| 1 引言 | 第1-34页 |
| ·小麦黄矮病概况 | 第10-12页 |
| ·小麦黄矮病的发生、分布及危害 | 第10-11页 |
| ·BYDVs的寄主范围 | 第11页 |
| ·BYDVs的症状、介体及经济意义 | 第11-12页 |
| ·病害的生态学效应与防治 | 第12页 |
| ·BYDVs的分子生物学 | 第12-23页 |
| ·BYDVs的分类及物理特性 | 第14页 |
| ·BYDVs基因组结构特征 | 第14-15页 |
| ·BYDVs基因产物及其功能 | 第15-19页 |
| ·BYDVs基因表达机制 | 第19-23页 |
| ·抗病毒转基因小麦研究进展 | 第23-27页 |
| ·植物源抗性的应用 | 第23-24页 |
| ·人工构建抗性基因的应用 | 第24-27页 |
| ·小麦的基因转化技术 | 第27-29页 |
| ·外源DNA种类 | 第27页 |
| ·受体种类 | 第27页 |
| ·转化方法 | 第27-29页 |
| ·本研究的目的意义及可行性分析 | 第29-32页 |
| ·主要研究内容及技术路线 | 第32-34页 |
| 2 BYDV-GPV株系正向串联结构复制酶基因植物表达载体的构建 | 第34-59页 |
| ·材料与方法 | 第34-46页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-57页 |
| ·ORF1和ORF2基因的RT-PCR结果 | 第46页 |
| ·pGEMORF1质粒的获得 | 第46-47页 |
| ·pGEMORF2质粒的获得 | 第47-48页 |
| ·植物表达载体pWORF1质粒的获得 | 第48-50页 |
| ·植物表达载体pPPI29的构建 | 第50-53页 |
| ·插入序列的测定分析 | 第53-57页 |
| ·小结与讨论 | 第57-59页 |
| ·人工构建大麦黄矮病毒病抗性基因具有重要意义 | 第57页 |
| ·具有重叠区域外源基因的串联构建植物表达载体的策略 | 第57-59页 |
| 3 花粉管通道法介导pPPI29的小麦遗传转化 | 第59-73页 |
| ·材料与方法 | 第59-67页 |
| ·花粉管通道法转化材料 | 第59-60页 |
| ·花粉管通道法转化方法 | 第60-61页 |
| ·筛选幼苗的检测 | 第61-66页 |
| ·TO代转基因苗的抗病性鉴定 | 第66-67页 |
| ·结果与分析 | 第67-70页 |
| ·花粉管通道法转化小麦的情况 | 第67页 |
| ·pPPI29转化材丰斗的点杂交结果 | 第67-68页 |
| ·阳性小麦的PCR扩增结果 | 第68页 |
| ·阳性材料的PCR-Southern分析 | 第68-70页 |
| ·田间抗病性鉴定结果 | 第70页 |
| ·小结和讨论 | 第70-73页 |
| ·花粉管通道法转化技术探讨 | 第70-71页 |
| ·田间抗病性鉴定是抗病性鉴定的重要依据 | 第71-72页 |
| ·接种体压力与植株田间的抗感病表型密切相关 | 第72-73页 |
| 4 基因枪法介导的小麦遗传转化 | 第73-79页 |
| ·材料与方法 | 第73-75页 |
| ·材料 | 第73页 |
| ·方法 | 第73-75页 |
| ·结果与分析 | 第75-77页 |
| ·基因枪法转化及检测小麦情况 | 第75页 |
| ·点杂交结果 | 第75-76页 |
| ·对基因枪转化小麦的PCR及PCR-Southern分析 | 第76-77页 |
| ·小结与讨论 | 第77-79页 |
| ·适宜的转化受体是小麦遗传转化成功与否的关键因素 | 第77页 |
| ·适宜的选择剂及选择压力是获得转基因小麦的重要因素 | 第77-78页 |
| ·单子叶植物转基因研究仍然困难重重 | 第78-79页 |
| 5 植物激素对不同小麦品种成熟胚愈伤组织形成的影响 | 第79-88页 |
| ·材料和方法 | 第79-83页 |
| ·品种 | 第79-80页 |
| ·外植体 | 第80页 |
| ·小麦成熟胚的获取 | 第80页 |
| ·小麦愈伤组织培养基 | 第80-81页 |
| ·试验的设计及实施 | 第81-83页 |
| ·结果与分析 | 第83-86页 |
| ·陇鉴127品种成熟胚愈伤组织诱导率回归模型建立 | 第83-84页 |
| ·陕160品种成熟胚愈伤组织诱导率回归模型建立 | 第84-86页 |
| ·小结与讨论 | 第86-88页 |
| 6 原核表达载体构建及蛋白初步表达 | 第88-96页 |
| ·材料与方法 | 第88-92页 |
| ·材料 | 第88页 |
| ·方法 | 第88-92页 |
| ·结果与分析 | 第92-94页 |
| ·pETORF1及pETORF2质粒的构建 | 第92-93页 |
| ·ORF1及ORF2基因编码蛋白的初步表达 | 第93-94页 |
| ·小结与讨论 | 第94-96页 |
| ·原核表达是研究基因功能的重要手段及蛋白表达的理论基础 | 第94页 |
| ·蛋白表达条件的改良与优化 | 第94-96页 |
| 结论 | 第96-97页 |
| 展望 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-118页 |
| 附录 | 第118-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
