中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-10页 |
前言 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-27页 |
·链霉菌基因及功能研究 | 第11-24页 |
·聚酮合成酶 | 第11-15页 |
·抗生素生物合成基因克隆的常用方法及优缺点 | 第15-18页 |
·链霉菌中基因阻断常用的方法 | 第18-19页 |
·阻断后基因功能分析的主要方法 | 第19-24页 |
·本论文的立题背景、意义及主要研究内容 | 第24-27页 |
第二章 利迪链霉菌原生质体制备及PCR 体系的优化 | 第27-46页 |
·引言 | 第27页 |
·材料与方法 | 第27-31页 |
·菌种 | 第27页 |
·培养基及溶液 | 第27-28页 |
·利迪链霉菌基因组DNA 的提取 | 第28页 |
·PCR 反应体系及反应条件 | 第28-29页 |
·电泳 | 第29页 |
·菌体生长曲线的测定 | 第29页 |
·利迪链霉菌原生质体的制备及制备率和再生率的计算 | 第29-30页 |
·引物设计 | 第30页 |
·主要仪器设备 | 第30页 |
·药品及生化试剂 | 第30-31页 |
·结果与讨论 | 第31-45页 |
·原生质体制备条件的优化 | 第31-39页 |
·利迪链霉菌PCR 条件的优化 | 第39-45页 |
·小结 | 第45-46页 |
第三章 利迪链霉菌3-氧酰基-ACP 合成酶Ⅱ基因的克隆及功能分析 | 第46-60页 |
·引言 | 第46页 |
·材料与方法 | 第46-51页 |
·菌种和质粒 | 第46-47页 |
·生化试剂和仪器 | 第47页 |
·试验方法 | 第47-51页 |
·结果与分析 | 第51-59页 |
·KS 基因的扩增及序列分析 | 第51-56页 |
·3-氧酰基-ACP 合成酶II 的功能分析 | 第56-59页 |
·小结 | 第59-60页 |
第四章 硫酯酶Ⅱ基因的克隆及功能分析 | 第60-70页 |
·引言 | 第60页 |
·材料与方法 | 第60-61页 |
·引物设计 | 第60页 |
·其他方法 | 第60-61页 |
·结果与讨论 | 第61-69页 |
·利迪链霉菌中硫酯酶基因的克隆与序列分析 | 第61-66页 |
·硫酯酶II 在利迪链菌素生物合成过程中的作用 | 第66-69页 |
·小结 | 第69-70页 |
第五章 S-腺苷蛋氨酸合成酶基因的克隆及功能分析 | 第70-83页 |
·引言 | 第70页 |
·材料与方法 | 第70-71页 |
·引物设计 | 第70页 |
·利迪链霉菌菌体中S-腺苷蛋氨酸的提取及含量测定 | 第70-71页 |
·其他方法 | 第71页 |
·结果与讨论 | 第71-82页 |
·S-腺苷蛋氨酸合成酶基因的克隆与序列分析 | 第71-76页 |
·出发菌株与突变株代谢产物的分析 | 第76-81页 |
·几种氨基酸对利迪链霉菌合成利迪链菌素能力的影响 | 第81-82页 |
·小结 | 第82-83页 |
第六章 细胞色素P450 基因克隆及功能分析 | 第83-93页 |
·引言 | 第83页 |
·材料与方法 | 第83-84页 |
·引物设计 | 第83-84页 |
·其他方法 | 第84页 |
·结果与讨论 | 第84-92页 |
·利迪链霉菌中细胞色素P450 基因的克隆与序列分析 | 第84-88页 |
·出发菌株与突变株代谢产物分析 | 第88-92页 |
·小结 | 第92-93页 |
第七章 H_2O_2对利迪链霉菌代谢的调控及机理初探 | 第93-102页 |
·引言 | 第93页 |
·材料与方法 | 第93-95页 |
·菌种 | 第93页 |
·试验设计 | 第93-94页 |
·分析方法 | 第94-95页 |
·结果与讨论 | 第95-101页 |
·不同浓度的H_2O_2对菌体生长及生理的影响 | 第95-96页 |
·不同处理时间的H_2O_2对菌体生长及生理的影响 | 第96-97页 |
·稳定期添加H_2O_2对菌体生长及生理的影响 | 第97页 |
·H_2O_2处理对过氧化物酶、过氧化氢酶活性的影响 | 第97-99页 |
·发酵液乙酸乙酯萃取物的液相-质谱分析 | 第99-101页 |
·小结 | 第101-102页 |
第八章 基于代谢物组分析区分利迪链霉菌及其突变株 | 第102-114页 |
·引言 | 第102页 |
·材料与方法 | 第102-104页 |
·菌株及其来源 | 第102-103页 |
·生化试剂和仪器 | 第103页 |
·试验方法 | 第103页 |
·数据处理 | 第103-104页 |
·结果与讨论 | 第104-113页 |
·运用FTIR 技术及PCA 分析区分利迪链霉菌及其突变株 | 第104-108页 |
·运用FTIR 技术及PCA 分析区分不同培养时间的菌体 | 第108-110页 |
·利迪链霉菌合成利迪链菌素生物标志物的筛选 | 第110-112页 |
·应用人工神经网络进行利迪链霉菌诱变菌株的筛选 | 第112-113页 |
·小结 | 第113-114页 |
第九章 结论与展望 | 第114-118页 |
·结论 | 第114-115页 |
·展望 | 第115-118页 |
参考文献 | 第118-131页 |
发表论文和科研情况说明 | 第131-132页 |
致谢 | 第132页 |