| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 英文缩略及细菌英文名列表 | 第10-11页 |
| 第一章 鱼类致病菌主要保护性抗原的研究进展 | 第11-22页 |
| 1 主要保护性抗原 | 第11-16页 |
| 1．1 脂多糖(LPS) | 第11-14页 |
| 1．1．1 LPS的化学结构 | 第11-12页 |
| 1．1．2 LPS的化学成分 | 第12页 |
| 1．1．3 LPS的特性 | 第12-13页 |
| 1．1．4 LPS的免疫学特性 | 第13-14页 |
| 1．2 外膜蛋白(OMP) | 第14-16页 |
| 1．2．1 OMP的结构 | 第14页 |
| 1．2．2 OMP的生理功能 | 第14页 |
| 1．2．3 OMP的致病作用 | 第14-15页 |
| 1．2．4 OMP的免疫特性 | 第15-16页 |
| 1．2．5 OMP疫苗的研究前景 | 第16页 |
| 2 主要保护性抗原与菌苗免疫原性之间的关系 | 第16-17页 |
| 3 保护性抗原的提取 | 第17-19页 |
| 3．1 LPS的提取方法 | 第17-18页 |
| 3．1．1 三氯醋酸法 | 第17页 |
| 3．1．2 酚水法 | 第17-18页 |
| 3．1．3 PCP法 | 第18页 |
| 3．1．4 高压处理法 | 第18页 |
| 3．1．5 DMSO法 | 第18页 |
| 3．2 OMP的提取方法 | 第18-19页 |
| 3．2．1 十二烷基肌氨酸钠(Sarkosyl)法 | 第18-19页 |
| 3．2．2 Triton X-100法 | 第19页 |
| 3．2．3 其他方法 | 第19页 |
| 4 影响保护性抗原的表达和产量的主要因素 | 第19-21页 |
| 4．1 环境条件 | 第19-20页 |
| 4．2 培养方式 | 第20页 |
| 4．3 培养温度 | 第20页 |
| 4．4 提取方法 | 第20页 |
| 4．5 培养时间 | 第20-21页 |
| 4．6 其他 | 第21页 |
| 5 存在的问题和发展方向 | 第21-22页 |
| 研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 第二章 哈氏弧菌外膜蛋白和脂多糖的提取及特性分析 | 第23-32页 |
| 1 材料与方法 | 第23-25页 |
| 1．1 材料 | 第23-24页 |
| 1．1．1 供试菌及其培养 | 第23页 |
| 1．1．2 供试兔 | 第23-24页 |
| 1．2 免疫血清的制备 | 第24页 |
| 1．3 LPS的提取和含量测定 | 第24页 |
| 1．4 OMP的提取和含量测定 | 第24页 |
| 1．5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第24-25页 |
| 1．6 免疫印迹实验(Western-blot) | 第25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-29页 |
| 2．1 SDS-PAGE图谱 | 第25-27页 |
| 2．2 Western-blot印迹 | 第27-28页 |
| 2．3 OMP和LPS产量在细菌不同生长阶段的变化 | 第28-29页 |
| 3 讨论 | 第29-31页 |
| 3．1关于OMP和LPS的提取 | 第29页 |
| 3．2 OMP组、LPS组与血清型间的关系 | 第29-30页 |
| 3．3 OMP和LPS的抗原特异性 | 第30-31页 |
| 3．4 培养时间对免疫特性的影响 | 第31页 |
| 4 小结 | 第31-32页 |
| 第三章 培养及其提取条件对哈氏弧菌外膜蛋白表达的影响 | 第32-37页 |
| 1 材料与方法 | 第32-34页 |
| 1．1 菌株及其培养 | 第32-33页 |
| 1．1．1 时间 | 第32页 |
| 1．1．2 温度 | 第32页 |
| 1．1．3 pH值 | 第32-33页 |
| 1．1．4 培养方式 | 第33页 |
| 1．1．5 有无Fe载体 | 第33页 |
| 1．2 OMP的提取 | 第33-34页 |
| 1．2．1 Sarkosyl法 | 第33页 |
| 1．2．2 PMSF法 | 第33页 |
| 1．2．3 Triton X-100法 | 第33-34页 |
| 1．2．4 SDS法 | 第34页 |
| 1．3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-36页 |
| 2．1 不同时间、pH值和培养方式对OMP表达的影响 | 第34页 |
| 2．2 不同温度对OMP表达的影响 | 第34页 |
| 2．3 不同提取方法对OMP特性的影响 | 第34-36页 |
| 3 讨论 | 第36-37页 |
| 第四章 哈氏弧菌保护性抗原对大黄鱼免疫机能的影响 | 第37-46页 |
| 1 材料与方法 | 第37-40页 |
| 1．1 材料 | 第37-38页 |
| 1．1．1 供试鱼 | 第37页 |
| 1．1．2 试验菌株 | 第37-38页 |
| 1．2 抗原的制备 | 第38页 |
| 1．2．1 哈氏弧菌LPS的制备 | 第38页 |
| 1．2．2 哈氏弧菌OMP的制备 | 第38页 |
| 1．2．3 全菌苗的制备 | 第38页 |
| 1．3 吞噬原的制备 | 第38页 |
| 1．4 免疫与采血 | 第38-39页 |
| 1．5 凝集抗体效价的测定 | 第39页 |
| 1．6 溶菌酶活性的测定 | 第39页 |
| 1．7 白细胞吞噬活性的测定 | 第39页 |
| 1．8 攻毒菌液的准备 | 第39页 |
| 1．9 攻毒 | 第39-40页 |
| 1．10 数据处理 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-44页 |
| 2．1 保护性抗原对凝集抗体效价的影响 | 第40-41页 |
| 2．2 保护性抗原对受免鱼血清溶菌酶活性的影响 | 第41页 |
| 2．3 保护性抗原对受免鱼血液白细胞吞噬活性的影响 | 第41-43页 |
| 2．4 保护性抗原的免疫保护性 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| 3．1 3种抗原免疫效果的比较 | 第44页 |
| 3．2 保护性抗原对大黄鱼免疫机能的影响 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-54页 |
| 附录 试剂、缓冲液和染色液的配制 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
