| 前言 | 第1-20页 |
| 1 研究的目的和意义 | 第10-11页 |
| 2 草鱼出血病毒的研究现状与进展 | 第11-14页 |
| 3 人-α干扰素基因的研究进展 | 第14-20页 |
| ·人-α干扰素基因的产生、性质及基本结构 | 第14-16页 |
| ·人-α干扰素基因的抗病机制和作用 | 第16-20页 |
| 材料与方法 | 第20-47页 |
| 1 材料 | 第20-25页 |
| ·菌种、目的基因、启动子 | 第20-21页 |
| ·菌种 | 第20页 |
| ·目的基因 | 第20页 |
| ·启动子 | 第20页 |
| ·目的基因─从-α干扰素基因重组构建工作主要由课题组张学文博士、陈韬博士等完成 | 第20-21页 |
| ·草鱼及受精卵 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·试剂盒 | 第22页 |
| ·酶制剂、抗生素及化学试剂 | 第22-24页 |
| ·试剂配制 | 第24-25页 |
| 2 方法 | 第25-35页 |
| ·草鱼亲鱼的选择 | 第25页 |
| ·草鱼的催产及受精卵的获得 | 第25-26页 |
| ·基因转导 | 第26-27页 |
| ·基因转导后草鱼受精卵的孵化 | 第27-28页 |
| ·基因转导后草鱼鱼苗、鱼种的培育 | 第28页 |
| ·细菌(带有质粒PCI)菌种TOP10F′的活化和质粒DNA的提取 | 第28-29页 |
| ·PCR反应 | 第29-30页 |
| ·Southern杂交 | 第30-31页 |
| ·夹心法ELISA检测Hu-IFN-α(酶联免疫法-蛋白质表达检测) | 第31页 |
| ·转基因个体的筛选与标记 | 第31-32页 |
| ·转Hu-α-IFN基因草鱼对草鱼出血病病毒(GCHV-991)的攻毒试验 | 第32-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-42页 |
| ·显微操作对草鱼受精卵的发育孵化的影响 | 第35页 |
| ·转化Hu-IFN-α基因草鱼的PCR检测 | 第35-36页 |
| ·转化草鱼的Southern杂交检测 | 第36-37页 |
| ·Hu-IFN-α的表达检测--ELISA检测 | 第37-39页 |
| ·转基因草鱼的草鱼出血病病毒(GCHV-991)的攻毒结果 | 第39-42页 |
| 4 讨论 | 第42-47页 |
| ·人-α干扰素基因在草鱼胚胎中的整合行为 | 第42-43页 |
| ·Hu-IFN-α基因在草鱼胚胎中的有效整合问题 | 第43-44页 |
| ·Hu-IFN-α基因在受体草鱼中的转录表达问题 | 第44-45页 |
| ·转Hu-IFN-α基因草鱼对草鱼出血病病毒的抗性问题 | 第45-46页 |
| ·转基因研究面临所要解决的问题 | 第46-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-58页 |
| 附图1-1 | 第58-59页 |
| 附图1-2 | 第59-60页 |
| 附图2-1 | 第60-61页 |
| 附图2-2 | 第61-62页 |
| 附图3 | 第62-63页 |
| 附图4 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
