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人源CYP450s高表达体系和核受体介导的人源CYP3A4及MDR1诱导作用研究体系的构建和应用

目录第1-5页
缩略词表(Abbreviation)第5-7页
摘要第7-11页
Abstract第11-16页
引言第16-18页
第一部分 人源CYP450s高表达体系的构建及应用第18-56页
 前言第18-19页
 材料和方法第19-35页
 实验结果第35-48页
  1. CYPOR的表达及活性鉴定第35-37页
   ·pET-22b(+)-CYPOR重组表达载体的构建第35页
   ·重组CYPOR的表达及鉴定第35-36页
   ·CYPOR重组蛋白的活性测定第36-37页
  2. 重组CYP450s同工酶的表达及活性鉴定第37-47页
   ·pFastBac HT-CYP2D6重组载体构建第37-38页
   ·重组粘粒Bacmid-CYP2D6构建第38页
   ·重组CYP450s同工酶的表达及鉴定第38-39页
   ·CYP450s重组病毒滴度测定第39页
   ·CYP450s重组酶活性测定方法建立第39-42页
   ·CYP2E1重组酶表达和体外温孵条件优化第42-44页
   ·CYP2E1重组酶动力学参数测定第44-46页
   ·CYP3A4重组酶活性测定第46-47页
  3 黄芩苷、黄芩素对CYP2E1重组酶的抑制作用第47-48页
 讨论第48-51页
 小结第51-52页
 参考文献第52-56页
第二部分 核受体介导人源CYP3A4及MDR1诱导作用研究体系的构建和应用第56-98页
 前言第56-57页
 一、核受体介导人源CYP3A4及MDR1诱导作用研究体系的构建和应用第57-88页
  材料和方法第57-70页
  实验结果第70页
  1 人源CYP3A4启动子报告基因表达载体构建第70-71页
  2 pCDNA3.1(-)-RXRα真核表达载体构建第71-72页
  3 中药有效成分对人源CYP3A4及MDR1诱导作用的研究第72-79页
   ·中药有效成份对细胞活力的影响第72-75页
   ·中药有效成分对人源CYP3A4和MDR1 mRNA转录水平的影响第75-77页
   ·中药有效成分对人源CYP3A4蛋白表达的影响第77-78页
   ·中药有效成分对人源CYP3A4酶活性的影响第78-79页
  4 中药有效成分对人源CYP3A4及MDR1诱导机制的研究第79-85页
   ·中药有效成分对人源CYP3A4启动子活性的影响第79-81页
   ·中药有效成分对人源MDR1启动子活性的影响第81-82页
   ·黄芩素对CAR/RXRa二聚体与DR3/ER6/DR4结构域相互作用的影响第82-83页
   ·黄芩素对PXR/RXRα二聚体与DR3/ER6/DR4结构域相互作用的影响第83-85页
  讨论第85-88页
 二、黄芩素多次给药对他克莫司血浆药代动力学的影响第88-95页
  材料和方法第88-90页
  实验结果第90-93页
   1 他克莫司在全血样品中的检测方法第90-91页
   2 黄芩素多次给药对他克莫司血浆药代动力学影响第91-93页
  讨论第93-94页
  小结第94-95页
 参考文献第95-98页
综述第98-106页
致谢第106-107页
附录第107-108页

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