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昆虫NPV垂直传递和PCR检测的研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
引  言第13-15页
第一章 文献综述第15-29页
 1 昆虫核型多角体病毒(NPV)的分类地位和结构第15-16页
   ·NPV的分类地位第15-16页
   ·NPV的结构第16页
 2 昆虫NPV多角体的理化性质第16-17页
 3 昆虫NPV的感染机制及其复制lO第17-18页
 4 昆虫NPV的感染途径和传播方式第18-20页
   ·NPV的感染途径1l第18页
   ·NPV的传播途径第18-20页
 5 昆虫NPV垂直传递的研究第20-23页
   ·昆虫NPV垂直传递的研究方法第20-21页
   ·昆虫NPV持续感染的研究第21-23页
 6 昆虫NPV的分子检测技术研究第23-27页
   ·血清学检测第23-24页
   ·核酸检测第24-27页
     ·核酸分子杂交技第24-25页
   6 2.2 PCR技术第25-26页
   ·3基因芯片技术第26-27页
 7 昆虫NPV的应用前景第27-29页
第二章棉铃虫NPV毒力测定的结果与分析第29-35页
   ·材料与方法第29-30页
     ·材料第29页
       ·供试病毒第29页
       ·主要试验试剂第29页
       ·试验设备及仪器第29页
     ·试验方法第29-30页
       ·HaNPV的体内增殖第29页
   2 1.2.2 HaNPV的提取与纯化第29-30页
       ·接毒和检查方法第30页
       ·数据整理第30页
   ·结果与分析第30-33页
     ·不同感染浓度、剂量与死亡率的关系第30-32页
     ·感染时间与死亡率的关系第32-33页
   ·讨论第33-35页
第三章 棉铃虫NPV室内垂直传代的研究第35-43页
   ·材料与方法第35-37页
  3 1.1材料第35页
       ·供试病毒珠系第35页
       ·试验设备及仪器第35页
       ·试验主要试剂第35页
       ·人工饲料主要组成第35页
     ·5成虫饲养液配置第35页
     ·方法第35-37页
       ·亲代(F0代)携带HaNPV的虫源的获取第35-36页
       ·传代和检查方法第36页
       ·棉铃虫的饲养方法第36页
         ·传代幼虫的管理第36页
         ·传代蛹的管理第36页
         ·传代成虫的管理第36页
         ·传代卵的管理第36页
       ·试验器具的消毒和灭菌方法第36-37页
       ·有关的计算公式第37页
   ·结果与分析第37-41页
     ·亲代(F0代)的试验结果与分析第37页
     ·子一代(F1代)的试验结果与分析第37-38页
     ·子二代(F2代)的试验结果与分析第38-39页
     ·子三代(F3代)的试验结果与分析第39页
  3 2.5子四代(F4代)的试验结果与分析第39-40页
     ·各代间平均单头蛹重的变化比较第40页
     ·各代间化蛹率的变化比较第40页
     ·各代间羽化率的比较第40-41页
     ·各代间幼虫死亡率的比较第41页
   ·讨论第41-43页
第四章 棉铃虫核型多角体病毒(HaNPV)PCR检测的研究第43-56页
   ·材料与方法第43-52页
     ·材料第43-46页
       ·供试毒株与菌株第43页
       ·主要培养基及其配置第43页
       ·主要试剂的配置第43-45页
   4 1.1.4主要试剂第45页
       ·主要的设备及仪器第45-46页
  4 1.2方法第46-52页
   ·2.1棉铃虫NPV的提取与纯化第46页
       ·DNA的提取第46-47页
       ·铃虫核型多角体病毒DNA浓度的测定第47-48页
       ·引物的设计第48-49页
       ·PCR扩增第49页
       ·扩增片段的回收/纯化第49-50页
       ·纯化片段与pGEM-T Easy(Promega)载体连接第50页
       ·感受态细胞DH5 Q制备的主要步骤第50页
       ·连接产物的转化第50-51页
       ·阳性克隆的鉴定第51页
       ·PCR检测HaNPV病毒基因组核酸敏感性鉴定第51页
       ·PCR检测体系的应用第51-52页
   ·结果与分析第52-55页
     ·棉铃虫核型多角体病毒DNA浓度的测定结果第52页
     ·HaNPV病毒基因组核酸的PCR扩增结果第52页
     ·HaNPV病毒基因组核酸的PCR扩增片段的测序结果第52-54页
     ·PCR检测HaNdY病毒基因组核酸敏感性鉴定第54-55页
     ·PCR检测的应用第55页
     ·利用PCR对各代蛹的检测结果第55页
   ·讨论第55-56页
第五章 结论第56-58页
附录第58-62页
参考文献第62-68页

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