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血通灵冲剂抗肿瘤侵袭转移相关机制研究

中文摘要第1-12页
Abstract第12-13页
第一章 前言第13-25页
 第一节.肿瘤发生发展的分子作用机制第13-15页
   ·人类肿瘤发病的环境及遗传因素第13页
   ·肿瘤发生的分子生物学机理第13-14页
   ·肿瘤发展的病理学进程第14-15页
 第二节.肿瘤侵袭转移在肿瘤发展过程中的重要作用第15-17页
   ·肿瘤侵袭转移第15-17页
 第三节.金属蛋白酶(MMPS)简介第17-21页
     ·金属蛋白酶(MMPs)的分类第18页
   ·金属蛋白酶(MMPs)结构特点第18-19页
   ·酶原的激活第19-20页
   ·金属蛋白酶MMPs的生理功能第20-21页
 第四节.金属蛋白酶-9(MMP-9)结构及功能介绍第21-23页
   ·MMP-9与肿瘤侵袭转移及动脉粥样硬化斑块稳定的关系第21页
   ·MMP-9的基因结构特点第21-22页
   ·体内金属蛋白酶的表达第22页
   ·细胞因子和生长因子对MMP-9表达的影响第22-23页
 第五节.抑制MMP-9的抗肿瘤转移药物第23页
 第六节 立题依据第23-24页
 第七节 课题研究思路第24-25页
第二章 血通灵乙酸乙酯提取物(HE)对MMP-9的抑制作用第25-36页
 1 实验材料第25-27页
   ·细胞株第25页
   ·主要试剂第25-26页
   ·主要仪器第26-27页
 2 实验方法第27-31页
   ·主要试剂配置第27-28页
   ·血通灵(Hyul-Tong-Ryung,HTY)提取第28页
   ·明胶酶谱实验第28-29页
   ·XTT实验第29-30页
   ·Western blot实验第30-31页
 3 实验结果第31-35页
   ·HTY乙酸乙酯层提取率第32页
   ·明胶酶谱筛选HTY活性部位检测第32-33页
   ·XTT检测第33页
   ·HE对MMP-9活性检测第33-34页
   ·Western blot检测第34-35页
 4 小结与讨论第35-36页
第三章 HE对人乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移的影响第36-40页
 1 实验材料第36页
   ·细胞株第36页
   ·主要试剂第36页
   ·主要仪器第36页
 2 实验方法第36-38页
   ·实验原理第36-37页
   ·实验步骤第37-38页
 3 实验结果第38-39页
 4 小结与讨论第39-40页
第四章 HE抑制MMP-9 mRNA的表达第40-53页
 1 实验材料第40-41页
   ·细胞株第40页
   ·主要试剂第40-41页
   ·主要仪器第41页
 2 实验方法第41-50页
   ·RT-PCR第42-44页
   ·双荧光素酶报告基因检测实验第44-50页
 3 实验结果第50-51页
   ·MMP-9mRNA表达第50页
   ·RT-PCR条带灰度分析第50页
   ·TIMPmRNA表达第50-51页
   ·MMP-9-WT启动子活性检测第51页
 4 小结与讨论第51-53页
第五章 HE抑制MMP-9相关转录因子的激活第53-63页
 1 实验材料第53-54页
   ·细胞株第53页
   ·主要试剂第53-54页
   ·主要仪器第54页
 2 实验方法第54-57页
   ·双荧光素酶报告基因检测实验步骤第54页
   ·电泳迁移实验(Gel mobility shift asay EMSA)第54-57页
   ·Western实验步骤第57页
 3 实验结果第57-61页
   ·启动子报告基因检测第57-58页
   ·EMSA实验第58-59页
   ·核蛋白提取物的Wstern blot检测第59-60页
   ·Western blot条带灰度分析第60-61页
 4 小结与讨论第61-63页
第六章 HE对PMA诱导MMP-9相关信号通路的调控第63-73页
 1 实验材料第64-65页
   ·细胞株MCF-7第64页
   ·主要试剂第64-65页
   ·主要仪器第65页
 2 实验方法第65-66页
   ·明胶酶谱实验第65页
   ·Western blot实验第65-66页
   ·EMAS实验第66页
 3 实验结果第66-72页
   ·明胶酶谱实验第66页
   ·明胶酶谱条带灰度分析第66-68页
   ·Western blot磷酸化水平检测(1)第68-69页
   ·MAPKs抑制剂对AP-1活性作用影响第69-70页
   ·Western blot磷酸化水平检测(2)第70-72页
 4 小结与结论第72-73页
第七章 总结第73-75页
实验创新点第75-76页
展望第76-77页
参考文献第77-82页
致谢第82-83页
硕士期间发表文章第83页

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