| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 前言 | 第13-25页 |
| 第一章 葡聚糖-寡胺阳离子化合物纳米粒非病毒基因载体的合成 | 第25-56页 |
| ·仪器与试药 | 第25-26页 |
| ·基因载体的合成路线 | 第26-27页 |
| ·氧化葡聚糖的制备 | 第27-46页 |
| ·制备方法 | 第28页 |
| ·氧化葡聚糖的分离 | 第28-29页 |
| ·氧化葡聚糖的表征 | 第29-31页 |
| ·氧化葡聚糖的醛基含量测定 | 第31-42页 |
| ·氧化葡聚糖收率的计算 | 第42-43页 |
| ·正交试验 | 第43-45页 |
| ·九种氧化葡聚糖的制备 | 第45-46页 |
| ·葡聚糖-寡胺阳离子化合物纳米粒基因载体的制备 | 第46-56页 |
| ·基因载体的合成 | 第46-47页 |
| ·载体转染效率的测定 | 第47页 |
| ·基因载体的优选 | 第47-56页 |
| 第二章 基因载体的表征 | 第56-74页 |
| ·仪器与试药 | 第56页 |
| ·红外光谱测定 | 第56-60页 |
| ·紫外光谱测定 | 第60-61页 |
| ·核磁共振测定 | 第61-65页 |
| ·粒径及分布 | 第65-66页 |
| ·Zeta电位测定 | 第66页 |
| ·电镜形态观察 | 第66-68页 |
| ·载体上含伯胺基的精胺的含量测定 | 第68-71页 |
| ·试液的配制 | 第68页 |
| ·标准曲线的制备 | 第68-70页 |
| ·精密度试验 | 第70页 |
| ·回收率测定 | 第70-71页 |
| ·样品测定 | 第71页 |
| ·载体上精胺的总含量测定 | 第71-72页 |
| ·讨论 | 第72页 |
| ·小结 | 第72-74页 |
| 第三章 pEGFP-C_1报告基因的制备及鉴定 | 第74-85页 |
| ·仪器与试药 | 第74-75页 |
| ·试液的配制 | 第75-76页 |
| ·重组pEGFP-C_1报告基因的转化 | 第76页 |
| ·感受态细菌的制备 | 第76页 |
| ·pEGFP-C1重组子的转化 | 第76页 |
| ·pEGFP-C_1重组子的提取 | 第76-77页 |
| ·细菌的增殖和质粒的扩增 | 第76-77页 |
| ·裂解菌体,提取质粒 | 第77页 |
| ·pEGFP-C_1质粒的纯化 | 第77-78页 |
| ·pEGFP-C1质粒的鉴定 | 第78-80页 |
| ·紫外分光光度法检测pEGFP-C1质粒的浓度和纯度 | 第80页 |
| ·讨论 | 第80-84页 |
| ·小结 | 第84-85页 |
| 第四章 基因转染 | 第85-100页 |
| ·仪器与试药 | 第86页 |
| ·细胞培养 | 第86-87页 |
| ·细胞的复苏 | 第86页 |
| ·细胞的传代和细胞接种密度的确定 | 第86-87页 |
| ·DNA-载体复合物的制备 | 第87-88页 |
| ·定量关系的确立 | 第87-88页 |
| ·制备方法 | 第88页 |
| ·载体对DNA的结合压缩试验 | 第88-89页 |
| ·DNA阻滞试验 | 第89-91页 |
| ·DNA电泳检测浓度的确定 | 第89-90页 |
| ·DNA阻滞试验 | 第90-91页 |
| ·基因转染试验 | 第91页 |
| ·影响载体转染效率的因素考察 | 第91-96页 |
| ·载体／DNA用量比对转染效率的影响 | 第91-94页 |
| ·合成反应中精胺与氧化葡聚糖醛基摩尔比对转染效率的影响 | 第94-95页 |
| ·葡聚糖氧化度对转染效率的影响 | 第95-96页 |
| ·讨论 | 第96-99页 |
| ·小结 | 第99-100页 |
| 全文小结 | 第100-103页 |
| 1 小结 | 第100-101页 |
| 2 创新点 | 第101-102页 |
| 3 本文存在的问题 | 第102页 |
| 4 进一步研究展望 | 第102-103页 |
| 发表论文目录 | 第103-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 学位论文原创性声明 | 第111页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第111页 |
