主要英文缩略词 | 第1-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
英文摘要 | 第12-15页 |
文献回顾 | 第15-34页 |
1 引言 | 第15页 |
2 PDGF的理化特性 | 第15-20页 |
3 PDGF的分布、表达及代谢 | 第20-22页 |
·PDGF的分布 | 第20页 |
·PDGF的表达 | 第20-21页 |
·PDGF的代谢 | 第21-22页 |
4 PDGF的作用机制(包括受体) | 第22-25页 |
·PDGF受体 | 第22-24页 |
·PDGF的作用机制 | 第24-25页 |
5 PDGF的生物学效应 | 第25-27页 |
·PDGF的致分裂性和趋化性 | 第25-26页 |
·PDGF对细胞周期的作用 | 第26-27页 |
·PDGF对细胞外基质成分的调节作用 | 第27页 |
6 PDGF的临床意义 | 第27-34页 |
·PDGF与创伤修复 | 第27-28页 |
·PDGF与组织的生长发育 | 第28-29页 |
·PDGF在中枢神经系统中的作用 | 第29-34页 |
第一部分 猪血小板衍化生长因子的提纯及其理化性质的研究 | 第34-54页 |
实验一 PDGF的提纯 | 第34-40页 |
1 主要仪器和试剂 | 第34-35页 |
2 实验方法 | 第35-36页 |
·猪血小板裂解液的制备 | 第35页 |
·酸醇提取 | 第35页 |
·DEAE-Sepharose离子交换层折 | 第35-36页 |
·热处理 | 第36页 |
·CM-Sepharose离心交换层折 | 第36页 |
·Sephacryl S-100HR凝胶层析 | 第36页 |
·蛋白含量测定 | 第36页 |
·活性检测 | 第36页 |
3 实验结果 | 第36-39页 |
·血小板裂解液的酸醇抽提 | 第36-37页 |
·DEAE-Sepharose FF离子交换层析 | 第37页 |
·热处理 | 第37-38页 |
·CM-Sepharose FF离子交换层析 | 第38页 |
·Sephacryl S-100 HR凝胶层析 | 第38-39页 |
4 讨论 | 第39-40页 |
实验二 PDGF生物学活性和理化性质测定 | 第40-54页 |
1 主要仪器和试剂 | 第40-41页 |
2 实验方法 | 第41-45页 |
·pPDGF的SDS-PAGE分析 | 第41-42页 |
·pPDGF的高压液相色谱分析 | 第42-43页 |
·pPDGF的聚丙烯酸胺等电聚焦 | 第43-44页 |
·pPDGF的氨基酸组成分析 | 第44页 |
·生物学活性测定—pPDGF对NIH3T3细胞DNA合成的影响 | 第44-45页 |
3 实验结果 | 第45-51页 |
·pPDGF的SDS聚丙稀酰胺凝胶电泳 | 第45-46页 |
·pPDGF的高压液相色谱分析 | 第46-47页 |
·pPDGF的等电聚焦(pI)分析 | 第47-48页 |
·pPEX3F的氨基酸组成分析结果 | 第48-49页 |
·生物学活性检测:pPDGF对NIH3T3细胞DNA合成的影响 | 第49-51页 |
4 讨论 | 第51-54页 |
·pPDGF的理化性质和氨基酸组成 | 第51-52页 |
·pPDGF的生物学活性 | 第52-54页 |
第二部分 小鼠局灶性脑损伤后PDGF-A、PDGF-B链的mRNA及PDGFβ受体表达 | 第54-63页 |
实验一 小鼠局灶性脑损伤动物模型 | 第54-55页 |
1 实验对象 | 第54-55页 |
2 动物模型的制备 | 第55页 |
3 脑细胞标本的采取 | 第55页 |
实验二 小鼠局灶性损伤PDGF-A、PDGF-B链及PDGFβ受体表达 | 第55-60页 |
1 材料和方法 | 第55-56页 |
·主要仪器设备 | 第55页 |
·主要试剂 | 第55-56页 |
2 实验方法 | 第56-60页 |
·主要液体配制 | 第56-57页 |
·工作液 | 第57-58页 |
·探针标记 | 第58页 |
·原位杂交 | 第58-60页 |
3 实验结果 | 第60页 |
实验三 pPDGF对局灶性脑损伤胶质增生的影响 | 第60-63页 |
1 主要仪器及试剂 | 第60-61页 |
2 实验方法 | 第61页 |
·制片 | 第61页 |
·实验分组 | 第61页 |
·GFAP在脑组织中的表达 | 第61页 |
3 实验结果 | 第61-62页 |
4 讨论 | 第62-63页 |
第三部分 体外中枢源性细胞损伤模型的建立及PDGF对其损伤的保护作用研究 | 第63-84页 |
实验一 离体中枢神经细胞及胶质细胞损伤模型 | 第63-68页 |
1 主要试剂和仪器 | 第63-64页 |
2 实验方法 | 第64-65页 |
·神经细胞培养 | 第64页 |
·神经胶质细胞培养 | 第64-65页 |
·细胞损伤 | 第65页 |
·检测方法 | 第65页 |
·统计学分析 | 第65页 |
3 实验结果 | 第65-67页 |
·细胞膜损伤 | 第65-66页 |
·LDH测定 | 第66-67页 |
4 讨论 | 第67-68页 |
实验二 pPDGF对皮层损伤神经元超氧化物歧化酶的影响 | 第68-73页 |
1 仪器及试剂 | 第68页 |
2 实验方法 | 第68-69页 |
·分组 | 第68-69页 |
·皮层神经细胞损伤模型 | 第69页 |
·SOD测定 | 第69页 |
·存活神经元计数 | 第69页 |
·统计学处理 | 第69页 |
3 实验结果 | 第69-72页 |
·pPDGF对SOD同功酶活性的影响 | 第69-71页 |
·细胞存活百分比计数 | 第71-72页 |
4 讨论 | 第72-73页 |
实验三 PDGF对损伤性大脑皮层细胞钙通道的影响 | 第73-84页 |
1 主要仪器和试剂 | 第74-75页 |
·实验对象 | 第74页 |
·药品与试剂 | 第74页 |
·实验器材 | 第74-75页 |
·溶液配制 | 第75页 |
2 膜片钳技术 | 第75-77页 |
·实验装置 | 第75-76页 |
·全细胞记录方式 | 第76-77页 |
·电压钳记录 | 第77页 |
·实验数据处理 | 第77页 |
3 实验结果 | 第77-82页 |
·皮层神经元基本电生理特性 | 第77-79页 |
·PDGF对全细胞Ca~(2+)电流影响 | 第79-82页 |
4 讨论 | 第82-84页 |
总结 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-96页 |
附图 | 第96-104页 |