| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 一.文献综述 | 第11-33页 |
| ·稻瘟病与稻瘟病菌 | 第11-16页 |
| ·稻瘟病菌的生活史、病害循环与防治 | 第11-13页 |
| ·稻瘟病菌是丝状病原真菌分子生物学研究的模式 | 第13-16页 |
| ·丝状真菌的转化 | 第16-24页 |
| ·研究概况 | 第16-17页 |
| ·选择性标记和转化载体 | 第17-19页 |
| ·CaCl_2-PEG转化方法 | 第19-20页 |
| ·电激转化法 | 第20-21页 |
| ·醋酸锂转化 | 第21页 |
| ·脂质体转化 | 第21页 |
| ·微注射法 | 第21页 |
| ·基因枪法 | 第21-22页 |
| ·限制酶介导的整合(Restriction enzyme-mediated integration, REMI) | 第22-24页 |
| ·根癌农杆菌介导的转化(Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation, ATMT) | 第24-31页 |
| ·ATMT在丝状真菌上应用的研究现状 | 第24-25页 |
| ·根癌农杆菌介导真菌遗传转化的机理 | 第25-28页 |
| ·根癌农杆菌介导丝状真菌转化的一般方法 | 第28-29页 |
| ·根癌农杆菌介导的丝状真菌转化的特点 | 第29-31页 |
| ·本研究的目的和内容 | 第31-33页 |
| 二.材料与方法 | 第33-44页 |
| ·实验菌株、质粒与培养条件 | 第33页 |
| ·培养基的配制 | 第33-34页 |
| ·常规分子生物学实验技术 | 第34-38页 |
| ·载体构建 | 第38-39页 |
| ·pATMT1构建 | 第38页 |
| ·pATMT2构建 | 第38-39页 |
| ·农杆菌的冻融法转化 | 第39页 |
| ·稻瘟病菌的T-DNA转化 | 第39-40页 |
| ·转化子DNA提取与分析 | 第40-42页 |
| ·CTAB法提取基因组DNA | 第40-41页 |
| ·PCR验证 | 第41页 |
| ·Southern杂交分析 | 第41-42页 |
| ·突变子的表型分析 | 第42-44页 |
| ·生长速度与产孢量 | 第42页 |
| ·孢子萌发与附着胞形成观察 | 第42-43页 |
| ·致病性测定 | 第43-44页 |
| 三.结果与分析 | 第44-56页 |
| ·双元载体构建 | 第44-45页 |
| ·稻瘟病菌的T-DNA转化 | 第45-46页 |
| ·诱导培养 | 第45页 |
| ·选择培养基中抗生素的选择 | 第45-46页 |
| ·转化效率 | 第46页 |
| ·突变体的检测 | 第46-48页 |
| ·突变体插入稳定性检测 | 第46页 |
| ·PCR检测 | 第46-47页 |
| ·Southern杂交分析 | 第47-48页 |
| ·突变体的表型分析及致病性测定结果 | 第48页 |
| ·典型突变体pATMT1-412分析 | 第48-56页 |
| ·致病性测定 | 第48-50页 |
| ·表型分析 | 第50-54页 |
| ·致病缺陷突变体Al-412的T-DNA插入拷贝数 | 第54-56页 |
| 四.讨论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
