| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-20页 |
| 1．1 雪莲的形态、种类、分布及生境 | 第9-10页 |
| 1．2 雪莲的药用价值 | 第10页 |
| 1．3 雪莲的化学成分及有效成分的药理研究 | 第10-12页 |
| 1．4 雪莲类黄酮代谢生理 | 第12-16页 |
| 1．5 CHI基因研究现状 | 第16-17页 |
| 1．6 雪莲的抗逆特性及HSP70基因的功能 | 第17-18页 |
| 1．7 PCR技术在筛选文库中的应用现状 | 第18-20页 |
| 2 引言 | 第20-21页 |
| 3 材料和方法 | 第21-35页 |
| 3．1 材料 | 第21-23页 |
| 3．2 方法 | 第23-35页 |
| 3．2．1 技术路线 | 第23-24页 |
| 3．2．2 愈伤组织的培养 | 第24页 |
| 3．2．3 文库及文库扩增与保存 | 第24页 |
| 3．2．4 用PCR方法筛选文库的一般流程 | 第24-25页 |
| 3．2．5 对常规的cDNA文库筛选方法改进（一） | 第25-27页 |
| 3．2．6 对常规的cDNA文库筛选方法改进（二） | 第27-28页 |
| 3．2．7 PCR片段回收 | 第28-29页 |
| 3．2．8 片段连接到载体上 | 第29页 |
| 3．2．9 感受态细菌的制备 | 第29页 |
| 3．2．10 转化 | 第29-30页 |
| 3．2．11 转化菌株的蓝白筛选 | 第30页 |
| 3．2．12 质粒小量提取及纯化 | 第30页 |
| 3．2．13 质粒中量提取 | 第30页 |
| 3．2．14 酶切 | 第30-31页 |
| 3．2．15 连接 | 第31页 |
| 3．2．16 载体构建及原核表达的一般流程 | 第31-35页 |
| 4 结果及分析 | 第35-54页 |
| 4．1 CHI基因的筛选及分析 | 第35-37页 |
| 4．2 对F3H基因的克隆及比较分析 | 第37-39页 |
| 4．3 两个HSP70基因及片段的筛选与比较分析 | 第39-43页 |
| 4．4 对代谢调节相关基因的文库扩增及比较分析 | 第43-50页 |
| 4．4．1 引物的设计 | 第43-44页 |
| 4．4．2 从文库中获得基因片段 | 第44页 |
| 4．4．3 对得到的片段的分析比较 | 第44-50页 |
| 4．5 CHI基因的原核表达 | 第50-54页 |
| 4．5．1 质粒中量提取 | 第50页 |
| 4．5．2 PCR反应加酶切位点 | 第50-52页 |
| 4．5．3 酶切 | 第52页 |
| 4．5．4 连接、转化 | 第52页 |
| 4．5．5 选择阳性克隆转化表达宿主菌BL21 | 第52页 |
| 4．5．6 表达条件的优化 | 第52页 |
| 4．5．7 放大培养 | 第52-53页 |
| 4．5．8 蛋白质的凝胶电泳检测 | 第53-54页 |
| 5 讨论 | 第54-61页 |
| 5．1 引物设计 | 第54页 |
| 5．2 文库筛选 | 第54-55页 |
| 5．3 分部分排除法筛选文库 | 第55页 |
| 5．4 用一对引物筛选多个基因的方法 | 第55-56页 |
| 5．5 两个HSP70基因序列比较结果讨论 | 第56-57页 |
| 5．6 F3H基因可能是一个新基因 | 第57-58页 |
| 5．7 筛选代谢调节相关基因的一些问题及结果讨论 | 第58-59页 |
| 5．8 载体构建 | 第59页 |
| 5．9 原核表达 | 第59-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 缩略语表 | 第67-68页 |
| 参与的课题及发表的文章 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |