| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 论文综述部分 | 第7-33页 |
| 第一章 胸腺素α1的研究进展 | 第7-20页 |
| 前言 | 第8页 |
| 1.Tα1的分布 | 第8-9页 |
| 2.Tα1作用机制 | 第9-12页 |
| ·Tα1对胸腺细胞凋亡的调节作用 | 第9-10页 |
| ·Tα1作为BRM的作用机制 | 第10页 |
| ·Tα1对神经系统的调节 | 第10-12页 |
| 3.Tα1的临床应用 | 第12-14页 |
| ·肺癌 | 第12页 |
| ·病毒性肝炎 | 第12-13页 |
| ·肿瘤 | 第13-14页 |
| ·其他 | 第14页 |
| 4.Tα1的基因工程 | 第14-16页 |
| 参考文献 | 第16-20页 |
| 第二章 单链抗体的研究进展 | 第20-33页 |
| 1.ScFv的结构及其特点 | 第21-22页 |
| 2.ScFv的设计和构建 | 第22-23页 |
| 3.ScFv的表达 | 第23-26页 |
| ·启动子、信号肽、ScFv中的接头 | 第24页 |
| ·成熟ScFv的一级结构 | 第24-25页 |
| ·宿主菌及ScFv诱导表达的条件 | 第25页 |
| ·共表达分子伴侣 | 第25-26页 |
| 4.ScFv的应用 | 第26-28页 |
| ·导向载体 | 第26-27页 |
| ·对病毒、毒素等的中和作用 | 第27页 |
| ·基因治疗 | 第27-28页 |
| ·抗肿瘤疫苗 | 第28页 |
| 5.ScFv的不足与展望 | 第28-29页 |
| 参考文献 | 第29-33页 |
| 论文实验部分 | 第33-59页 |
| 第三章 抗肺癌单链抗体融合人胸腺素α1的构建及表达 | 第33-59页 |
| 前言 | 第34-36页 |
| 1.实验材料和仪器 | 第36-40页 |
| ·菌种及质粒 | 第36页 |
| ·酶 | 第36页 |
| ·各种试剂盒 | 第36页 |
| ·缓冲液及其他溶液 | 第36-37页 |
| ·培养液和固体培养基 | 第37-38页 |
| ·其它主要试剂和商品来源 | 第38页 |
| ·电泳胶 | 第38-39页 |
| ·PCR引物 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39-40页 |
| 2.方法 | 第40-45页 |
| ·PCR扩增 | 第40页 |
| ·片段纯化 | 第40页 |
| ·连接 | 第40页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| ·转化细胞 | 第41页 |
| ·蓝白斑筛选 | 第41页 |
| ·PCR筛选 | 第41页 |
| ·质粒抽提 | 第41-42页 |
| ·酶切鉴定 | 第42页 |
| ·重叠延伸PCR法构建单链抗体 | 第42-43页 |
| ·pUCm-T-ScFv'的构建 | 第43页 |
| ·单链抗体基因的改造 | 第43页 |
| ·pET22-ScFv的构建 | 第43页 |
| ·pUCm-T-Tα1质粒的构建 | 第43-44页 |
| ·pET-22-ScFv-Tα1质粒的构建及鉴定 | 第44页 |
| ·Tα1-ScFv的诱导表达 | 第44-45页 |
| 3.结果 | 第45-55页 |
| ·抗体重链和轻链可变区的克隆 | 第45页 |
| ·重链和轻链的序列测定 | 第45-46页 |
| ·轻链基因的修饰 | 第46-47页 |
| ·单链抗体的构建 | 第47-49页 |
| ·单链抗体基因的改造 | 第49页 |
| ·pET22-ScFv的构建 | 第49-50页 |
| ·pUCm-T-Tα1基因的构建 | 第50-51页 |
| ·Tα1-ScFv基因构建 | 第51-53页 |
| ·pET-22-ScFv-Tα1在大肠杆菌中BL21中的表达 | 第53-55页 |
| 4.讨论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 附录1 pET-22b(+)质粒图谱 | 第59-60页 |
| 附录2 英文缩写词表 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |