野生大麦盐诱导基因表达差异的研究和cDNA文库的构建
第一章 文献综述 | 第1-22页 |
1 植物耐盐相关基因的研究进展 | 第8-18页 |
2 mRNA差异显示方法及研究进展 | 第18-22页 |
第二章 总体实验设计 | 第22-24页 |
1 立题意义 | 第22-23页 |
2 实验设计 | 第23-24页 |
第三章 野生大麦盐诱导mRNA差异显示 | 第24-49页 |
一 材料和方法 | 第24-35页 |
1 材料 | 第24页 |
2 方法 | 第24-35页 |
2.1 野生大麦盐胁迫处理 | 第24-25页 |
2.2 总RNA提取 | 第25页 |
2.3 总RNA纯化 | 第25页 |
2.4 第一链cDNA合成 | 第25-26页 |
2.5 差异显示PCR反应 | 第26-28页 |
2.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第28页 |
2.7 差异片段回收及再扩增 | 第28-29页 |
2.8 差异片段克隆 | 第29-31页 |
2.9 反向Northern杂交 | 第31-35页 |
2.10 差异片段测序及序列分析 | 第35页 |
二 结果和分析 | 第35-47页 |
1 RNA提取和纯化 | 第35-36页 |
2 引物的选择 | 第36-38页 |
3 差异片段的回收及克隆 | 第38-39页 |
4 Northern杂交分析 | 第39-41页 |
5 差异片段序列分析 | 第41-47页 |
三 讨论 | 第47-49页 |
第四章 野生大麦盐诱导cDNA文库构建 | 第49-59页 |
一 材料和方法 | 第49-55页 |
1 材料 | 第49页 |
2 方法 | 第49-55页 |
2.1 野生大麦的盐诱导处理 | 第49页 |
2.2 总RNA提取 | 第49-50页 |
2.3 cDNA合成 | 第50-51页 |
2.4 蛋白酶K消化 | 第51页 |
2.5 Sfi消化及片段大小分离 | 第51-53页 |
2.6 连接 | 第53页 |
2.7 包装 | 第53页 |
2.8 滴度测定 | 第53-54页 |
2.9 插入片段大小检测 | 第54-55页 |
二 结果与分析 | 第55-57页 |
1 mRNA质量 | 第55页 |
2 双链cDNA合成 | 第55-56页 |
3 Sfi消化及片段大小分离 | 第56页 |
4 连接及滴度测定 | 第56-57页 |
5 检测插入片段大小 | 第57页 |
三 讨论 | 第57-59页 |
1 构建cDNA文库的评价 | 第57-58页 |
2 cDNA文库构建载体的选择 | 第58-59页 |
全文结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-69页 |
致谢 | 第69页 |