中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
前言 | 第10-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-33页 |
第一章 植物延熟保鲜基因工程研究进展 | 第12-25页 |
1 乙烯合成相关基因工程研究进展 | 第12-19页 |
1.1 ACC合成酶(ACC synthase) | 第12-15页 |
1.2 ACC氧化酶(ACC oxidase) | 第15-18页 |
1.3 ACC脱氨酶(ACC deaminase) | 第18-19页 |
2 乙烯受体基因工程研究进展 | 第19页 |
3 果实软化相关基因工程研究进展 | 第19-20页 |
3.1 PE(pectinesterase) | 第19-20页 |
3.2 PG(polygalacturonase) | 第20页 |
3.3 Expansin | 第20页 |
4 讨论 | 第20-21页 |
参考文献 | 第21-25页 |
第二章 桃离体转化研究进展 | 第25-29页 |
1 外植体类型 | 第25页 |
2 愈伤组织的诱导与不定芽的分化 | 第25-26页 |
3 生根培养 | 第26-27页 |
4 遗传转化 | 第27页 |
参考文献 | 第27-29页 |
第三章 番茄离体转化研究进展 | 第29-33页 |
1 离体培养 | 第29-30页 |
2 遗传转化 | 第30-31页 |
参考文献 | 第31-33页 |
第二部分 研究报告 | 第33-70页 |
第一章 桃ACC合成酶基因的分离及其生物信息学分析 | 第33-49页 |
1 材料与方法 | 第33-39页 |
1.1 植物材料 | 第33页 |
1.2 质粒和菌种 | 第33页 |
1.3 工具酶与化学试剂 | 第33-34页 |
1.4 质粒DNA的提取 | 第34-35页 |
1.5 植物基因组DNA的提取 | 第35-36页 |
1.6 引物设计与PCR扩增 | 第36-37页 |
1.7 PCR产物的T-A克隆 | 第37页 |
1.8 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化(氯化钙法) | 第37-38页 |
1.9 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化(氯化镁法) | 第38-39页 |
1.10 重组菌落的鉴定 | 第39页 |
1.11 序列测定 | 第39页 |
2 结果与分析 | 第39-47页 |
2.1 桃叶片基因组DNA的提取 | 第39-40页 |
2.2 ACC合成酶基因片段的扩增 | 第40页 |
2.3 PCR产物的T-A克隆及酶切鉴定 | 第40-41页 |
2.4 序列测定、全序列的拼接及其氨基酸序列的推导 | 第41-43页 |
2.5 桃基因组ACC合成酶基因全序列的生物信息学分析 | 第43-47页 |
3 讨论 | 第47页 |
参考文献 | 第47-49页 |
第二章 桃“新白花”离体转化体系的建立 | 第49-55页 |
1 材料与方法 | 第49-50页 |
1.1 材料 | 第49页 |
1.2 外植体的消毒及无菌培养体系的建立 | 第49-50页 |
1.3 培养基及培养条件 | 第50页 |
1.4 数据分析 | 第50页 |
2 结果与分析 | 第50-53页 |
2.1 不同消毒剂对外植体消毒效果的比较 | 第50-51页 |
2.2 不同激素配比对桃离体培养的影响 | 第51-52页 |
2.3 枝芽的生根 | 第52-53页 |
3 讨论 | 第53页 |
参考文献 | 第53-55页 |
第三章 番茄“宝大906”离体转化体系的建立 | 第55-70页 |
1 材料与方法 | 第55-57页 |
1.1 材料 | 第55页 |
1.2 培养基及培养条件 | 第55-56页 |
1.3 无菌苗的获得与接种培养 | 第56页 |
1.4 植株再生 | 第56页 |
1.5 抗生素选择压的确定 | 第56页 |
1.6 根癌农杆菌感受态的制备及其转化(氯化钙法) | 第56页 |
1.7 农杆菌介导法转化番茄 | 第56-57页 |
1.8 PCR方法检测转基因植株 | 第57页 |
2 结果与分析 | 第57-67页 |
2.1 不同激素浓度对子叶和下胚轴离体培养形态的影响 | 第57-59页 |
2.2 不同激素配比对愈伤组织诱导的影响 | 第59-61页 |
2.3 不同6-BA/NAA配比对外植体不定芽分化的影响 | 第61-64页 |
2.4 植株再生 | 第64页 |
2.5 潮霉素选择压的确定 | 第64-65页 |
2.6 农杆菌转化与转化体的筛选 | 第65-67页 |
2.7 PCR方法检测转基因植株 | 第67页 |
3 讨论 | 第67-68页 |
3.1 影响番茄离体培养外植体分化的因素 | 第67-68页 |
3.2 影响番茄农杆菌介导的基因转化效率的因素 | 第68页 |
参考文献 | 第68-70页 |
全文结论 | 第70-71页 |
附录一 主要缩略词表 | 第71-72页 |
附录二 培养基的配方 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |