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利迪链霉菌I型聚酮合成酶基因克隆及功能研究

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-10页
前言第10-11页
第一章 文献综述第11-27页
   ·链霉菌基因及功能研究第11-24页
     ·聚酮合成酶第11-15页
     ·抗生素生物合成基因克隆的常用方法及优缺点第15-18页
     ·链霉菌中基因阻断常用的方法第18-19页
     ·阻断后基因功能分析的主要方法第19-24页
   ·本论文的立题背景、意义及主要研究内容第24-27页
第二章 利迪链霉菌原生质体制备及PCR 体系的优化第27-46页
   ·引言第27页
   ·材料与方法第27-31页
     ·菌种第27页
     ·培养基及溶液第27-28页
     ·利迪链霉菌基因组DNA 的提取第28页
     ·PCR 反应体系及反应条件第28-29页
     ·电泳第29页
     ·菌体生长曲线的测定第29页
     ·利迪链霉菌原生质体的制备及制备率和再生率的计算第29-30页
     ·引物设计第30页
     ·主要仪器设备第30页
     ·药品及生化试剂第30-31页
   ·结果与讨论第31-45页
     ·原生质体制备条件的优化第31-39页
     ·利迪链霉菌PCR 条件的优化第39-45页
   ·小结第45-46页
第三章 利迪链霉菌3-氧酰基-ACP 合成酶Ⅱ基因的克隆及功能分析第46-60页
   ·引言第46页
   ·材料与方法第46-51页
     ·菌种和质粒第46-47页
     ·生化试剂和仪器第47页
     ·试验方法第47-51页
   ·结果与分析第51-59页
     ·KS 基因的扩增及序列分析第51-56页
     ·3-氧酰基-ACP 合成酶II 的功能分析第56-59页
   ·小结第59-60页
第四章 硫酯酶Ⅱ基因的克隆及功能分析第60-70页
   ·引言第60页
   ·材料与方法第60-61页
     ·引物设计第60页
     ·其他方法第60-61页
   ·结果与讨论第61-69页
     ·利迪链霉菌中硫酯酶基因的克隆与序列分析第61-66页
     ·硫酯酶II 在利迪链菌素生物合成过程中的作用第66-69页
   ·小结第69-70页
第五章 S-腺苷蛋氨酸合成酶基因的克隆及功能分析第70-83页
   ·引言第70页
   ·材料与方法第70-71页
     ·引物设计第70页
     ·利迪链霉菌菌体中S-腺苷蛋氨酸的提取及含量测定第70-71页
     ·其他方法第71页
   ·结果与讨论第71-82页
     ·S-腺苷蛋氨酸合成酶基因的克隆与序列分析第71-76页
     ·出发菌株与突变株代谢产物的分析第76-81页
     ·几种氨基酸对利迪链霉菌合成利迪链菌素能力的影响第81-82页
   ·小结第82-83页
第六章 细胞色素P450 基因克隆及功能分析第83-93页
   ·引言第83页
   ·材料与方法第83-84页
     ·引物设计第83-84页
     ·其他方法第84页
   ·结果与讨论第84-92页
     ·利迪链霉菌中细胞色素P450 基因的克隆与序列分析第84-88页
     ·出发菌株与突变株代谢产物分析第88-92页
   ·小结第92-93页
第七章 H_2O_2对利迪链霉菌代谢的调控及机理初探第93-102页
   ·引言第93页
   ·材料与方法第93-95页
     ·菌种第93页
     ·试验设计第93-94页
     ·分析方法第94-95页
   ·结果与讨论第95-101页
     ·不同浓度的H_2O_2对菌体生长及生理的影响第95-96页
     ·不同处理时间的H_2O_2对菌体生长及生理的影响第96-97页
     ·稳定期添加H_2O_2对菌体生长及生理的影响第97页
     ·H_2O_2处理对过氧化物酶、过氧化氢酶活性的影响第97-99页
     ·发酵液乙酸乙酯萃取物的液相-质谱分析第99-101页
   ·小结第101-102页
第八章 基于代谢物组分析区分利迪链霉菌及其突变株第102-114页
   ·引言第102页
   ·材料与方法第102-104页
     ·菌株及其来源第102-103页
     ·生化试剂和仪器第103页
     ·试验方法第103页
     ·数据处理第103-104页
   ·结果与讨论第104-113页
     ·运用FTIR 技术及PCA 分析区分利迪链霉菌及其突变株第104-108页
     ·运用FTIR 技术及PCA 分析区分不同培养时间的菌体第108-110页
     ·利迪链霉菌合成利迪链菌素生物标志物的筛选第110-112页
     ·应用人工神经网络进行利迪链霉菌诱变菌株的筛选第112-113页
   ·小结第113-114页
第九章 结论与展望第114-118页
   ·结论第114-115页
   ·展望第115-118页
参考文献第118-131页
发表论文和科研情况说明第131-132页
致谢第132页

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