费氏中华根瘤菌HNO1 lrp基因的研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-32页 |
| ·前言 | 第9-10页 |
| ·生物固氮研究进展 | 第10-23页 |
| ·与固氮相关基因克隆的主要实验技术 | 第23-27页 |
| ·与共生固氮相关的脯氨酸和lrp基因 | 第27-31页 |
| ·本工作的目的 | 第31-32页 |
| 第二章 材料与方法 | 第32-52页 |
| ·菌株和质粒 | 第32页 |
| ·培养基及生长条件 | 第32-34页 |
| ·抗菌素 | 第34-35页 |
| ·溶液、缓冲液和试剂 | 第35-37页 |
| ·PCR扩增DNA片段 | 第37页 |
| ·电泳 | 第37-38页 |
| ·质粒DNA的制备 | 第38-40页 |
| ·质粒DNA的纯化、定量与沉淀 | 第40-42页 |
| ·DNA限制性内切酶酶切 | 第42页 |
| ·DNA酶切片段的分离与回收 | 第42-44页 |
| ·DNA的连接 | 第44-45页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第45页 |
| ·根瘤菌总DNA的提取 | 第45-46页 |
| ·DNA-DNA杂交 | 第46-49页 |
| ·三亲本接合 | 第49页 |
| ·根瘤菌生长曲线的测定 | 第49-50页 |
| ·大豆温室水培试验方法 | 第50-51页 |
| ·DNA序列分析 | 第51-52页 |
| 第三章 费氏中华根瘤菌HN01 lrp基因的克隆 | 第52-59页 |
| ·引言 | 第52页 |
| ·HN01 lrp基因的克隆 | 第52-55页 |
| ·HN01 lrp基因的亚克隆测序 | 第55-56页 |
| ·HN01 lrp基因的序列分析 | 第56-58页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| 第四章 费氏中华根瘤菌HN01突变体的构建 | 第59-67页 |
| ·引言 | 第59页 |
| ·pK18mob单交换重组质粒构建 | 第59-61页 |
| ·同源单交换构建突变体 | 第61-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| 第五章 费氏中华根瘤菌HN01突变体互补株的构建 | 第67-72页 |
| ·引言 | 第67页 |
| ·互补株的构建 | 第67-71页 |
| ·讨论 | 第71-72页 |
| 第六章 lrp基因在根瘤菌结瘤过程中的作用 | 第72-76页 |
| ·引言 | 第72页 |
| ·植株全部结瘤时间的检测 | 第72-73页 |
| ·共生固氮效应的测定 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-76页 |
| 第七章 总结 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
