英文縮略词表 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 前言 | 第14-24页 |
1 胃癌及胃癌发生相关基因突变分析方法概述 | 第14-19页 |
·胃癌概述 | 第14-15页 |
·胃癌发生相关突变基因介绍 | 第15-17页 |
·ras基因 | 第15页 |
·C-myc基因 | 第15-16页 |
·p53基因 | 第16页 |
·APC基因 | 第16页 |
·p16基因 | 第16-17页 |
·基因突变分析方法 | 第17-18页 |
·毛细管电泳技术在基因突变检测中的应用 | 第18-19页 |
2 论文立题依据和技术路线 | 第19-20页 |
·立题依据 | 第19页 |
·技术路线 | 第19-20页 |
3 研究内容 | 第20-22页 |
·胃癌组织中基因突变检测及高突变频率基因筛选研究 | 第20页 |
·胃癌患者外周静脉血液样品中基因突变检测方法建立及样品分析 | 第20-21页 |
·临床胃癌早期预测诊断方法建立及应用 | 第21-22页 |
参考文献 | 第22-24页 |
第二章 胃癌组织中胃癌相关特异性基因突变检测及高突变频率基因筛选研究 | 第24-47页 |
第一节 胃癌组织中抑癌基因APC和p16基因突变检测 | 第26-37页 |
1 引言 | 第26页 |
2 实验部分 | 第26-29页 |
·仪器与试剂 | 第26-27页 |
·实验材料 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-29页 |
·组织DNA提取,引物设计及PCR扩增 | 第27页 |
·PCR产物纯化及电泳检测 | 第27-28页 |
·PAGE-SSCP检测 | 第28页 |
·CE-SSCP检测 | 第28页 |
·CE-RFLP检测 | 第28页 |
·DNA测序分析 | 第28-29页 |
3 实验结果 | 第29-35页 |
·pUC19 DNA/Msp Ⅰ(HpaⅡ)DNA Marker最佳分离条件 | 第29页 |
·PCR纯化产物电泳检测结果 | 第29-30页 |
·PAGE-SSCP检测组织样品结果 | 第30-31页 |
·CE-SSCP检测组织样品结果 | 第31-33页 |
·CE-RFLP检测组织样品结果 | 第33-34页 |
·DNA序列分析结果 | 第34-35页 |
4 讨论 | 第35-37页 |
第二节 毛细管电泳检测胃癌组织中原癌基因C-myc基因突变 | 第37-45页 |
1 引言 | 第37页 |
2 实验部分 | 第37-38页 |
·仪器与试剂 | 第37页 |
·实验材料 | 第37-38页 |
·实验方法 | 第38页 |
·组织DNA提取,引物设计及PCR扩增 | 第38页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物 | 第38页 |
·PAGE-SSCP检测 | 第38页 |
·DNA测序分析 | 第38页 |
·PCR产物酶切 | 第38页 |
·CE-SSCP和CE-RFLP检测 | 第38页 |
3 实验结果 | 第38-44页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测C-myc扩增产物 | 第39页 |
·PAGE-SSCP检测C-myc基因结果 | 第39-40页 |
·CE-SSCP检测C-myc基因结果 | 第40-41页 |
·DNA序列分析结果 | 第41-42页 |
·CE-RFLP检测C-myc基因结果 | 第42-43页 |
·C-myc基因突变与临床病例特性关系 | 第43-44页 |
4 讨论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-47页 |
第三章 血液中肿瘤基因突变检测方法的建立及在p53和k-ras基因突变热点检测中的应用 | 第47-66页 |
1 引言 | 第48页 |
2 实验部分 | 第48-51页 |
·仪器与试剂 | 第48-49页 |
·实验材料 | 第49页 |
·实验方法 | 第49-51页 |
·血液DNA提取 | 第49-50页 |
·引物设计及PCR扩增 | 第50页 |
·毛细管电泳检测条件优化 | 第50页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物 | 第50-51页 |
·临床样品检测前处理 | 第51页 |
·CE-SSCP和CE-RFLP检测 | 第51页 |
3 实验结果 | 第51-62页 |
·DNA提取及含量测定结果 | 第51-52页 |
·琼脂糖凝胶电泳结果 | 第52页 |
·毛细管电泳检测条件优化结果 | 第52-58页 |
·毛细管电泳参数DNA Maker考察结果 | 第52-56页 |
·毛细管电泳检测临床样品参数考察结果 | 第56-58页 |
·CE-SSCP检测临床血液样品结果 | 第58-60页 |
·CE-RFLP检测临床血液样品结果 | 第60-62页 |
·p53基因及k-ras基因突变与临床病例特性关系 | 第62页 |
4 讨论 | 第62-65页 |
参考文献 | 第65-66页 |
第四章 毛细管电泳法结合基因测序研究胃癌血液中APC和C-myc基因突变与临床病例因素之间的关系 | 第66-77页 |
1 引言 | 第67页 |
2 实验部分 | 第67-68页 |
·仪器与试剂 | 第67页 |
·实验材料 | 第67页 |
·实验方法 | 第67-68页 |
·血液DNA提取 | 第68页 |
·PCR扩增APC及C-myc基因 | 第68页 |
·临床样品检测前处理 | 第68页 |
·CE-SSCP和CE-RFLP检测 | 第68页 |
·APC和C-myc基因扩增样品直接测序分析 | 第68页 |
3 实验结果 | 第68-74页 |
·PCR扩增产物检测结果 | 第69页 |
·APC和C-myc基因CE-SSCP检测结果 | 第69页 |
·APC和C-myc基因CE-RFLP检测结果 | 第69-71页 |
·直接测序结果 | 第71-73页 |
·APC和C-myc基因突变与临床病例特性关系 | 第73-74页 |
4 讨论 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-77页 |
第五章 研究结论 | 第77-79页 |
1 胃癌组织中相关基因突变检测及高突变频率基因筛选 | 第77页 |
2 胃癌患者外周静脉血液样品中高突变频率基因检测及临床病例特性之间的关系 | 第77页 |
3 胃癌早期诊断方法预建立 | 第77-79页 |
硕士期间发表的论文及参与的科研工作 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |