| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-7页 |
| 前言 | 第7-9页 |
| 实验材料 | 第9-12页 |
| 一、 实验标本 | 第9页 |
| 二、 质粒载体 | 第9-10页 |
| 三、 实验试剂 | 第10-11页 |
| 四、 实验仪器 | 第11-12页 |
| 实验方法 | 第12-32页 |
| 第一部分 针对 IGF-II 基因的 SIRNA 设计与筛选 | 第12-17页 |
| （一） 针对 IGF-II 基因 siRNA 设计和合成 | 第12页 |
| （二） 细胞复苏与培养 | 第12-13页 |
| （三） 细胞转染 siRNA | 第13-14页 |
| （四） IGF-II 基因 mRNA 表达检测 | 第14-17页 |
| 第二部分 重组 HAFP 和 HTERT 双启动子调控针对 IGF-II 基因 SIRNA 表达载体的构建 | 第17-32页 |
| （一） 人心肌细胞 AC16 基因组提取 | 第17-18页 |
| （二） pGL3-hAFP 载体的构建 | 第18-22页 |
| （三） pGL3-hTERT 载体的构建 | 第22-26页 |
| （四） pGL3-hAFP-hTERT 载体的构建 | 第26-28页 |
| （五） pGL3-hAFP-hTERT-siRNA3 载体的构建 | 第28-32页 |
| 实验结果 | 第32-50页 |
| 第一部分 针对 IGF-II 基因的 SIRNA 设计与筛选结果 | 第32-33页 |
| （一） 设计合成的 3 对 siRNA 序列 | 第32页 |
| （二） 荧光定量 PCR 检测转染后 24h Huh7 细胞 IGF-II 基因 mRNA 表达结果 | 第32-33页 |
| 第二部分 HAFP 和 HTERT 双启动子调控针对 IGF-II 基因的 SIRNA 表达载体的构建鉴定结果 | 第33-50页 |
| （一） 人心肌细胞 AC16 基因组 DNA 提取物电泳分析结果 | 第33-34页 |
| （二） pGL3- hAFP 载体构建鉴定结果 | 第34-37页 |
| （三） pGL3- hTERT 载体构建鉴定结果 | 第37-40页 |
| （四） pGL3-hAFP-hTERT 载体构建鉴定结果 | 第40-44页 |
| （五） pGL3-hAFP-siRNA3 载体构建鉴定结果 | 第44-46页 |
| （六） pGL3-hTERT-siRNA3 载体构建鉴定结果 | 第46-47页 |
| （七） pGL3- hAFP-hTERT-siRNA3 载体构建鉴定结果 | 第47-50页 |
| 讨论 | 第50-56页 |
| 一、 RNAI 作用机制及 SIRNA 制备方法 | 第50-51页 |
| 二、 构建 SIRNA 表达载体的启动子类型及其特点 | 第51-52页 |
| 三、 RNAI与肝癌治疗 | 第52-53页 |
| 四、 IGF-II 过表达与肝癌 | 第53-54页 |
| 五、 RNA 聚合酶 II 重组 HAFP 和 HTERT 双启动子调控针对 IGF-II 基因 SIRNA 表达载体的构建 | 第54-56页 |
| （一） 针对 IGF-II 基因高效 siRNA 的筛选 | 第54-55页 |
| （二） pGL3-hAFP-hTERT-siRNA3 载体的构建 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 缩写词表 | 第63-65页 |
| 在校期间发表的论文 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
