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烟粉虱(Bemisia tabaci)内共生菌分子变异、传毒相关groEL基因的克隆及原核表达研究

第一章 文献综述第1-44页
 第一节 烟粉虱及其危害第14-19页
  1 分类地位第14页
  2 形态特征第14-15页
  3 烟粉虱生活史第15页
  4 起源与分布第15页
  5 烟粉虱与温室白粉虱的区别第15-16页
  6 烟粉虱寄主及为害特点第16-17页
  7 烟粉虱的防治第17-19页
 第二节 昆虫内共生菌研究概况第19-25页
  1 内共生菌的特点第19页
  2 内共生菌在昆虫中的分布第19-20页
  3 内共生菌的种类第20-21页
  4 内共生菌与宿主的关系第21-22页
  5 消除内共生菌的方法第22页
  6 烟粉虱的内共生菌第22-24页
  7 研究内共生菌的意义第24-25页
 第三节 与昆虫传播植物病毒相关的几种蛋白质第25-30页
  1 昆虫的下鄂口针蛋白第25页
  2 昆虫内共生菌产生的GroEL蛋白第25-27页
  3 病毒的外壳蛋白第27-29页
  4 病毒的辅助蛋白质成分第29页
  5 病毒虫传相关蛋白研究的科学意义与展望第29-30页
 第四节 影响基因原核表达的因素第30-33页
  1 表达载体和外源基因中密码子的选用第30-31页
  2 mRNA的稳定性及一、二级结构的作用第31页
  3 宿主的选择第31页
  4 培养条件的控制第31-33页
 第五节 立题背景与技术路线第33-35页
  1 立题背景第33-34页
  2 试验技术路线第34-35页
 参考文献第35-44页
第二章 烟粉虱与温室白粉虱[Trialeurodes vaporariorum(westwood)]内共生菌的比较研究第44-63页
 1 材料与方法第45-47页
 2 结果与分析第47-54页
   ·烟粉虱与温室白粉虱内共生菌的电子显微镜观察第47页
   ·烟粉虱内共生菌groEL PCR扩增引物的筛选第47-51页
   ·引物C与引物D对烟粉虱与温室白粉虱内共生菌groEL的扩增第51-52页
   ·烟粉虱与温室白粉虱内共生菌16S rDNA的PCR扩增第52-54页
   ·序列及其分析第54页
 3 小结与讨论第54-56页
 参考文献第56-63页
第三章 烟粉虱内共生菌16S rDNA的变异与系统发生第63-82页
 1 材料与方法第64-67页
 2 结果与分析第67-76页
   ·内共生菌16S rDNA的PCR扩增第67页
   ·初生内共生菌16S rDNA的酶切结果第67-68页
   ·次生内共生菌16S rDNA的酶切结果第68-69页
   ·烟粉虱内共生菌16S rDNA的限制性酶切位点第69-71页
   ·烟粉虱内共生菌的系统进化地位第71页
   ·初生内共生菌16S rDNA系统进化树及其分析第71页
   ·次生内共生菌16S rDNA系统进化树及其分析第71-73页
   ·烟粉虱内共生菌16S rDNA基因的(G+C)mol%含量分析第73页
   ·不同有机体16S rDNA的系统进化树及其分析第73-76页
 3 小结与讨论第76-80页
 参考文献第80-82页
第四章 烟粉虱内共生菌groEL基因的变异与系统发生第82-98页
 1 材料与方法第82-86页
 2 结果与分析第86-95页
   ·烟粉虱内共生菌groEL的PCR扩增第86页
   ·引物D对烟粉虱可培养细菌与内共生菌的PCR扩增第86页
   ·克隆菌株的蓝白斑筛选第86-87页
   ·单菌落培养物的PCR扩增第87-89页
   ·groEL阳性克隆质粒的鉴定第89-90页
   ·内共生菌groEL基因系统进化树的建立与分析第90页
   ·内共生菌GroEL氨基酸序列系统进化树的建立与分析第90-93页
   ·内共生菌GroEL氨基酸序列的比较分析第93-95页
 3 小结与讨论第95-97页
 参考文献第97-98页
第五章 烟粉虱内共生菌groEL基因的克隆与原核表达第98-110页
 1 材料与方法第98-103页
 2 结果与分析第103-107页
   ·烟粉虱内共生菌传毒相关基因的克隆与蓝白斑筛选第103-104页
   ·阳性克隆的PCR鉴定第104-105页
   ·PinXaGROEL菌株质粒的PCR与酶切鉴定第105-106页
   ·核苷酸序列分析第106-107页
   ·目的融合蛋白的表达第107页
 3 小结与讨论第107-109页
 参考文献第109-110页
第六章 烟粉虱内共生菌groEL基因原核表达条件的研究第110-122页
 1 材料与方法第110-113页
 2 结果与分析第113-119页
   ·IPTG浓度对groEL原核表达的影响第113-114页
   ·groEL原核表达的动态第114页
   ·接种量对groEL原核表达的影响第114-116页
   ·初始pH值对gFoEL原核表达的影响第116-117页
   ·阳离子对groFL原核表达的影响第117页
   ·NH_4~-浓度对groEL原核表达的影响第117-118页
   ·葡萄糖对groEL原核表达的影响第118页
   ·温度对groEL原核表达的影响第118-119页
   ·温度与IPTG对groEL的诱导表达第119页
 3 小结与讨论第119-121页
 参考文献第121-122页
第七章 主要结论与创新之处第122-124页
 1 主要结论第122页
 2 创新之处第122-123页
 3 下一步设想第123-124页
附录第124-139页
 附录一 碱裂解法小量提取质粒DNA第124-126页
 附录二 碱裂解法细菌总DNA小量提取第126-127页
 附录三 培养基第127-128页
 附录四 试剂与溶液第128-132页
 附录五 大肠杆菌CaCl_2法感受态细胞制备及转化第132-133页
 附录六 表达菌株测序图谱第133-139页
致谢第139-138页
作者简历第138-139页

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