| 符号说明 | 第1-11页 |
| 中文摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 1 前言 | 第15-25页 |
| ·糖基转移酶简介及其生物学功能 | 第16-20页 |
| ·糖基转移酶简介 | 第16-17页 |
| ·糖基转移酶生物学功能 | 第17-20页 |
| ·参与植物激素平衡 | 第17-18页 |
| ·参与植物防御反应 | 第18-19页 |
| ·参与植物脱毒反应 | 第19页 |
| ·参与植物次生代谢 | 第19-20页 |
| ·参与植物信号转导 | 第20页 |
| ·油菜素内酯提高植物抗逆性研究进展 | 第20-23页 |
| ·提高植物抗旱性 | 第20-22页 |
| ·改善植物渗透调节 | 第20-21页 |
| ·引起植物生理生化效应变化 | 第21-22页 |
| ·提高植物光合速率 | 第22页 |
| ·提高植物抗寒性 | 第22-23页 |
| ·提高植物的抗盐性 | 第23页 |
| ·增强植物的抗病性 | 第23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-46页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·材料处理 | 第25页 |
| ·菌株与质粒 | 第25-26页 |
| ·酶及生化试剂 | 第26页 |
| ·PCR 引物 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-46页 |
| ·总RNA 的提取 | 第26-28页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第28页 |
| ·番茄糖基转移酶基因UGT73C5 全长的克隆 | 第28-29页 |
| ·Northern 杂交分析 | 第29-32页 |
| ·总RNA 的提取 | 第29页 |
| ·甲醛变性胶电泳 | 第29-30页 |
| ·转膜 | 第30页 |
| ·预杂交 | 第30-31页 |
| ·探针的制备 | 第31页 |
| ·杂交 | 第31页 |
| ·洗膜 | 第31页 |
| ·放射自显影 | 第31-32页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第32-36页 |
| ·正义表达载体的构建 | 第32页 |
| ·连接 | 第32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| ·转化及克隆筛选 | 第33页 |
| ·碱法小量提取质粒DNA | 第33-34页 |
| ·质粒DNA 的酶切鉴定 | 第34页 |
| ·回收 | 第34页 |
| ·DNA 序列测定 | 第34页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第34-35页 |
| ·利用农杆菌介导转化烟草 | 第35-36页 |
| ·转基因烟草植株的PCR 检测 | 第36-37页 |
| ·CTAB 微量法提取基因组DNA | 第36页 |
| ·转基因植株的PCR 筛选 | 第36-37页 |
| ·番茄糖基转移酶UGT73C5 基因的原核表达及Western 杂交 | 第37-41页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第37页 |
| ·E.coli BL21 原核表达的诱导 | 第37-38页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第38-39页 |
| ·抗体的制备 | 第39页 |
| ·Western 杂交 | 第39-41页 |
| ·番茄UGT73C5 基因的叶绿体定位 | 第41-43页 |
| ·转基因烟草生理指标的测定 | 第43-46页 |
| ·光合气体交换参数的测定 | 第43页 |
| ·叶绿素荧光参数测定 | 第43-44页 |
| ·叶绿体活性氧清除酶的活性测定 | 第44页 |
| ·H_20_2 的测定 | 第44页 |
| ·超氧阴离子含量的测定 | 第44-45页 |
| ·丙二醛（MDA）含量的测定 | 第45页 |
| ·叶片相对电导率的测定 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-62页 |
| ·番茄糖基转移酶基因UGT73C5 的分离及表达分析 | 第46-54页 |
| ·LeUGT73C5 基因的分离 | 第46页 |
| ·LeUGT73C5 的序列分析 | 第46-50页 |
| ·LeUGT73C5-GFP 融合蛋白的亚细胞定位 | 第50页 |
| ·LeUGT73C5 基因在番茄中的表达分析 | 第50-52页 |
| ·LeUGT73C5 基因在番茄不同器官中的表达 | 第50-51页 |
| ·不同处理下LeUGT73C5 基因在番茄中的表达 | 第51-52页 |
| ·LeUGT73C5 基因的半定量PCR 分析 | 第52页 |
| ·LeUGT73C5 基因在大肠杆菌中的表达 | 第52-54页 |
| ·原核表达载体pET-LeUGT73C5 的构建 | 第52-53页 |
| ·SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第53-54页 |
| ·LeUGT73C5 基因在烟草中的遗传转化 | 第54-57页 |
| ·正义表达载体的构建 | 第54-55页 |
| ·转正义LeUGT73C5 基因植株的鉴定 | 第55-57页 |
| ·LeUGT73C5 基因过表达提高了烟草的抗低温能力 | 第57-62页 |
| ·LeUGT73C5 基因过表达增强了烟草在低温胁迫下的抗逆能力 | 第57-58页 |
| ·LeUGT73C5 基因过表达对低温胁迫下光合速率的影响 | 第58-59页 |
| ·LeUGT73C5 基因过表达减轻低温胁迫下PSII 的光抑制 | 第59页 |
| ·低温胁迫对烟草叶片相对电导率的影响 | 第59页 |
| ·低温胁迫对烟草叶片 MDA 含量的影响 | 第59-60页 |
| ·低温胁迫下烟草叶绿体活性氧含量及抗氧化酶活性的变化 | 第60-62页 |
| 4 讨论 | 第62-64页 |
| ·LeUGT73C5 基因编码一种糖基化油菜素内酯的糖基转移酶 | 第62页 |
| ·过表达 LeUGT73C5 基因提高烟草耐低温胁迫的能力 | 第62-64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 攻读学位期间已发表的论文 | 第74页 |
