中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
正文部分 | 第13-70页 |
前言 | 第13-15页 |
第一部分 重组人可溶性 DR5 蛋白的制备及抗 DR5 单克隆抗体的研制 | 第15-27页 |
·序言 | 第15页 |
·材料、试剂与仪器 | 第15-17页 |
·实验动物 | 第15页 |
·菌株和NS-1 细胞株 | 第15页 |
·主要生化试剂 | 第15-16页 |
·主要仪器 | 第16-17页 |
·方法与步骤 | 第17-20页 |
·可溶性死亡受体5(sDR5)的制备 | 第17-18页 |
·免疫印记检测sDR5 的特异性 | 第18页 |
·sDR5 免疫 BALb/c 小鼠 | 第18页 |
·细胞融合 | 第18-19页 |
·杂交瘤的筛选及单克隆抗体 Ig 亚类鉴定 | 第19页 |
·腹水mDRA-6 的制备及纯化 | 第19-20页 |
·免疫印迹检测mDRA-6 的特异性 | 第20页 |
·mAb 的细胞凋亡活性分析 | 第20页 |
·实验结果 | 第20-24页 |
·纯化的重组人sDR5 蛋白纯度及表观分子量 | 第21页 |
·纯化的重组人sDR5 蛋白的免疫印迹结果 | 第21页 |
·杂交瘤细胞株的建立及抗体纯化 | 第21-22页 |
·mDRA-6 的特异性及凋亡活性分析 | 第22-24页 |
·讨论 | 第24-25页 |
·参考文献 | 第25-27页 |
第二部分 功能抗体mDRA-6 对人食管癌细胞诱导凋亡的机制研究 | 第27-46页 |
·序言 | 第27页 |
·材料、仪器与试剂 | 第27-29页 |
·细胞系 | 第27页 |
·主要试剂及配制 | 第27-29页 |
·主要仪器 | 第29页 |
·实验方法及步骤 | 第29-35页 |
·细胞表面 DR5 的表达检测 | 第29-30页 |
·mDRA-6 诱导细胞凋亡的毒性测定(MTT 法) | 第30页 |
·细胞凋亡形态学观察 | 第30页 |
·DNA ladder 检测细胞凋亡 | 第30-31页 |
·Annexin Ⅴ/PI 双染法检测细胞凋亡情况 | 第31页 |
·细胞凋亡线粒体膜电位的检测 | 第31-32页 |
·免疫印迹技术(Western blotting)检测细胞凋亡的蛋白信号途径 | 第32-35页 |
·实验结果 | 第35-40页 |
·细胞表面 DR5 的表达结果 | 第35-36页 |
·mDRA-6 对4 种细胞凋亡的毒性测定结果(MTT 法) | 第36-37页 |
·mDRA-6 诱导细胞凋亡的形态变化 | 第37页 |
·DNA ladder 检测细胞凋亡 | 第37-38页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡结果 | 第38页 |
·线粒体膜电位的检测结果 | 第38-39页 |
·Western blotting 检测细胞凋亡信号结果 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-44页 |
·参考文献 | 第44-46页 |
第三部分 功能抗体mDRA-6抗肿瘤作用的动物学实验 | 第46-53页 |
·序言 | 第46页 |
·材料、仪器与方法 | 第46-49页 |
·实验动物及细胞株 | 第46页 |
·主要仪器 | 第46页 |
·主要试剂及配方 | 第46-47页 |
·光镜标本的制备 | 第47-48页 |
·H-E 染色原理和方法 | 第48页 |
·荷瘤小鼠模型的建立 | 第48-49页 |
·肿瘤组织形态学的观察 | 第49页 |
·结果 | 第49-52页 |
·肿瘤的scid 小鼠动物模型 | 第49页 |
·mDRA-6 对肿瘤的疗效观察 | 第49-50页 |
·对小鼠肿瘤解剖结果的测量与观察 | 第50页 |
·对不同治疗组肿瘤组织的常规 HE 染色 | 第50-51页 |
·对不同治疗组肿瘤组织用Hoechst 33258染色 | 第51页 |
·mDRA-6 对scid 小鼠移植肿瘤的治疗效果与时间的关系 | 第51-52页 |
·讨论 | 第52-53页 |
第四部分 结论 | 第53-54页 |
第五部分 文献综述 TRAIL 受体与肿瘤治疗的研究进展 | 第54-70页 |
·概述 | 第54页 |
·TRAIL 及其受体 | 第54-57页 |
·TRAIL/Apo2L 结构及基因 | 第54-55页 |
·TRAIL/Apo2L 的受体 | 第55-57页 |
·TRAIL/Apo2L 介导的细胞凋亡 | 第57-59页 |
·对TRAIL敏感与耐受的分子机制 | 第59-62页 |
·抗 DR4、抗 DR5 的功能性凋亡抗体临床应用 | 第62-63页 |
·结论及展望 | 第63页 |
·参考文献 | 第63-70页 |
主要缩略语 | 第70-71页 |
研究生期间发表的论文 | 第71-72页 |
致谢 | 第72页 |