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棉花Cu/Zn-SOD基因的克隆与表达的初步研究

第一章 文献综述第1-28页
   ·与棉花早熟性及早熟不早衰相关的研究概况第12-14页
     ·早熟性的标记指标方面第12页
     ·棉花早熟性的生理测定指标第12-13页
     ·早熟棉早熟性构成因素的遗传规律的研究第13-14页
     ·棉花早熟不早衰生理生化机制的研究第14页
     ·有关早熟性的基因控制方面的研究第14页
   ·国内外目前棉花基因克隆的研究进展第14-21页
     ·国内棉花基因克隆的研究进展第14-18页
     ·国外棉花基因克隆的研究进展第18-21页
   ·国内外植物超氧化物歧化酶的研究进展第21-23页
     ·超氧化物歧化酶的基本研究第21-23页
     ·超氧化物歧化酶的基因克隆与转基因方面的研究第23页
   ·目前常用的基因克隆的技术方法第23-26页
     ·基因芯片技术分离目的基因第23-24页
     ·基因文库技术分离目的基因第24页
     ·功能蛋白组分离目的基因第24页
     ·PCR技术在基因克隆中的应用第24页
     ·mRNA差别显示技术分离差别表达基因第24-25页
     ·插入突变分离克隆目的基因第25页
     ·图位克隆目的基因第25页
     ·酵母双杂交系统分离克隆基因第25页
     ·生物信息学在分离克隆基因中的应用第25-26页
     ·基于 RACE技术获得cDNA全长第26页
     ·基因分离克隆的新技术第26页
   ·目前国内外克隆其它植物超氧化物歧化酶基因的常用方法第26-27页
   ·本研究的目的意义第27-28页
第二章 棉花超氧化物歧化酶基因的克隆和表达分析第28-66页
   ·实验材料第28-29页
     ·植物材料第28页
     ·菌株和质粒第28页
     ·酶和生化试剂第28-29页
   ·实验方法第29-42页
     ·RNA的提取及质量检测第29-30页
     ·反转录第30-31页
     ·棉花 Cu/Zn-SOD基因的分离第31-39页
     ·棉花 Cu/Zn-SOD基因的Southern blotting分析第39-41页
     ·基因的表达分析第41-42页
     ·棉花 Cu/Zn-SOD基因的生物信息学分析第42页
   ·结果与分析第42-63页
     ·棉花 RNA提取分析第42-43页
     ·棉花 Cu/Zn-SOD基因的克隆和序列分析第43-46页
     ·棉花叶绿体 Cu/ Zn-SOD基因的生物信息学分析第46-53页
     ·棉花 Cu/Zn SOD的Southern blotting分析第53-55页
     ·棉花 Cu/Zn-SOD酶蛋白表达分析第55-57页
     ·棉花胞质 Cu/ Zn-SOD酶蛋白的生物信息学分析第57-62页
     ·棉花叶绿体Cu/Zn SOD和胞质 Cu/Zn SOD的同源性比较第62-63页
   ·讨论第63-66页
     ·Cu/Zn SOD基因的克隆和分析第63-64页
     ·Cu/Zn SOD酶蛋白与植物的活性氧自由基清除第64-65页
     ·棉花叶绿体与胞质Cu/Zn SOD酶蛋白的进化关系第65页
     ·棉花叶绿体与胞质Cu/Zn SOD基因的表达与酶活变化第65-66页
第三章 棉花 Cu/ Zn-SOD基因原核表达载体的构建及表达检测第66-76页
   ·材料与方法第66-67页
     ·材料第66页
     ·方法第66-67页
   ·实验步骤第67-71页
     ·Cu/Zn-SOD基因表达载体的构建第68-69页
     ·表达载体和目标基因的连接第69-70页
     ·SOD基因表达蛋白的电泳检测第70-71页
     ·SOD酶活的测定第71页
   ·结果与分析第71-74页
     ·棉花叶绿体 Cu/Zn SOD原核表达载体构建分析第71-72页
     ·棉花叶绿体 Cu/Zn SOD原核表达载体诱导表达分析第72-74页
   ·讨论第74-76页
     ·棉花叶绿体 Cu/Zn SOD原核表达载体构建第74页
     ·棉花叶绿体 Cu/zn SOD原核表达载体诱导表达第74-76页
第四章 棉花铜锌超氧化物歧化酶基因的植物表达载体的构建第76-81页
   ·材料第76页
   ·方法第76-79页
     ·植物表达载体pBI-YSOD载体的构建第76-77页
     ·农杆菌 LBA4404的感受态细胞制备第77-78页
     ·植物表达载体的构建及筛选第78-79页
   ·结果与分析第79-80页
     ·植物转化载体中间重组子的构建分析第79页
     ·植物表达载体的构建及筛选分析第79-80页
   ·讨论第80-81页
第五章 结论第81-83页
   ·结论第81-82页
   ·进一步工作的设想第82-83页
参考文献第83-91页
附录第91-115页
致谢第115-116页
作者简介第116页

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