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种子特异表达ipt基因载体的构建及转化辣椒的研究

缩略词第1-5页
摘要第5-13页
1 前言第13-25页
   ·文献综述第13-24页
     ·细胞分裂素在种子及果实发育中的作用第13-16页
       ·细胞分裂素促进座果第13-14页
       ·影响果实和种子同化物积累第14-15页
       ·细胞分裂素影响胚乳发育第15页
       ·增加果实大小第15-16页
     ·细胞分裂素作用机制第16-18页
       ·细胞分裂素信号传递及作用方式第16-17页
       ·细胞分裂素产生的部位第17-18页
       ·细胞分裂素构性对活性的影响第18页
     ·细胞分裂素与基因工程第18-20页
       ·改善种子果实性状第19页
       ·延缓植物衰老第19页
       ·改变植物外部形态第19-20页
       ·影响植物生理拮抗第20页
     ·辣椒的离体培养研究进展第20-24页
       ·辣椒的利用价值第20-21页
       ·辣椒的组织培养第21-22页
       ·辣椒的基因工程第22-24页
   ·引言第24-25页
     ·本研究的目的和意义第24页
     ·本文主要研究内容第24-25页
2 材料与方法第25-40页
   ·试验材料第25-27页
     ·植物材料第25页
     ·菌株第25页
     ·载体第25页
     ·培养基第25-26页
       ·植物培养基第25页
       ·细菌培养基第25-26页
     ·常用激素储备液的配制第26页
     ·植物培养条件第26页
     ·工具酶和修饰酶第26页
     ·分子量标准第26页
     ·化学试剂第26页
     ·试剂盒第26页
     ·序列测定及DNA合成第26页
     ·引物序列第26-27页
     ·Linker序列第27页
   ·试验方法第27-40页
     ·植物双元表达载体的构建第27-34页
       ·大肠杆菌质粒DNA的制备(碱裂解法)第27页
       ·质粒DNA酶切片段的回收第27-28页
       ·Linker的制备第28页
       ·DNA片段的连接第28-29页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第29页
       ·大肠杆菌的转化第29页
       ·重组质粒的筛选与鉴定第29-30页
       ·序列测定第30页
       ·菌种保存第30页
       ·植物双元表达载体pFL的构建第30-31页
       ·植物表达载体pMY的构建方法第31-34页
     ·根癌农杆菌的转化第34-35页
       ·农杆菌感受态细胞的制备及转化第34页
       ·农杆菌的PCR鉴定第34-35页
     ·辣椒再生体系的建立第35-38页
       ·辣椒无菌苗的获得第35页
       ·外植体常规离体培养体系第35-37页
       ·鸟喙形外植体再生体系第37-38页
     ·辣椒遗传转化体系的建立第38-39页
       ·外植体对卡那霉素敏感性试验第38页
       ·预培养及共培养对抗性芽再生频率的影响第38页
       ·农杆菌浸染时间对抗性芽再生频率的影响第38-39页
       ·Jcitrin::GUS和Jcitrin::ipt融合基因转化辣椒第39页
       ·辣椒子叶及子叶柄转化的GUS瞬时表达第39页
     ·植物基因组DNA的提取第39页
     ·PCR反应检测转基因的植株第39页
     ·转基因植株的移栽第39-40页
3 结果与分析第40-56页
   ·植物表达载体的构建第40-43页
     ·植物表达载体pFL的构建第40页
     ·中间载体pAP的构建第40-41页
     ·植物表达载体pMY的构建第41-43页
   ·根癌农杆菌的转化第43-44页
   ·辣椒再生体系的优化第44-52页
     ·外植体常规离体培养体系第44-51页
       ·辣椒不定芽的诱导第44-48页
       ·芽伸长培养基的优化第48-50页
       ·生根培养基的优化第50页
       ·再生植株的移栽第50页
       ·再生植株的试管开花现象第50-51页
     ·鸟喙形外植体再生体系第51-52页
       ·培养基对鸟喙形外植体不定芽再生率的影响第51页
       ·苗龄对鸟喙形外植体不定芽再生率的影响第51-52页
   ·农杆菌介导的辣椒遗传转化第52-56页
     ·外植体对卡那霉素的敏感性第52-53页
     ·预培养及共培养对转化频率的影响第53页
     ·农杆菌浸染时间对抗性芽再生频率的影响第53-54页
     ·Jcitrin::GUS融合基因转化辣椒第54-55页
     ·Jcitrin::ipt融合基因转化辣椒第55-56页
4 讨论第56-61页
   ·植物双元表达载体的构建第56页
     ·载体构建的三片段DNA连接第56页
   ·辣椒再生体系的优化第56-59页
     ·子叶放置方式对再生的影响第56-57页
     ·辣椒子叶及子叶柄再生体系存在的问题第57-58页
     ·辣椒的试管开花现象第58页
     ·利用鸟喙形外植体培养法建立辣椒再生体系第58-59页
   ·农杆菌介导的辣椒转化第59-61页
结论第61-62页
参考文献第62-67页
图版第67-73页
科研成果第73-74页
致谢第74页

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