| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-7页 |
| 引言 | 第7-8页 |
| 第一章 材料 | 第8-9页 |
| 1 材料 | 第8-9页 |
| 第二章 研究方法 | 第9-20页 |
| ·研究路线 | 第9页 |
| ·荧光定量PCR检测方法的原理 | 第9-10页 |
| ·试剂及引物 | 第10页 |
| ·试剂 | 第10页 |
| ·引物 | 第10页 |
| ·主要仪器设备 | 第10-11页 |
| ·实验操作方法、步骤 | 第11-19页 |
| ·Fas、FasL基因片段的克隆及检测 | 第11-17页 |
| (一) RNA的提取 | 第11-12页 |
| (二) 反转录反应 | 第12-13页 |
| (三) PCR扩增及产物的回收纯化 | 第13-14页 |
| (四) 感受态细胞E.Col的制备 | 第14页 |
| (五) 目的片段的T-A克隆 | 第14-15页 |
| (六) 质粒提取 | 第15页 |
| (七) 重组质粒的鉴定 | 第15-16页 |
| (八) 目的基因Fas、FasL片段及内参基因GAPDH片段的测序 | 第16-17页 |
| ·制作标准曲线 | 第17-18页 |
| ·制备Fas、FasL、GAPDH荧光探针 | 第18页 |
| ·非小细胞肺癌标本Fas、FasL基因片断的荧光定量PCR法检测 | 第18-19页 |
| (一) 非小细胞肺癌标本RNA的提取 | 第18页 |
| (二) 反转录反应 | 第18页 |
| (三) Fas、FasL基因片断的荧光定量PCR法检测 | 第18-19页 |
| ·统计学分析 | 第19-20页 |
| 第三章 结果 | 第20-29页 |
| ·Fas,FasL,GAPDH的标准曲线 | 第20-21页 |
| ·实时荧光定量PCR动力及回归曲线及Fas,FasL及GAPDH mRNA的表达 | 第21-24页 |
| ·Fas,FasLmRNA在肺癌细胞、正常肺组织中的表达 | 第24-25页 |
| ·NSCLC中Fas mRNA的表达与临床病理特征的关系 | 第25-27页 |
| ·NSCLC中FasL mRNA的表达与临床病理特征的关系 | 第27-28页 |
| ·NSCLC中Fas和FasL mRNA表达量之间的关系 | 第28-29页 |
| 第四章 讨论 | 第29-32页 |
| ·Fas在肺癌组织中的表达水平及其临床病理意义 | 第29页 |
| ·FasL在肺癌组织中的表达水平及其临床病理意义 | 第29-30页 |
| ·Fas/FasL基因表达在肺癌恶性进展中的意义 | 第30-31页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第31-32页 |
| 结论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-36页 |
| 附图 | 第36-38页 |
| 文献综述 | 第38-54页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
