中文摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
第一章 前言 | 第13-25页 |
第一节.肿瘤发生发展的分子作用机制 | 第13-15页 |
·人类肿瘤发病的环境及遗传因素 | 第13页 |
·肿瘤发生的分子生物学机理 | 第13-14页 |
·肿瘤发展的病理学进程 | 第14-15页 |
第二节.肿瘤侵袭转移在肿瘤发展过程中的重要作用 | 第15-17页 |
·肿瘤侵袭转移 | 第15-17页 |
第三节.金属蛋白酶(MMPS)简介 | 第17-21页 |
·金属蛋白酶(MMPs)的分类 | 第18页 |
·金属蛋白酶(MMPs)结构特点 | 第18-19页 |
·酶原的激活 | 第19-20页 |
·金属蛋白酶MMPs的生理功能 | 第20-21页 |
第四节.金属蛋白酶-9(MMP-9)结构及功能介绍 | 第21-23页 |
·MMP-9与肿瘤侵袭转移及动脉粥样硬化斑块稳定的关系 | 第21页 |
·MMP-9的基因结构特点 | 第21-22页 |
·体内金属蛋白酶的表达 | 第22页 |
·细胞因子和生长因子对MMP-9表达的影响 | 第22-23页 |
第五节.抑制MMP-9的抗肿瘤转移药物 | 第23页 |
第六节 立题依据 | 第23-24页 |
第七节 课题研究思路 | 第24-25页 |
第二章 血通灵乙酸乙酯提取物(HE)对MMP-9的抑制作用 | 第25-36页 |
1 实验材料 | 第25-27页 |
·细胞株 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25-26页 |
·主要仪器 | 第26-27页 |
2 实验方法 | 第27-31页 |
·主要试剂配置 | 第27-28页 |
·血通灵(Hyul-Tong-Ryung,HTY)提取 | 第28页 |
·明胶酶谱实验 | 第28-29页 |
·XTT实验 | 第29-30页 |
·Western blot实验 | 第30-31页 |
3 实验结果 | 第31-35页 |
·HTY乙酸乙酯层提取率 | 第32页 |
·明胶酶谱筛选HTY活性部位检测 | 第32-33页 |
·XTT检测 | 第33页 |
·HE对MMP-9活性检测 | 第33-34页 |
·Western blot检测 | 第34-35页 |
4 小结与讨论 | 第35-36页 |
第三章 HE对人乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移的影响 | 第36-40页 |
1 实验材料 | 第36页 |
·细胞株 | 第36页 |
·主要试剂 | 第36页 |
·主要仪器 | 第36页 |
2 实验方法 | 第36-38页 |
·实验原理 | 第36-37页 |
·实验步骤 | 第37-38页 |
3 实验结果 | 第38-39页 |
4 小结与讨论 | 第39-40页 |
第四章 HE抑制MMP-9 mRNA的表达 | 第40-53页 |
1 实验材料 | 第40-41页 |
·细胞株 | 第40页 |
·主要试剂 | 第40-41页 |
·主要仪器 | 第41页 |
2 实验方法 | 第41-50页 |
·RT-PCR | 第42-44页 |
·双荧光素酶报告基因检测实验 | 第44-50页 |
3 实验结果 | 第50-51页 |
·MMP-9mRNA表达 | 第50页 |
·RT-PCR条带灰度分析 | 第50页 |
·TIMPmRNA表达 | 第50-51页 |
·MMP-9-WT启动子活性检测 | 第51页 |
4 小结与讨论 | 第51-53页 |
第五章 HE抑制MMP-9相关转录因子的激活 | 第53-63页 |
1 实验材料 | 第53-54页 |
·细胞株 | 第53页 |
·主要试剂 | 第53-54页 |
·主要仪器 | 第54页 |
2 实验方法 | 第54-57页 |
·双荧光素酶报告基因检测实验步骤 | 第54页 |
·电泳迁移实验(Gel mobility shift asay EMSA) | 第54-57页 |
·Western实验步骤 | 第57页 |
3 实验结果 | 第57-61页 |
·启动子报告基因检测 | 第57-58页 |
·EMSA实验 | 第58-59页 |
·核蛋白提取物的Wstern blot检测 | 第59-60页 |
·Western blot条带灰度分析 | 第60-61页 |
4 小结与讨论 | 第61-63页 |
第六章 HE对PMA诱导MMP-9相关信号通路的调控 | 第63-73页 |
1 实验材料 | 第64-65页 |
·细胞株MCF-7 | 第64页 |
·主要试剂 | 第64-65页 |
·主要仪器 | 第65页 |
2 实验方法 | 第65-66页 |
·明胶酶谱实验 | 第65页 |
·Western blot实验 | 第65-66页 |
·EMAS实验 | 第66页 |
3 实验结果 | 第66-72页 |
·明胶酶谱实验 | 第66页 |
·明胶酶谱条带灰度分析 | 第66-68页 |
·Western blot磷酸化水平检测(1) | 第68-69页 |
·MAPKs抑制剂对AP-1活性作用影响 | 第69-70页 |
·Western blot磷酸化水平检测(2) | 第70-72页 |
4 小结与结论 | 第72-73页 |
第七章 总结 | 第73-75页 |
实验创新点 | 第75-76页 |
展望 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
硕士期间发表文章 | 第83页 |