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水杨酸调节怀槐培养细胞合成异黄酮与碳氮代谢的关系研究

一 前言第1-26页
   ·植物次生代谢产物与药用植物培养细胞第13-14页
   ·诱导子对植物次生代谢产物合成的调控第14-17页
   ·水杨酸调节植物细胞次生代谢研究第17-19页
   ·药用植物怀槐生产异黄酮的研究第19-25页
     ·怀槐植物分布及其形态特征第19-20页
     ·怀槐的化学成分第20页
     ·怀槐主要药理作用第20-23页
     ·研究怀槐培养细胞生产异黄酮的目的和意义第23-25页
   ·本论文研究工作体系第25-26页
二 材料与方法第26-33页
   ·仪器与试剂第26页
   ·材料第26页
     ·植物材料第26页
     ·动物材料第26页
   ·方法第26-33页
     ·怀槐细胞悬浮培养第27页
     ·水杨酸诱导子和异黄酮标准品溶液配制第27页
     ·怀槐细胞样品处理第27页
     ·TLC及HPLC色谱条件第27页
     ·实验数据处理及样品中异黄酮含量计算第27页
     ·怀槐培养细胞异黄酮提取物的保肝作用实验方法第27-28页
     ·可溶性糖含量的测定第28-29页
     ·蔗糖合成酶(SS,EC 2.4.1.13)、蔗糖磷酸合成酶(SPS,EC 2.4.1.14)和蔗糖酶(Invertase,EC 3.2.1.26)活性的测定第29-30页
     ·葡萄糖6—磷酸脱氢酶(G6PD,EC 1.1.1.49)活性的测定第30页
     ·可溶性离子NH_4~+、NO_3~-的含量测定第30页
     ·硝酸还原酶(NR,EC 1.6.6.1)、谷氨酸合酶(GOGAT,EC 1.4.1.14)和谷氨酰胺合成酶(GS,EC 6.3.1.2)活性的测定第30-31页
     ·3-脱氧—α—阿拉伯庚酮糖酸—7—磷酸合酶(DAHPS,EC 4.1.2.15)和苯丙氨酸氨基裂解酶(PAL,EC 4.3.1.5)酶活性的测定第31-32页
     ·可溶性蛋白含量的测定第32页
     ·透射电镜分析样品制备第32-33页
三 实验结果第33-53页
   ·怀槐培养细胞异黄酮含量HPLC检测方法的建立第33-38页
     ·怀槐培养细胞异黄酮提取与色谱分离条件的优化第33-35页
     ·标准曲线和检测限第35页
     ·精密度和重现性的考察第35-36页
     ·加样回收率的考察第36页
     ·稳定性的考察第36页
     ·培养细胞中异黄酮含量的测定第36-38页
   ·怀槐培养细胞异黄酮提取物的保肝作用第38-41页
   ·怀槐培养细胞生长与异黄酮积累的动力学关系第41-42页
   ·SA对怀槐培养细胞生长和异黄酮合成以及DAHPS和PAL酶活性的影响第42-44页
   ·SA调节细胞碳代谢第44-48页
     ·SA调节培养基和细胞内可溶性糖含量的变化第44-46页
     ·SA调节细胞碳代谢关键酶活性的变化第46-48页
   ·SA调节细胞氮代谢第48-51页
     ·SA调节培养基和细胞内铵盐和硝酸盐含量的变化第48-49页
     ·SA调节细胞氮代谢关键酶活性的变化第49-51页
   ·SA对细胞超微结构的影响第51-53页
四 讨论第53-59页
   ·怀槐培养细胞异黄酮含量HPLC检测方法的建立及生长和含量关系分析第53页
   ·怀槐培养细胞异黄酮提取物的保肝作用第53-54页
   ·SA对怀槐培养细胞生长和异黄酮合成的影响第54-58页
     ·SA调节怀槐培养细胞碳代谢第55-57页
     ·SA对怀槐培养细胞氮代谢的调控第57-58页
   ·SA诱导怀槐培养细胞超微结构的变化第58-59页
五 结论第59-60页
参考文献:第60-69页

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