摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第一章 引言 | 第10-25页 |
1 现代农业生物技术的发展及生物安全 | 第10-12页 |
2 转基因植物可能产生的非预期效应 | 第12-18页 |
3 植物蛋白质学研究进展及其在生物安全研究中的应用 | 第18-24页 |
4 本研究的立题依据和研究意义 | 第24-25页 |
第二章 拟南芥的遗传转化 | 第25-29页 |
1 材料与方法 | 第25-28页 |
·野生型拟南芥的种植 | 第25-26页 |
·转化载体 | 第26页 |
·花器浸蘸法转化 | 第26-27页 |
·拟南芥基因组DNA的提取(CTAB法) | 第27页 |
·拟南芥突变株的PCR鉴定 | 第27-28页 |
2 结果 | 第28-29页 |
·拟南芥突变体基因组DNA的提取 | 第28页 |
·拟南芥突变体的PCR鉴定结果 | 第28-29页 |
第三章 T-DNA插入位点侧翼序列的测定 | 第29-36页 |
1 材料与方法 | 第29-32页 |
·试剂和仪器 | 第29页 |
·拟南芥突变株的TAIL-PCR | 第29-31页 |
·靶条带的扩增及回收 | 第31-32页 |
·T-DNA插入位点的确定 | 第32页 |
2 结果 | 第32-36页 |
·拟南芥突变体TAIL-PCR鉴定结果 | 第32页 |
·本试验中选择的突变体的T-DNA侧翼序列测定结果 | 第32-35页 |
·本试验选择的突变体的T-DNA插入位点 | 第35-36页 |
第四章 拟南芥突变体的蛋白质组学分析 | 第36-60页 |
1 材料与方法 | 第36-39页 |
·材料 | 第36页 |
·培育植株 | 第36页 |
·组织蛋白的提取 | 第36-37页 |
·蛋白含量测定 | 第37页 |
·等电聚焦电泳 | 第37页 |
·IPG胶条的平衡 | 第37页 |
·SDS-PAGE | 第37-38页 |
·凝胶扫描和图像分析 | 第38页 |
·胶内蛋白质酶解 | 第38页 |
·MALDI-TOF MS | 第38页 |
·蛋白质数据库检索 | 第38-39页 |
2 结果 | 第39-57页 |
·蛋白质含量测定 | 第39页 |
·拟南芥蛋白质双向电泳 | 第39-40页 |
·拟南芥突变体蛋白质双向电泳图谱的软件分析 | 第40-41页 |
·拟南芥突变体差异表达蛋白质MALDI-TOF鉴定 | 第41-43页 |
·拟南芥突变体蛋白质组双向电泳及差异蛋白鉴定结果 | 第43-57页 |
3 讨论 | 第57-60页 |
·2-DE方法对拟南芥蛋白质组的分离 | 第57页 |
·MS鉴定蛋白质 | 第57页 |
·表达差异蛋白质的区分标准 | 第57-58页 |
·已鉴定的蛋白质的功能分类 | 第58页 |
·某些蛋白质出现在多个插入位点类的突变体中 | 第58-59页 |
·蛋白质组学研究可为非预期效应研究提供有益线索 | 第59页 |
·蛋白质组学在转基因植物非预期效应研究中的应用需要标准化 | 第59-60页 |
第五章 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-72页 |
致谢 | 第72页 |