油葵再生体系的建立及葡聚糖酶和几丁质酶双价基因转化的研究
| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 文献综述 | 第14-27页 |
| 1 向日葵菌核病防治 | 第14-17页 |
| 1．1 向日葵菌核病 | 第14页 |
| 1．2 抗病育种防治 | 第14-15页 |
| 1．3 向日葵菌核病的化学防治 | 第15页 |
| 1．4 向日葵菌核病的农业防治 | 第15-16页 |
| 1．5 向日葵菌核病的生物防治 | 第16-17页 |
| 1．5．1 利用重寄生菌 | 第16页 |
| 1．5．2 利用基因工程 | 第16-17页 |
| 2 向日葵组织培养 | 第17-20页 |
| 2．1 向日葵组织培养的研究背景 | 第17页 |
| 2．2 影响植株再生的因素 | 第17-19页 |
| 2．2．1 基因型影响植株再生 | 第17-18页 |
| 2．2．2 外植体类型影响植株再生 | 第18页 |
| 2．2．3 激素配比对外植体植株再生的影响 | 第18-19页 |
| 2．3 再生植株的质量问题及对策 | 第19-20页 |
| 3 抗植物真菌病害基因及其应用 | 第20-22页 |
| 3．1 几丁质酶与葡聚糖酶的作用原理 | 第20-21页 |
| 3．2 几丁质酶在防治植物病原真菌中的应用 | 第21-22页 |
| 3．3 葡聚糖酶在防治植物病原真菌中的应用 | 第22页 |
| 4 植物基因的遗传转化 | 第22-26页 |
| 4．1 以根癌农杆菌Ti质粒为载体的转化 | 第23-24页 |
| 4．2 花粉管通道法 | 第24-26页 |
| 4．2．1 花粉管通道法的创立与发展 | 第24-25页 |
| 4．2．2 对花粉管通道法机理的研究和探讨 | 第25-26页 |
| 4．2．3 花粉管通道法的评价 | 第26页 |
| 4．2．3．1 优点 | 第26页 |
| 4．2．3．2 存在问题 | 第26页 |
| 5 结语 | 第26-27页 |
| 一． 油葵再生体系的建立 | 第27-38页 |
| 1． 材料和方法 | 第27-29页 |
| 1．1 实验材料 | 第27页 |
| 1．1．1 植物材料 | 第27页 |
| 1．1．2 仪器设备 | 第27页 |
| 1．2 方法 | 第27-29页 |
| 1．2．1 油葵无菌苗的获得 | 第27页 |
| 1．2．2 油葵愈伤组织的诱导与增殖 | 第27-28页 |
| 1．2．3 油葵再生植株的获得 | 第28-29页 |
| 1．2．3．1 胚状体发生的研究 | 第28页 |
| 1．2．3．2 不定芽发生研究 | 第28页 |
| 1．2．3．3 试管苗成苗实验 | 第28-29页 |
| 1．2．4 再生植株的茎段繁殖 | 第29页 |
| 1．2．5 油葵再生植株的嫁接 | 第29页 |
| 1．2．6 油葵再生植株的移栽 | 第29页 |
| 2． 结果分析 | 第29-33页 |
| 2．1 获得健壮的无菌苗 | 第29-30页 |
| 2．2 油葵愈伤组织的诱导与增殖研究 | 第30-31页 |
| 2．2．1 激素配比及浓度的影响 | 第30页 |
| 2．2．2 不同外植体诱导的愈伤质量 | 第30-31页 |
| 2．3 胚状体发生及生长情况 | 第31-32页 |
| 2．4 不定芽发生研究 | 第32-33页 |
| 2．5 再生苗成苗研究 | 第33页 |
| 2．6 再生植株的茎段繁殖 | 第33页 |
| 2．7 再生植株的嫁接与移栽 | 第33页 |
| 3 讨论 | 第33-36页 |
| 3．1 基因型是植株再生的前提条件 | 第34页 |
| 3．2 外植体类型和质量是影响植株再生的重要因素 | 第34-35页 |
| 3．3 胚状体发生率和不定芽发生率存在相关性 | 第35-36页 |
| 3．4 转化受体的选择 | 第36页 |
| 4 小结 | 第36-38页 |
| 二、 农杆菌介导法进行基因转化 | 第38-45页 |
| 1． 材料与方法 | 第38页 |
| 1．1 材料 | 第38页 |
| 1．1．1 植物材料 | 第38页 |
| 1．1．2 农杆菌菌株 | 第38页 |
| 1．1．3 仪器设备 | 第38页 |
| 1．1．4 试验试剂 | 第38页 |
| 1．2 试验方法 | 第38-40页 |
| 1．2．1 培养基的选择 | 第38-39页 |
| 1．2．2 农杆菌工程菌液的制备 | 第39页 |
| 1．2．3 油葵外植体的侵染 | 第39页 |
| 1．2．4 油葵转化植株的再生 | 第39-40页 |
| 1．2．5 油葵转化植株的茎段繁殖 | 第40页 |
| 1．2．6 油葵转化植株的嫁接及移栽 | 第40页 |
| 2 实验结果与分析 | 第40-49页 |
| 2．1 农杆菌工程菌液的制备 | 第40页 |
| 2．2 油葵外植体的侵染 | 第40-41页 |
| 2．3 共培养时间的影响 | 第41页 |
| 2．4 激素浓度调整的影响 | 第41页 |
| 2．5 抗生素的影响 | 第41-42页 |
| 2．6 油葵转化植株的再生 | 第42-49页 |
| 3． 讨论 | 第49-43页 |
| 3．1 提高遗传转化率的探索 | 第42-43页 |
| 3．2 抗生素对遗传转化的影响 | 第43页 |
| 4 小结 | 第43-45页 |
| 三、 花粉管通道法进行基因转化 | 第45-52页 |
| 1． 材料和方法 | 第45-47页 |
| 1．1 实验材料 | 第45页 |
| 1．1．1 植物材料 | 第45页 |
| 1．1．2 仪器设备 | 第45页 |
| 1．2 研究方法 | 第45-47页 |
| 1．2．1 传粉过程研究 | 第45页 |
| 1．2．2 受精过程观察 | 第45-46页 |
| 1．2．2．1 取材 | 第45-46页 |
| 1．2．2．2 石蜡切片 | 第46页 |
| 1．2．2．3 染色 | 第46页 |
| 1．2．2．4 脱水 | 第46页 |
| 1．2．2．5 透明与浸蜡 | 第46页 |
| 1．2．2．6 包埋 | 第46页 |
| 1．2．2．7 切片、观察 | 第46页 |
| 1．2．3 含目的基因质粒的大量提取 | 第46页 |
| 1．2．4 基因导入时间和方法 | 第46-47页 |
| 1．2．5 植株的Kana抗性检测 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-49页 |
| 2．1 花粉管伸长及受精过程观察 | 第47页 |
| 2．2 不同导入时间的结实率 | 第47-48页 |
| 2．2．1 柱头滴加法 | 第47-48页 |
| 2．2．2 子房注射法 | 第48页 |
| 2．3 植株的Kana抗性检测 | 第48页 |
| 2．4 柱头滴加法和子房注射法植株转化率的比较 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-50页 |
| 3．1 子房注射法是向日葵较好的转化方法 | 第49页 |
| 3．2 质粒DNA导入的时间是转化成否的重要因素 | 第49-50页 |
| 3．3 花粉管通道法在向日葵生产上的应用 | 第50页 |
| 4 小结 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
