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拟南芥T-DNA插入突变体的蛋白质谱分析

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第一章 引言第10-25页
 1 现代农业生物技术的发展及生物安全第10-12页
 2 转基因植物可能产生的非预期效应第12-18页
 3 植物蛋白质学研究进展及其在生物安全研究中的应用第18-24页
 4 本研究的立题依据和研究意义第24-25页
第二章 拟南芥的遗传转化第25-29页
 1 材料与方法第25-28页
   ·野生型拟南芥的种植第25-26页
   ·转化载体第26页
   ·花器浸蘸法转化第26-27页
   ·拟南芥基因组DNA的提取(CTAB法)第27页
   ·拟南芥突变株的PCR鉴定第27-28页
 2 结果第28-29页
   ·拟南芥突变体基因组DNA的提取第28页
   ·拟南芥突变体的PCR鉴定结果第28-29页
第三章 T-DNA插入位点侧翼序列的测定第29-36页
 1 材料与方法第29-32页
   ·试剂和仪器第29页
   ·拟南芥突变株的TAIL-PCR第29-31页
   ·靶条带的扩增及回收第31-32页
   ·T-DNA插入位点的确定第32页
 2 结果第32-36页
   ·拟南芥突变体TAIL-PCR鉴定结果第32页
   ·本试验中选择的突变体的T-DNA侧翼序列测定结果第32-35页
   ·本试验选择的突变体的T-DNA插入位点第35-36页
第四章 拟南芥突变体的蛋白质组学分析第36-60页
 1 材料与方法第36-39页
   ·材料第36页
   ·培育植株第36页
   ·组织蛋白的提取第36-37页
   ·蛋白含量测定第37页
   ·等电聚焦电泳第37页
   ·IPG胶条的平衡第37页
   ·SDS-PAGE第37-38页
   ·凝胶扫描和图像分析第38页
   ·胶内蛋白质酶解第38页
   ·MALDI-TOF MS第38页
   ·蛋白质数据库检索第38-39页
 2 结果第39-57页
   ·蛋白质含量测定第39页
   ·拟南芥蛋白质双向电泳第39-40页
   ·拟南芥突变体蛋白质双向电泳图谱的软件分析第40-41页
   ·拟南芥突变体差异表达蛋白质MALDI-TOF鉴定第41-43页
   ·拟南芥突变体蛋白质组双向电泳及差异蛋白鉴定结果第43-57页
 3 讨论第57-60页
   ·2-DE方法对拟南芥蛋白质组的分离第57页
   ·MS鉴定蛋白质第57页
   ·表达差异蛋白质的区分标准第57-58页
   ·已鉴定的蛋白质的功能分类第58页
   ·某些蛋白质出现在多个插入位点类的突变体中第58-59页
   ·蛋白质组学研究可为非预期效应研究提供有益线索第59页
   ·蛋白质组学在转基因植物非预期效应研究中的应用需要标准化第59-60页
第五章 结论第60-61页
参考文献第61-72页
致谢第72页

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