基因在E.coli中异源表达 | 第84-87页 |
| ·粘细菌中染色体复制区oriC的探索 | 第87-90页 |
| ·M.xanthus DK1622染色体复制区oriC的探索 | 第87-89页 |
| ·S.cellulosum So0157-2染色体复制区oriC的探索 | 第89-90页 |
| ·本章小结 | 第90-93页 |
| 第三章 大肠杆菌——粘球菌穿梭载体的构建和性质分析 | 第93-111页 |
| ·实验材料与仪器试剂 | 第94-95页 |
| ·菌株和质粒 | 第94-95页 |
| ·主要培养基 | 第95页 |
| ·主要实验试剂 | 第95页 |
| ·实验方法 | 第95-100页 |
| ·E.coli受体菌对M.xanthus转化子中质粒结构稳定性的影响 | 第95页 |
| ·测序验证M.xanthus转化子中变小质粒的丢失序列区域 | 第95-96页 |
| ·构建质粒验证M.xanthus中质粒结构不稳定区域 | 第96页 |
| ·从M.xanthus转化子中筛选结构稳定的穿梭质粒 | 第96-97页 |
| ·确证穿梭质粒pZJY41和pZJY156序列改变的位点 | 第97页 |
| ·质粒拷贝数测定 | 第97-98页 |
| ·质粒遗传稳定性测定 | 第98页 |
| ·提高穿梭载体遗传稳定性的探索 | 第98-99页 |
| ·构建可在E.cooi——S.cellulosum中应用的穿梭载体 | 第99-100页 |
| ·E.coli——S.cellulosum接合操作 | 第99-100页 |
| ·E.coli——S.cellulosum穿梭载体的构建 | 第100页 |
| ·实验结果与讨论 | 第100-109页 |
| ·构建在E.coli——M.xanthus中可以应用的结构稳定的穿梭载体 | 第100-105页 |
| ·使用不同基因型的E.coli宿主细胞 | 第101页 |
| ·鉴定M.xanthus转化子中质粒结构不稳定区域 | 第101-103页 |
| ·筛选M.xanthus转化子得到结构稳定的穿梭载体 | 第103-105页 |
| ·穿梭质粒在M.xanthus中拷贝数测定 | 第105-106页 |
| ·穿梭质粒在M.xanthus DZ1中遗传稳定性测定 | 第106页 |
| ·提高穿梭载体遗传稳定性的探索 | 第106-109页 |
| ·E.coli——S.cellulosum穿梭载体的构建 | 第109页 |
| ·本章小结 | 第109-111页 |
| 第四章 大肠杆菌——粘球菌穿梭载体的应用 | 第111-130页 |
| ·实验材料与仪器试剂 | 第112-114页 |
| ·菌株和质粒 | 第112-113页 |
| ·主要培养基 | 第113页 |
| ·主要实验试剂 | 第113-114页 |
| ·实验方法 | 第114-117页 |
| ·S运动缺失突变体运动表型回补 | 第114-115页 |
| ·质粒pZJY24和pZJY25的构建 | 第114页 |
| ·M.xanthus的滑动运动测定 | 第114页 |
| ·M.xanthus细胞表面结构pili的透射电镜观察 | 第114-115页 |
| ·S.cellulosum卡那霉素抗性基因的克隆、鉴定及分析 | 第115-117页 |
| ·S.cellulosum卡那霉素抗性基因的克隆 | 第115页 |
| ·S.cellulosum卡那霉素抗性基因的定位 | 第115-116页 |
| ·氨基糖甙类抗生素的MIC测定 | 第116页 |
| ·探索kmr在S.cellulosum中存在普遍性 | 第116页 |
| ·16S rRNA甲基转移酶和16S rRNA甲基化酶序列进化关系分析 | 第116-117页 |
| ·实验结果与讨论 | 第117-128页 |
| ·S运动缺失突变体运动表型回补 | 第117-120页 |
| ·质粒构建和转化 | 第117-118页 |
| ·M.xanthus转化子S运动表型观察 | 第118-119页 |
| ·M.xanthus细胞表面结构pili的透射电镜观察 | 第119-120页 |
| ·S.cellulosum卡那霉素抗性基因的克隆、鉴定和分析 | 第120-128页 |
| ·S.cellulosum卡那霉素抗性基因的克隆 | 第120-122页 |
| ·S.cellulosum基因组卡那霉素抗性基因的定位 | 第122-124页 |
| ·rRNA甲基转移酶在其他S.cellulosum中存在的普遍性 | 第124-125页 |
| ·16S rRNA甲基转移酶和16S rRNA甲基化酶序列进化关系分析 | 第125-126页 |
| ·M.xanthus转化子对氨基糖甙类抗生素MIC测试 | 第126-128页 |
| ·本章小结 | 第128-130页 |
| 创新性与展望 | 第130-131页 |
| 附录 | 第131-139页 |
| 参考文献 | 第139-148页 |
| 致谢 | 第148-149页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第149-150页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第150-151页 |
| 外文论文 | 第151-164页 |
