致谢 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
1 文献综述 | 第11-28页 |
·脂肪酸的命名 | 第11页 |
·脂肪酸的分类 | 第11-13页 |
·多不饱和脂肪酸的营养功能 | 第13-20页 |
·对生长发育的作用 | 第13页 |
·对脂类代谢的影响 | 第13-14页 |
·对细胞膜功能的影响 | 第14-15页 |
·对炎症反应及免疫机能的影响 | 第15-17页 |
·对基因表达的调控 | 第17-19页 |
·对肿瘤的抑制作用 | 第19页 |
·与心血管疾病的关系 | 第19-20页 |
·鸡脂肪酸与肉品风味 | 第20-21页 |
·动物体内多不饱和脂肪酸合成的途径 | 第21页 |
·脂肪酸脱氢酶 | 第21-22页 |
·Δ6-脂肪酸脱氢酶的研究进展 | 第22-25页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因 | 第22-23页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶的结构 | 第23-24页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶的作用 | 第24-25页 |
·将18-C 和24-C 脱氢 | 第24页 |
·将16-C 脱氢 | 第24-25页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的表达 | 第25页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因在不同组织达 | 第25页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因在不同时期的表达 | 第25页 |
·基因和食物对Δ~6-脂肪酸脱氢酶的基因表达和活性的影响 | 第25页 |
·RACE(Rapid apliaction of cDNA Ends)技术 | 第25-27页 |
·5,RACE 技术 | 第26页 |
·3,RACE 技术 | 第26-27页 |
·研究的目的和意义 | 第27-28页 |
2 引言 | 第28-29页 |
3 鸡Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因cDNA的克隆及序列分析 | 第29-54页 |
·材料 | 第29-31页 |
·方法 | 第31-39页 |
·部分编码序列的扩增 | 第31-36页 |
·PCR引物的设计与合成 | 第31页 |
·肝脏总RNA的提取 | 第31页 |
·RT反应 | 第31-32页 |
·PCR 反应 | 第32页 |
·PCR产物的回收和纯化 | 第32-33页 |
·PCR产物与pUCm-T载体的连接 | 第33页 |
·连接液的转化 | 第33-34页 |
·转化菌的筛选与鉴定 | 第34-36页 |
·测序 | 第36页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因5,端的扩增 | 第36-37页 |
·PCR引物的设计与合成 | 第36页 |
·肝脏总RNA 提取 | 第36页 |
·反转录合成第一链cDNA | 第36页 |
·PCR反应 | 第36-37页 |
·PCR 产物回收和克隆测序 | 第37页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因3,UTR 的扩增 | 第37-39页 |
·肝脏总RNA 提取 | 第37页 |
·引物设计与合成 | 第37页 |
·反转录反应 | 第37-38页 |
·套式PCR 反应 | 第38-39页 |
·Inner PCR 反应 | 第39页 |
·PCR 产物回收和克隆测序 | 第39页 |
·结果与分析 | 第39-52页 |
·部分编码序列的扩增结果 | 第39-44页 |
·从鸡肝脏中提取的RNA 鉴定结果 | 第39-40页 |
·RT-PCR 结果 | 第40页 |
·重组质粒的鉴定 | 第40页 |
·质粒PCR 鉴定 | 第40-41页 |
·酶切鉴定 | 第41-42页 |
·重组质粒的序列测定结果 | 第42页 |
·与预测的鸡的Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因序列的对比 | 第42-43页 |
·核苷酸序列同源性分析 | 第43-44页 |
·氨基酸同源性分析 | 第44页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因5’端的扩增结果 | 第44-46页 |
·RT-PCR结果 | 第44-45页 |
·重组质粒的鉴定 | 第45页 |
·质粒PCR 鉴定 | 第45-46页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因5’端的测序结果 | 第46页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因3’UTR的扩增结果 | 第46-48页 |
·RT-PCR结果 | 第46页 |
·重组质粒的鉴定 | 第46页 |
·质粒PCR 鉴定 | 第46-47页 |
·酶切鉴定 | 第47页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因3’UTR的测序结果 | 第47-48页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的序列分析 | 第48-52页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的核苷酸序列分析 | 第48-49页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶的氨基酸序列及结构分析 | 第49-52页 |
·结论与讨论 | 第52-54页 |
·鸡Δ~6-脂肪酸脱氢酶的研究现状 | 第52页 |
·总RNA的提取 | 第52页 |
·引物的设计和RT-PCR扩增 | 第52-53页 |
·△~6-脂肪酸脱氢酶序列与结构分析 | 第53-54页 |
4 利用半定量PCR检测鸡△~6-脂肪酸脱氢酶在不同组织中的表达 | 第54-59页 |
·试验材料 | 第54页 |
·方法 | 第54-56页 |
·PCR引物设计与合成 | 第54页 |
·提取各个组织中的总RNA | 第54页 |
·RNA浓度的测定 | 第54页 |
·RNA的纯 | 第54-55页 |
·反转录反应 | 第55页 |
·PCR 反应 | 第55-56页 |
·PCR 纯化产物测序 | 第56页 |
·琼脂糖电泳 | 第56页 |
·统计分析 | 第56页 |
·结果与分析 | 第56-58页 |
·RT-PCR 的电泳结果 | 第56-57页 |
·测序结果 | 第57页 |
·固始鸡不同组织Δ~6-脂肪酸脱氢酶mRNA 相对含量的比 | 第57-58页 |
·结论与讨论 | 第58-59页 |
·半定量PCR | 第58页 |
·PCR引物的设计 | 第58页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因在不同组织中的表达 | 第58-59页 |
5 总结 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-67页 |
ABSTRACT | 第67-68页 |