缩略词表 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-38页 |
·生长素在植物生长发育中作用机理研究进展 | 第13-22页 |
·生长素对拟南芥叶片发育的影响 | 第14-15页 |
·生长素对下胚轴伸长的影响 | 第15-16页 |
·生长素对植物早期发育的影响 | 第16-19页 |
·生长素对根发育的影响 | 第19-21页 |
·生长素对花器官形成和开花的影响 | 第21-22页 |
·IAA的内稳态 | 第22-27页 |
·IAA的合成 | 第22-23页 |
·生长素运输 | 第23-26页 |
·IAA的代谢 | 第26-27页 |
·生长素信号转导 | 第27-38页 |
·生长素受体 | 第28-30页 |
·Aux/IAA | 第30-33页 |
·ARF | 第33-35页 |
·SCF~(TIRI) | 第35-38页 |
第二章 材料和方法 | 第38-53页 |
·拟南芥种子 | 第38页 |
·质粒 | 第38页 |
·拟南芥生长条件 | 第38页 |
·IAA2 TILLING种子鉴定 | 第38-39页 |
·表达载体构建 | 第39-46页 |
·过量表达iaa2-1、iaa2-2、iaa2-3的IAA2基因突变序列 | 第39页 |
·IAA2基因启动子表达构建 | 第39-40页 |
·基于Gateway~(TM)的IAA2表达载体构建 | 第40-44页 |
·基于Gateway~(TM)的荧光共振能量转移表达载体构建 | 第44-45页 |
·基于Gateway~(TM)的GUS C端和N端表达载体构建 | 第45-46页 |
·表型分析 | 第46-47页 |
·根、下胚轴长度 | 第46页 |
·根、下胚轴向地性 | 第46页 |
·根生长素抗性实验 | 第46页 |
·不定根数统计 | 第46-47页 |
·成年植株表型观察 | 第47页 |
·表达分析 | 第47-48页 |
·半定量检测mRNA表达量 | 第47页 |
·GUS报告基因表达分析 | 第47页 |
·显微观察蛋白表达 | 第47-48页 |
·Western-blots检测蛋白表达 | 第48页 |
·荧光共振能量转移方法研究蛋白之间互作 | 第48-49页 |
·荧光共振能量转移实验材料初步建立 | 第48-49页 |
·拟南芥杂交 | 第49页 |
·本文设计的引物和构建的载体 | 第49-53页 |
第三章 结果和分析 | 第53-91页 |
·拟南芥IAA2 TILLING种子发现了三个突变体但都没有表型 | 第53-58页 |
·IAA2基因TILLING种子遗传分析 | 第53-56页 |
·过量表达IAA2错误蛋白同样没有表型 | 第56-58页 |
·IAA2基因过量表达和RNA干涉IAA2基因并不引起表型表化 | 第58-60页 |
·IAA2过量表达、RNA干涉转基因株系获得 | 第58页 |
·转基因株系没有表型 | 第58页 |
·转基因株系对生长素敏感 | 第58-60页 |
·拟南芥IAA2基因启动子功能研究 | 第60-64页 |
·拟南芥IAA2启动子的克隆和表达载体的构建 | 第61页 |
·pIAA2L∷GUS转基因株系获得 | 第61页 |
·pIAA2L∷GUS表达情况 | 第61-64页 |
·IAA2基因亚细胞定位 | 第64-65页 |
·IAA2 C端、N端融合转基因株系获得 | 第64-65页 |
·IAA2蛋白亚细胞定位 | 第65页 |
·IAA2 Domain Ⅱ的脯氨酸功能研究 | 第65-80页 |
·IAA2基因保守结构域Ⅱ的BglⅡ酶切位点有助于定点突变和回复突变 | 第65-67页 |
·iaa2表达载体鉴定 | 第67页 |
·pIAA2L控制的iaa2表达载体鉴定 | 第67-68页 |
·表达载体转化拟南芥 | 第68页 |
·突变体表型分析 | 第68-80页 |
·IAA2基因机理研究 | 第80-91页 |
·显微观察和western-blots方法检测突变体蛋白降解速度 | 第81-85页 |
·GUS融合的表达载体构建来研究IAA2蛋白(?)素化 | 第85-86页 |
·荧光共振能量转移活体研究蛋白互作 | 第86-91页 |
第四章 讨论 | 第91-106页 |
·IAA2研究背景 | 第91页 |
·IAA2在植物发育过程中高度表达 | 第91-93页 |
·TILLING技术是一种高通量、低成本的反向遗传学研究方法 | 第93-96页 |
·TILLING技术原理 | 第93-94页 |
·TILLING技术的优点 | 第94-95页 |
·拟南芥TILLING种子的缺点 | 第95-96页 |
·简单、高效的Gateway重组克隆系统 | 第96-98页 |
·Gateway重组克隆系统的原理 | 第96页 |
·Gateway重组克隆系统的优点 | 第96-98页 |
·pCAMBIA载体系统缺陷 | 第98页 |
·IAA2蛋白在拟南芥生长和发育具有功能冗余性 | 第98-101页 |
·IAA2在拟南芥生长和发育具有一些独特的功能 | 第101-102页 |
·IAA2保守结构域Ⅱ相邻的两个脯氨酸在蛋白稳定性上起到双重作用 | 第102-104页 |
·荧光共振能量转移活体检测蛋白互作 | 第104-106页 |
致谢 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-127页 |