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黑龙江野鲤细菌人工染色体基因组文库的构建及在基因组研究中的应用

内容提要第1-6页
英文缩略语第6-11页
第一篇 文献综述第11-61页
 第一章 基因组计划第13-23页
  1 什么是基因与基因组计划第13-14页
  2 基因组计划的内容第14-17页
   ·建立遗传图谱第14-16页
   ·建立物理图谱第16页
   ·DNA 序列测定第16-17页
   ·基因的确定和分析第17页
  3 人类基因组研究的基本思路第17-23页
   ·“Tackle all the chromosome at once”第17-18页
   ·大片段外源DNA 克隆体系第18页
   ·确定特定的基因第18-21页
   ·利用染色体特征研究人类基因组第21-23页
 第二章 鲤鱼基因组研究的重要性第23-31页
  1 鲤鱼的基因组研究现状第23-26页
  2 性状基因的定位第26-29页
  3 鲤鱼的遗传连锁图谱第29-31页
 第三章 BAC文库及其在基因组学中的应用第31-61页
  1 大片段克隆载体第31-38页
   ·粘粒(cosmid)第32-33页
   ·酵母人工染色体(YAC)第33页
   ·细菌人工染色体(BAC)第33-34页
   ·双元细菌人工染色体(BIBAC)第34页
   ·P1 克隆系统和源于P1 的人工染色体(PAC)第34-35页
   ·可转化人工染色体(TAC)第35-36页
   ·多基因转化载体系统第36-38页
  2 BAC 载体的发展历史第38-42页
  3 BAC 文库构建方法第42-46页
   ·细菌人工染色体结构第42-45页
   ·细菌人工染色体基因组文库的构建方法第45-46页
  4 BAC 文库的鉴定第46-48页
   ·BAC 克隆的鉴定第46-47页
   ·BAC 克隆稳定性的鉴定第47页
   ·检查DNA 文库是否含有细胞DNA 的污染第47页
   ·BAC 文库的筛选第47-48页
  5 BAC 克隆的常用分析方法第48-49页
  6 BAC 末端测序第49-52页
   ·BAC 末端测序第49页
   ·末端测序的功能第49-50页
   ·BAC 末端分离的方法第50-52页
  7 BAC 文库的分类第52页
  8 细菌人工染色体BAC 基因组文库的应用第52-57页
  9 BAC 文库目前国内外研究现状第57-61页
第二篇 研究内容第61-113页
 实验一 黑龙江野鲤BAC 文库的构建第61-83页
  1 材料和方法第61-72页
   ·材料第61-65页
   ·方法第65-72页
  2 结果第72-79页
   ·高分子量HMW DNA 的提取第72-73页
   ·酶切条件的摸索第73-76页
   ·酶切产物的电洗脱结果第76页
   ·连接反应第76-78页
   ·电转化条件的摸索和优化第78-79页
   ·BAC 库的保存和鉴定结果第79页
  3 讨论第79-82页
  4 小结第82-83页
 实验二 三维PCR 法从BAC 库中调取功能基因第83-103页
  1 材料和方法第83-94页
   ·材料第83-86页
   ·实验方法第86-94页
  2 结果第94-101页
   ·BAC 文库超级池和三维筛选池的构建第94-97页
   ·引物的筛选第97-98页
   ·三维PCR 法筛选功能基因第98-101页
  3 讨论第101-102页
  4 小结第102-103页
 实验三 BAC基因组文库功能基因定位技术探索第103-113页
  1 材料和方法第103-107页
   ·材料第103-104页
   ·方法第104-107页
  2 结果第107-110页
   ·染色体的制备第108页
   ·FISH 条件的摸索第108-110页
   ·染色体显微切割条件的摸索第110页
  3 讨论第110-112页
  4 小结第112-113页
结论第113-115页
参考文献第115-131页
附录第131-137页
攻博期间发表的学术论文及其它成果第137-138页
中文摘要第138-142页
英文摘要第142-147页
致谢第147-149页
导师简介第149-150页
CURRICULUM VITAE第150页

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