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红壤地区土壤氨氧化细菌特异性16S rDNA文库的RFLP分析

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-5页
符号与缩略语说明第5-9页
1 绪论第9-20页
   ·氮循环中的氨氧化细菌第9-10页
     ·氮素循环第9页
     ·硝化作用第9页
     ·氨氧化作用第9-10页
   ·氨氧化细菌的分类情况第10-12页
     ·基于形态学的分类情况第10-11页
     ·基于16 rDNA的分类情况第11-12页
   ·氨氧化细菌的研究方法第12-16页
     ·纯培养方法第12-13页
     ·分子生物学研究方法第13-16页
   ·氨氧化细菌在土壤中的多样性第16-20页
     ·土壤中氨氧化细菌的种类第16-17页
     ·土壤因素对氨氧化细菌群落结构的影响第17-20页
2 研究意义与研究方法第20-23页
   ·研究意义第20-21页
   ·研究方法第21-23页
3 土壤性质分析第23-29页
   ·材料与方法第23-26页
     ·取样地点与方法第23页
     ·样品处理与保存第23页
     ·土壤样品理化性质第23页
     ·培养基与试剂第23-25页
     ·平板活菌计数第25页
     ·氨氧化细菌MPN计数第25-26页
   ·结果与分析第26-27页
     ·平板活菌计数结果第26页
     ·氨氧化细菌MPN结果第26-27页
   ·讨论第27-29页
4 红壤荒草地土样总DNA的提取及纯化第29-37页
   ·材料与方法第29-33页
     ·取样地点第29页
     ·试剂与仪器第29-30页
     ·土壤总DNA的提取方法第30-31页
     ·土壤总DNA的纯化第31-33页
     ·提取及回收总DNA的纯度检验第33页
   ·结果与分析第33-35页
     ·三种提取方法的对比第33-34页
     ·三种回收方法的对比第34页
     ·扩增稳定性情况第34-35页
   ·讨论第35-37页
5. 红壤荒草地特异性16S rDNA文库的构建与初步分析第37-48页
   ·材料与方法第37-43页
     ·取样地点第37页
     ·试剂与仪器第37-38页
     ·大肠杆菌总DNA的提取第38-39页
     ·细菌通用16S rRNA基因的PCR扩增第39页
     ·特异性16S rRNA基因的扩增第39-40页
     ·高效感受态细胞的制备第40页
     ·PCR产物的T/A克隆第40-41页
     ·酶连产物的转化第41页
     ·文库的构建、检查与保存第41页
     ·插入片段的扩增第41-42页
     ·限制性内切酶酶切第42页
     ·酶切产物的电泳分析第42页
     ·文库指标分析第42-43页
     ·序列测定第43页
     ·系统发育分析第43页
   ·结果分析第43-46页
     ·巢式PCR扩增第43-44页
     ·文库的RFLP分析第44-45页
     ·文库分析第45-46页
   ·讨论第46-48页
6 氨氧化细菌富集液特异性16S rDNA文库的建立与初步分析第48-57页
   ·材料与方法第48-51页
     ·实验土样第48页
     ·氨氧化细菌培养基第48页
     ·对土样的富集培养第48页
     ·总DNA提取与性质测定第48页
     ·amoA基因扩增第48-49页
     ·特异性16S rDNA扩增第49页
     ·氨氧化细菌特异性16S rDNA文库的构建第49-50页
     ·酶切分型第50-51页
     ·库容分析第51页
     ·测序比对第51页
     ·序列登录号第51页
   ·结果与分析第51-55页
     ·富集效果检测第51-52页
     ·富集液总DNA定量第52-53页
     ·文库的RFLP分析第53-54页
     ·多样性分析第54-55页
   ·讨论第55-57页
总结第57-58页
致谢第58-59页
参考文献第59-65页

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