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幽门螺旋杆菌UreB基因克隆及其转植物研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
第一章 文献综述-植物生产疫苗和幽门螺旋杆菌疫苗研究进展第11-28页
 1 植物生产疫苗的研究进展第11-19页
   ·植物生产疫苗的特点第11-13页
   ·植物生产疫苗的产生原因第13-14页
   ·生产疫苗的植物表达系统第14-15页
   ·疫苗表达植物的选择第15-17页
   ·植物疫苗的一些思考第17-19页
 2 幽门螺旋杆菌疫苗研究进展第19-28页
   ·Hp疫苗保护性抗原第19-26页
     ·全菌抗原第20-21页
     ·尿素酶第21-23页
     ·空泡毒素和毒素相关蛋白第23-24页
     ·热休克蛋白第24页
     ·其它第24-26页
   ·粘膜免疫佐剂第26页
   ·展望第26-28页
第二章 UreB基因克隆、序列分析及其植物表达载体的构建第28-45页
 1 材料和方法第28-34页
   ·实验材料第28-29页
     ·质粒与菌株第28页
     ·酶及主要试剂第28-29页
   ·实验方法第29-34页
     ·Hp染色体DNA的提取第29页
     ·PCR扩增UreB基因第29-30页
     ·琼脂糖凝胶电泳第30页
     ·DNA片段回收第30-31页
     ·DNA酶切第31页
     ·DNA连接第31页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第31页
     ·DNA转化大肠杆菌第31-32页
     ·质粒DNA的小量快速抽提第32页
     ·质粒DNA的大量制备第32-33页
     ·质粒DNA的纯化第33-34页
     ·菌种保存第34页
     ·DNA定量第34页
     ·UreB克隆基因序列测定第34页
     ·序列分析第34页
 2 结果和分析第34-44页
   ·UreB基因克隆第34-37页
   ·UreB基因序列测定第37页
   ·与GenBank中公布的菌株UreB序列比较第37-39页
   ·pBI-UreB表达载体的构建第39-41页
   ·pCA-UreB表达载体的构建第41-44页
 3 讨论第44-45页
第三章 农杆菌介导的烟草转化第45-57页
 1 材料和方法第45-51页
   ·实验材料第45页
   ·实验方法第45-51页
     ·农杆菌的培养第45页
     ·DNA直接导入农杆菌第45-46页
     ·农杆菌介导的转化第46-47页
     ·CTAB法大量提取植物基因组DNA第47页
     ·PCR检测转化植株第47-48页
     ·PCR-Southern杂交检测转化植株第48-49页
     ·Western-blot检测转转化植株第49-51页
 2 结果和分析第51-54页
   ·烟草转化植株的获得第51-52页
   ·烟草转化植株的PCR法鉴定第52页
   ·烟草转化植株的PCR-Southern分析第52-53页
   ·烟草转化植株的SDS-PAGE分析第53-54页
   ·烟草转化植株的Western-blot分析第54页
 3 讨论第54-57页
第四章 农杆菌介导的水稻和草莓转化第57-70页
 1 材料和方法第57-61页
   ·实验材料第57页
   ·实验方法第57-61页
     ·水稻愈伤的获取第57-58页
     ·农杆菌培养第58页
     ·共培养和水稻抗性愈伤组织的选择第58页
     ·GUS基因组织化学染色第58-59页
     ·水稻抗性愈伤组织的诱导分化和生根第59页
     ·水稻转化植株DNA提取第59页
     ·PCR检测转基因植株第59页
     ·PCR-Southern杂交检测水稻转化植株第59页
     ·Western-blot检测水稻转化植株第59页
     ·草莓外植株选择压力的确定第59页
     ·叶盘法转化草莓第59-61页
 2 结果和分析第61-67页
   ·水稻胚性愈伤组织诱导和培养第61-62页
   ·水稻转化植株的获得第62-63页
   ·水稻抗性愈伤组织GUS染色第63页
   ·水稻转化植株的PCR检测第63-64页
   ·水稻转化植株的PCR-Southern分析第64-65页
   ·水稻转化植株的SDS-PAGE分析第65页
   ·水稻转化植株的Western-blot分析第65-66页
   ·草莓外植体选择压的确定第66页
   ·草莓抗性愈伤组织的获得第66-67页
   ·PCR检测草莓抗性愈伤组织第67页
 3 讨论第67-70页
参考文献第70-77页
致谢第77页

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