摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-60页 |
·利用转基因技术进行玉米遗传改良的研究 | 第13-30页 |
·转基因技术在植物遗传改良中的兴起与发展 | 第13-15页 |
·玉米转基因实验技术研究概况 | 第15-30页 |
·玉米遗传转化的几种主要方法 | 第15-18页 |
·玉米转化受体的选择 | 第18-21页 |
·标记基因的研究概况 | 第21-28页 |
·遗传转化中组成型启动子的研究概况 | 第28-30页 |
·外源基因在后代的遗传规律 | 第30页 |
·玉米直链淀粉的应用及研究概况 | 第30-47页 |
·玉米淀粉在食品等各领域的应用 | 第30-32页 |
·玉米高直链淀粉改良的研究概况 | 第32-37页 |
·玉米淀粉的分类及直链淀粉的定义、特性 | 第33-34页 |
·直链淀粉在食品及其他领域的应用 | 第34-36页 |
·高直链玉米研究现状 | 第36-37页 |
·淀粉合成的生物学基础 | 第37-47页 |
·淀粉的生物合成 | 第37-41页 |
·淀粉合成过程中的关键酶 | 第41-46页 |
·利用基因工程技术进行淀粉改良的研究概况 | 第46-47页 |
·RNAI 技术的研究概况 | 第47-56页 |
·RNAi 干涉的机制 | 第48-50页 |
·主要实验技术 | 第50-53页 |
·RNAi 技术的优越性 | 第53-54页 |
·RNAi 技术在植物改良中的应用 | 第54-56页 |
·转基因作物安全性研究概况 | 第56-58页 |
·国内外转基因作物的发展现状 | 第56-57页 |
·转基因食品潜在的安全性问题 | 第57页 |
·转基因食品安全性评价 | 第57-58页 |
·本研究的意义、目的和技术路线 | 第58-60页 |
·本研究的目的、意义 | 第58-59页 |
·本研究的技术路线 | 第59-60页 |
第二章 基本实验材料及方法 | 第60-68页 |
·基本材料及仪器 | 第60页 |
·植物材料 | 第60页 |
·菌株和质粒 | 第60页 |
·试剂 | 第60页 |
·主要仪器设备 | 第60页 |
·常用溶液及BUFFER 的配制 | 第60-61页 |
·常用培养基的配制 | 第60-61页 |
·常用溶液的配制 | 第61页 |
·常用Buffer 的配制 | 第61页 |
·基本方法 | 第61-68页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第61页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第61-62页 |
·质粒DNA 的提取 | 第62-64页 |
·溶液配制 | 第62页 |
·基本方法(碱裂解法) | 第62-63页 |
·质粒DNA 浓度及纯度检测 | 第63-64页 |
·玉米总DNA 的提取 | 第64-65页 |
·溶液的配制 | 第64页 |
·基本方法(CTAB 改良法) | 第64-65页 |
·玉米总DNA 的纯度和浓度的检测 | 第65页 |
·玉米总DNA 的保存 | 第65页 |
·玉米籽粒总RNA 的提取 | 第65-68页 |
·试剂与溶液 | 第65-66页 |
·基本方法(酚-SDS 和LiCl 沉淀结合改良法) | 第66页 |
·玉米RNA 的样品纯度和浓度的检测 | 第66-68页 |
第三章 SBEⅠ、SBEⅡB RNAI 表达载体的构建 | 第68-106页 |
·材料与方法 | 第68-75页 |
·材料 | 第68页 |
·方法 | 第68-75页 |
·PCR 扩增引物 | 第68-70页 |
·sbeⅠ、sbeⅡb 基因的RT-PCR 扩增 | 第70-72页 |
·XylA 基因的PCR 扩增 | 第72页 |
·sbeⅡb 启动子的PCR 扩增 | 第72-73页 |
·sbeⅠ启动子的PCR 扩增 | 第73-74页 |
·PCR 扩增产物的回收与连接反应 | 第74页 |
·连接产物的转化 | 第74-75页 |
·重组质粒的扩繁 | 第75页 |
·表达载体的构建 | 第75页 |
·结果与分析 | 第75-105页 |
·目的基因的克隆与序列分析 | 第75-86页 |
·sbeⅠ基因的克隆与序列分析 | 第75-77页 |
·sbeⅡb 基因的克隆与序列分析 | 第77-79页 |
·xylA 基因的克隆与序列分析 | 第79-81页 |
·sbeⅡb 基因启动子的克隆与序列分析 | 第81-84页 |
·sbeⅠ基因启动子的克隆与序列分析 | 第84-86页 |
·玉米SBEⅠ、SBEⅡb RNAi 表达载体的构建 | 第86-105页 |
·SBEⅠ RNAi 表达载体的构建 | 第86-97页 |
·SBEⅡb RNAi 表达载体的构建 | 第97-101页 |
·淀粉分支酶基因RNAi 表达载体的构建流程 | 第101-104页 |
·四种淀粉分支酶基因RNAi 表达载体 | 第104-105页 |
·讨论 | 第105-106页 |
第四章 不同基因型玉米幼胚愈伤组织培养特性的研究 | 第106-112页 |
·材料和方法 | 第106-107页 |
·材料 | 第106-107页 |
·培养基 | 第107页 |
·愈伤组织的培养 | 第107页 |
·幼胚培养及植物再生与移栽 | 第107页 |
·结果与分析 | 第107-111页 |
·基因型对玉米幼胚愈伤组织诱导的影响 | 第107-109页 |
·培养基对玉米幼胚愈伤组织诱导的影响 | 第109-110页 |
·不同杂种优势类群自交系玉米幼胚培养特性的比较 | 第110-111页 |
·讨论 | 第111-112页 |
第五章 玉米基因枪转化及筛选体系的建立 | 第112-122页 |
·材料和方法 | 第112-116页 |
·材料 | 第112-113页 |
·各类筛选培养基的配制 | 第113页 |
·转化载体的制备及纯化 | 第113-114页 |
·金粉制备 | 第114-115页 |
·微粒子弹的准备 | 第115页 |
·基因枪的轰击 | 第115页 |
·转化愈伤组织的筛选和植株的再生 | 第115-116页 |
·结果与分析 | 第116-120页 |
·转化pBAC411 和pBAC417 的愈伤组织的筛选 | 第116页 |
·转化pBAC413 的愈伤组织的筛选 | 第116-117页 |
·pBAC418,pBAC411 与pBAC418 和pBAC413 与pBAC417 共转化后愈伤组织的筛选 | 第117-118页 |
·转基因玉米植株的分化、移栽 | 第118-120页 |
·讨论 | 第120-122页 |
第六章 转基因玉米植株的分子生物学检测 | 第122-134页 |
·材料与方法 | 第122-128页 |
·材料与仪器设备 | 第122-123页 |
·实验方法 | 第123-128页 |
·转基因后代植株基因组DNA 的提取 | 第123-124页 |
·转基因后代植株的点杂交检测 | 第124-127页 |
·转基因植株的PCR 鉴定 | 第127-128页 |
·转基因玉米FAD2 intron 和xylA 基因的PCR-Southern 验证 | 第128页 |
·结果与分析 | 第128-132页 |
·转基因玉米叶片DNA 的提取 | 第128-129页 |
·两类探针活性的检测 | 第129页 |
·转基因玉米后代植株xylA 基因的检测结果 | 第129-131页 |
·玉米转化植株的xylA 基因的DNA 点杂交和PCR 检测 | 第129-130页 |
·转基因玉米的xylA 基因PCR-Southern 杂交检测 | 第130-131页 |
·转基因玉米后代植株FAD2 intron 基因的检测结果 | 第131-132页 |
·玉米转化植株的FAD2 intron 基因的DNA 点杂交和PCR 检测 | 第131-132页 |
·转基因玉米FAD2 intron 基因的PCR-Southern 杂交检测 | 第132页 |
·讨论 | 第132-134页 |
第七章 转基因玉米籽粒的淀粉含量检测 | 第134-139页 |
·材料和方法 | 第134-136页 |
·材料与仪器设备 | 第134-135页 |
·实验方法 | 第135-136页 |
·玉米籽粒的蛋白、油脂和总淀粉含量的测定 | 第135页 |
·玉米籽粒的直链淀粉含量的测定 | 第135-136页 |
·结果与分析 | 第136-138页 |
·再生玉米株系籽粒的蛋白、油脂和总淀粉含量的测定 | 第136页 |
·玉米籽粒直链淀粉含量的测定 | 第136-138页 |
·讨论 | 第138-139页 |
第八章 结论及创新点 | 第139-141页 |
·结论 | 第139-140页 |
·创新点 | 第140-141页 |
第九章 下一步研究计划 | 第141-142页 |
参考文献 | 第142-162页 |
缩略语 | 第162-164页 |
致谢 | 第164-165页 |
作者简介 | 第165页 |