| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-24页 |
| ·聚酮体合成酶 | 第11页 |
| ·丝状真菌聚酮体合成酶的特征 | 第11-12页 |
| ·丝状真菌PKSs的类型 | 第11-12页 |
| ·丝状真菌PKSs的特征 | 第12页 |
| ·已分离和克隆的真菌PKSs | 第12-14页 |
| ·己分离鉴定的真菌 PKSs | 第12-13页 |
| ·新的聚酮体合成酶基因的分离 | 第13-14页 |
| ·真菌 PKSs在系统发育分析中的应用 | 第14页 |
| ·丝状真菌PKSs途径工程 | 第14-15页 |
| ·红曲霉 | 第15-17页 |
| ·红曲霉的分类 | 第15-16页 |
| ·红曲色素 | 第16-17页 |
| ·红曲霉聚酮体研究 | 第17页 |
| ·立题背景 | 第17-18页 |
| ·研究内容和意义 | 第18-19页 |
| 参考文献 | 第19-24页 |
| 第二章 红曲霉原生质体的制备与再生 | 第24-36页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·材料与方法 | 第24-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-33页 |
| ·原生质体制备 | 第28-30页 |
| ·原生质体再生 | 第30-32页 |
| ·原生质体共转化 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| ·本章小结 | 第34页 |
| 参考文献 | 第34-36页 |
| 第三章 红曲霉不同转化方法比较 | 第36-47页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·材料与方法 | 第36-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-45页 |
| ·线性化载体与未线性化载体的转化率比较 | 第41页 |
| ·基于原生质体的传统转化 | 第41-42页 |
| ·基于原生质体的电击转化 | 第42-44页 |
| ·基于萌发孢子的电击转化 | 第44-45页 |
| ·REMI介导的转化 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45页 |
| ·本章小结 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-47页 |
| 第四章 REMI介导的红曲霉遗传转化系统 | 第47-56页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·材料与方法 | 第47-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-53页 |
| ·不同限制性酶对红曲霉转化率的影响 | 第49-50页 |
| ·酶切缓冲液对红曲霉转化的影响 | 第50-51页 |
| ·原生质体浓度对红曲霉转化率的影响 | 第51-52页 |
| ·限制性酶浓度对转化的影响 | 第52页 |
| ·载体DNA用量对红曲霉转化率的影响 | 第52-53页 |
| ·不同类型载体对红曲霉转化率的影响 | 第53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·本章小结 | 第54页 |
| 参考文献 | 第54-56页 |
| 第五章 红曲霉桔霉素编码基因的分离、克隆与功能鉴定 | 第56-83页 |
| ·引言 | 第56页 |
| ·材料与方法 | 第56-66页 |
| ·结果与分析 | 第66-79页 |
| ·pksCT1的克隆和序列分析 | 第66-71页 |
| ·pksCT2的克隆 | 第71页 |
| ·敲除载体的构建 | 第71-73页 |
| ·REMI技术介导菌株CICC5006桔霉素基因的敲除 | 第73页 |
| ·潮霉素B抗性突变株稳定性检测 | 第73页 |
| ·稳定突变株 PCR鉴定 | 第73-74页 |
| ·REMI介导菌株43桔霉素基因的敲除 | 第74页 |
| ·桔霉素检测 | 第74-77页 |
| ·Monacolin K和色价的检测 | 第77-78页 |
| ·菌落形态 | 第78-79页 |
| ·讨论 | 第79-80页 |
| ·本章小结 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-83页 |
| 第六章 Monacolin K编码基因的分离、克隆与功能鉴定 | 第83-99页 |
| ·引言 | 第83页 |
| ·材料与方法 | 第83-86页 |
| ·结果与分析 | 第86-94页 |
| ·monK1的克隆和序列分析 | 第86-88页 |
| ·敲除载体pTmonK1Hyg的构建 | 第88页 |
| ·REMI介导pTmonK1Hyg整合到红曲霉染色体DNA | 第88-89页 |
| ·潮霉素B抗性突变株稳定性检测 | 第89页 |
| ·稳定突变株 PCR验证 | 第89-90页 |
| ·发酵产物Monacolin K的检测 | 第90-93页 |
| ·发酵产物的色价 | 第93页 |
| ·菌落形态 | 第93-94页 |
| ·讨论 | 第94-97页 |
| ·Monacolin K可能的生物合成途径分析 | 第94-96页 |
| ·桔霉素、Monacolin K与红曲霉的产孢的关系 | 第96-97页 |
| ·本章小结 | 第97页 |
| 参考文献 | 第97-99页 |
| 论文主要结论 | 第99-100页 |
| 论文创新点 | 第100-101页 |
| 附录 | 第101-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 攻读博士研究期间发表论文 | 第111页 |
