| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-12页 |
| 前言 | 第12-16页 |
| 第一部分 在拟南芥中利用酵母双杂交技术筛选与谷氨酰tRNA合成酶有相互作用的蛋白质 | 第16-56页 |
| 1.材料 | 第16-26页 |
| ·植物材料 | 第16页 |
| ·菌种 | 第16页 |
| ·质粒载体 | 第16-19页 |
| ·生化试剂,酶制剂,试剂盒及仪器 | 第19页 |
| ·培养基及溶液配制 | 第19-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-48页 |
| ·DNA-BD/GTS(fc)和DNA-BD/GTS(ΔC)载体的制备 | 第26-34页 |
| ·GTS(fc)片段的获得 | 第26-31页 |
| ·GTS(ΔC)片段的获得 | 第31-33页 |
| ·质粒载体的制备 | 第33页 |
| ·连接DNA-BD/GTS(fc)和DNA-BD/GTS(ΔC)载体 | 第33-34页 |
| ·连接片段向大肠杆菌的转化 | 第34页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第34页 |
| ·拟南芥cDNA文库的构建 | 第34-42页 |
| ·拟南芥的培养 | 第34-35页 |
| ·拟南芥总RNA的提取 | 第35-36页 |
| ·RNA鉴定 | 第36-37页 |
| ·合成第一链cDNA | 第37页 |
| ·长程PCR(LD-PCR)扩增双链cDNA | 第37-38页 |
| ·纯化双链cDNA | 第38-39页 |
| ·Carrier DNA 的制备 | 第39-40页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| ·采用共转化法将pGBKT7-GTS(fc),dscDNA及pGADT7-Rec转化于AH109菌中 | 第41-42页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第42-45页 |
| ·β-半乳糖苷酶(β-LacZ)活性检测 | 第42页 |
| ·阳性克隆的获得 | 第42页 |
| ·PCR和酶切检测阳性克隆 | 第42-44页 |
| ·TaqI,BsuRI酶切,分组 | 第44-45页 |
| ·pGADT7-Rec-cDNA的获得 | 第45-47页 |
| ·E.coli JM109感受态细胞的制备 | 第45页 |
| ·BD和AD转化至E.coli JM109感受态细胞 | 第45-46页 |
| ·转化子阳性克隆的检测 | 第46页 |
| ·小量提取pGADT7-Rec-cDNA质粒 | 第46-47页 |
| ·阳性克隆的再次检测 | 第47-48页 |
| ·顺次转化 | 第47页 |
| ·β-半乳糖苷酶(β-LacZ)活性检测 | 第47页 |
| ·测序分析 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-56页 |
| ·诱饵表达载体pGBKT7-GTS(fc)和pGBKT7-GTS(ΔC)的构建 | 第48-49页 |
| ·酵母双杂交 | 第49-50页 |
| ·相互作用蛋白的β-半乳糖苷酶(β-LacZ)活性检测 | 第50-52页 |
| ·阳性克隆的检测 | 第52-53页 |
| 4.讨论 | 第53-56页 |
| 第二部分 拟南芥转基因株系的抗逆表型研究 | 第56-68页 |
| 1.材料 | 第56-57页 |
| ·植物材料 | 第56页 |
| ·实验试剂 | 第56页 |
| ·培养基 | 第56-57页 |
| 2 实验方法 | 第57-59页 |
| ·胁迫压的选择 | 第57-58页 |
| ·种子萌发率实验 | 第58页 |
| ·根生长状况实验 | 第58-59页 |
| 3 结果与分析 | 第59-65页 |
| ·种子萌发率 | 第59-63页 |
| ·根生长状况 | 第63-65页 |
| 4.讨论 | 第65-68页 |
| 文献综述 | 第68-87页 |
| 参考文献 | 第87-95页 |
| 在读硕士期间发表论文和获奖情况 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
