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毛细管电泳法检测基因突变及其在胃癌早期诊断中的应用研究

英文縮略词表第1-5页
中文摘要第5-7页
Abstract第7-14页
第一章 前言第14-24页
 1 胃癌及胃癌发生相关基因突变分析方法概述第14-19页
   ·胃癌概述第14-15页
   ·胃癌发生相关突变基因介绍第15-17页
     ·ras基因第15页
     ·C-myc基因第15-16页
     ·p53基因第16页
     ·APC基因第16页
     ·p16基因第16-17页
   ·基因突变分析方法第17-18页
   ·毛细管电泳技术在基因突变检测中的应用第18-19页
 2 论文立题依据和技术路线第19-20页
   ·立题依据第19页
   ·技术路线第19-20页
 3 研究内容第20-22页
   ·胃癌组织中基因突变检测及高突变频率基因筛选研究第20页
   ·胃癌患者外周静脉血液样品中基因突变检测方法建立及样品分析第20-21页
   ·临床胃癌早期预测诊断方法建立及应用第21-22页
 参考文献第22-24页
第二章 胃癌组织中胃癌相关特异性基因突变检测及高突变频率基因筛选研究第24-47页
 第一节 胃癌组织中抑癌基因APC和p16基因突变检测第26-37页
  1 引言第26页
  2 实验部分第26-29页
   ·仪器与试剂第26-27页
   ·实验材料第27页
   ·实验方法第27-29页
     ·组织DNA提取,引物设计及PCR扩增第27页
     ·PCR产物纯化及电泳检测第27-28页
     ·PAGE-SSCP检测第28页
     ·CE-SSCP检测第28页
     ·CE-RFLP检测第28页
     ·DNA测序分析第28-29页
  3 实验结果第29-35页
   ·pUC19 DNA/Msp Ⅰ(HpaⅡ)DNA Marker最佳分离条件第29页
   ·PCR纯化产物电泳检测结果第29-30页
   ·PAGE-SSCP检测组织样品结果第30-31页
   ·CE-SSCP检测组织样品结果第31-33页
   ·CE-RFLP检测组织样品结果第33-34页
   ·DNA序列分析结果第34-35页
  4 讨论第35-37页
 第二节 毛细管电泳检测胃癌组织中原癌基因C-myc基因突变第37-45页
  1 引言第37页
  2 实验部分第37-38页
   ·仪器与试剂第37页
   ·实验材料第37-38页
   ·实验方法第38页
     ·组织DNA提取,引物设计及PCR扩增第38页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物第38页
     ·PAGE-SSCP检测第38页
     ·DNA测序分析第38页
     ·PCR产物酶切第38页
     ·CE-SSCP和CE-RFLP检测第38页
  3 实验结果第38-44页
   ·琼脂糖凝胶电泳检测C-myc扩增产物第39页
   ·PAGE-SSCP检测C-myc基因结果第39-40页
   ·CE-SSCP检测C-myc基因结果第40-41页
   ·DNA序列分析结果第41-42页
   ·CE-RFLP检测C-myc基因结果第42-43页
   ·C-myc基因突变与临床病例特性关系第43-44页
  4 讨论第44-45页
 参考文献第45-47页
第三章 血液中肿瘤基因突变检测方法的建立及在p53和k-ras基因突变热点检测中的应用第47-66页
 1 引言第48页
 2 实验部分第48-51页
   ·仪器与试剂第48-49页
   ·实验材料第49页
   ·实验方法第49-51页
     ·血液DNA提取第49-50页
     ·引物设计及PCR扩增第50页
     ·毛细管电泳检测条件优化第50页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物第50-51页
     ·临床样品检测前处理第51页
     ·CE-SSCP和CE-RFLP检测第51页
 3 实验结果第51-62页
   ·DNA提取及含量测定结果第51-52页
   ·琼脂糖凝胶电泳结果第52页
   ·毛细管电泳检测条件优化结果第52-58页
     ·毛细管电泳参数DNA Maker考察结果第52-56页
     ·毛细管电泳检测临床样品参数考察结果第56-58页
   ·CE-SSCP检测临床血液样品结果第58-60页
   ·CE-RFLP检测临床血液样品结果第60-62页
   ·p53基因及k-ras基因突变与临床病例特性关系第62页
 4 讨论第62-65页
 参考文献第65-66页
第四章 毛细管电泳法结合基因测序研究胃癌血液中APC和C-myc基因突变与临床病例因素之间的关系第66-77页
 1 引言第67页
 2 实验部分第67-68页
   ·仪器与试剂第67页
   ·实验材料第67页
   ·实验方法第67-68页
     ·血液DNA提取第68页
     ·PCR扩增APC及C-myc基因第68页
     ·临床样品检测前处理第68页
     ·CE-SSCP和CE-RFLP检测第68页
     ·APC和C-myc基因扩增样品直接测序分析第68页
 3 实验结果第68-74页
   ·PCR扩增产物检测结果第69页
   ·APC和C-myc基因CE-SSCP检测结果第69页
   ·APC和C-myc基因CE-RFLP检测结果第69-71页
   ·直接测序结果第71-73页
   ·APC和C-myc基因突变与临床病例特性关系第73-74页
 4 讨论第74-76页
 参考文献第76-77页
第五章 研究结论第77-79页
 1 胃癌组织中相关基因突变检测及高突变频率基因筛选第77页
 2 胃癌患者外周静脉血液样品中高突变频率基因检测及临床病例特性之间的关系第77页
 3 胃癌早期诊断方法预建立第77-79页
硕士期间发表的论文及参与的科研工作第79-80页
致谢第80页

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