缩略词 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-13页 |
1 前言 | 第13-25页 |
·文献综述 | 第13-24页 |
·细胞分裂素在种子及果实发育中的作用 | 第13-16页 |
·细胞分裂素促进座果 | 第13-14页 |
·影响果实和种子同化物积累 | 第14-15页 |
·细胞分裂素影响胚乳发育 | 第15页 |
·增加果实大小 | 第15-16页 |
·细胞分裂素作用机制 | 第16-18页 |
·细胞分裂素信号传递及作用方式 | 第16-17页 |
·细胞分裂素产生的部位 | 第17-18页 |
·细胞分裂素构性对活性的影响 | 第18页 |
·细胞分裂素与基因工程 | 第18-20页 |
·改善种子果实性状 | 第19页 |
·延缓植物衰老 | 第19页 |
·改变植物外部形态 | 第19-20页 |
·影响植物生理拮抗 | 第20页 |
·辣椒的离体培养研究进展 | 第20-24页 |
·辣椒的利用价值 | 第20-21页 |
·辣椒的组织培养 | 第21-22页 |
·辣椒的基因工程 | 第22-24页 |
·引言 | 第24-25页 |
·本研究的目的和意义 | 第24页 |
·本文主要研究内容 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-40页 |
·试验材料 | 第25-27页 |
·植物材料 | 第25页 |
·菌株 | 第25页 |
·载体 | 第25页 |
·培养基 | 第25-26页 |
·植物培养基 | 第25页 |
·细菌培养基 | 第25-26页 |
·常用激素储备液的配制 | 第26页 |
·植物培养条件 | 第26页 |
·工具酶和修饰酶 | 第26页 |
·分子量标准 | 第26页 |
·化学试剂 | 第26页 |
·试剂盒 | 第26页 |
·序列测定及DNA合成 | 第26页 |
·引物序列 | 第26-27页 |
·Linker序列 | 第27页 |
·试验方法 | 第27-40页 |
·植物双元表达载体的构建 | 第27-34页 |
·大肠杆菌质粒DNA的制备(碱裂解法) | 第27页 |
·质粒DNA酶切片段的回收 | 第27-28页 |
·Linker的制备 | 第28页 |
·DNA片段的连接 | 第28-29页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
·大肠杆菌的转化 | 第29页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第29-30页 |
·序列测定 | 第30页 |
·菌种保存 | 第30页 |
·植物双元表达载体pFL的构建 | 第30-31页 |
·植物表达载体pMY的构建方法 | 第31-34页 |
·根癌农杆菌的转化 | 第34-35页 |
·农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第34页 |
·农杆菌的PCR鉴定 | 第34-35页 |
·辣椒再生体系的建立 | 第35-38页 |
·辣椒无菌苗的获得 | 第35页 |
·外植体常规离体培养体系 | 第35-37页 |
·鸟喙形外植体再生体系 | 第37-38页 |
·辣椒遗传转化体系的建立 | 第38-39页 |
·外植体对卡那霉素敏感性试验 | 第38页 |
·预培养及共培养对抗性芽再生频率的影响 | 第38页 |
·农杆菌浸染时间对抗性芽再生频率的影响 | 第38-39页 |
·Jcitrin::GUS和Jcitrin::ipt融合基因转化辣椒 | 第39页 |
·辣椒子叶及子叶柄转化的GUS瞬时表达 | 第39页 |
·植物基因组DNA的提取 | 第39页 |
·PCR反应检测转基因的植株 | 第39页 |
·转基因植株的移栽 | 第39-40页 |
3 结果与分析 | 第40-56页 |
·植物表达载体的构建 | 第40-43页 |
·植物表达载体pFL的构建 | 第40页 |
·中间载体pAP的构建 | 第40-41页 |
·植物表达载体pMY的构建 | 第41-43页 |
·根癌农杆菌的转化 | 第43-44页 |
·辣椒再生体系的优化 | 第44-52页 |
·外植体常规离体培养体系 | 第44-51页 |
·辣椒不定芽的诱导 | 第44-48页 |
·芽伸长培养基的优化 | 第48-50页 |
·生根培养基的优化 | 第50页 |
·再生植株的移栽 | 第50页 |
·再生植株的试管开花现象 | 第50-51页 |
·鸟喙形外植体再生体系 | 第51-52页 |
·培养基对鸟喙形外植体不定芽再生率的影响 | 第51页 |
·苗龄对鸟喙形外植体不定芽再生率的影响 | 第51-52页 |
·农杆菌介导的辣椒遗传转化 | 第52-56页 |
·外植体对卡那霉素的敏感性 | 第52-53页 |
·预培养及共培养对转化频率的影响 | 第53页 |
·农杆菌浸染时间对抗性芽再生频率的影响 | 第53-54页 |
·Jcitrin::GUS融合基因转化辣椒 | 第54-55页 |
·Jcitrin::ipt融合基因转化辣椒 | 第55-56页 |
4 讨论 | 第56-61页 |
·植物双元表达载体的构建 | 第56页 |
·载体构建的三片段DNA连接 | 第56页 |
·辣椒再生体系的优化 | 第56-59页 |
·子叶放置方式对再生的影响 | 第56-57页 |
·辣椒子叶及子叶柄再生体系存在的问题 | 第57-58页 |
·辣椒的试管开花现象 | 第58页 |
·利用鸟喙形外植体培养法建立辣椒再生体系 | 第58-59页 |
·农杆菌介导的辣椒转化 | 第59-61页 |
结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
图版 | 第67-73页 |
科研成果 | 第73-74页 |
致谢 | 第74页 |