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鸡△~6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及其在不同组织中的表达

致谢第1-9页
中文摘要第9-11页
1 文献综述第11-28页
   ·脂肪酸的命名第11页
   ·脂肪酸的分类第11-13页
   ·多不饱和脂肪酸的营养功能第13-20页
     ·对生长发育的作用第13页
     ·对脂类代谢的影响第13-14页
     ·对细胞膜功能的影响第14-15页
     ·对炎症反应及免疫机能的影响第15-17页
     ·对基因表达的调控第17-19页
     ·对肿瘤的抑制作用第19页
     ·与心血管疾病的关系第19-20页
   ·鸡脂肪酸与肉品风味第20-21页
   ·动物体内多不饱和脂肪酸合成的途径第21页
   ·脂肪酸脱氢酶第21-22页
   ·Δ6-脂肪酸脱氢酶的研究进展第22-25页
     ·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因第22-23页
     ·Δ~6-脂肪酸脱氢酶的结构第23-24页
     ·Δ~6-脂肪酸脱氢酶的作用第24-25页
       ·将18-C 和24-C 脱氢第24页
       ·将16-C 脱氢第24-25页
     ·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的表达第25页
       ·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因在不同组织达第25页
       ·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因在不同时期的表达第25页
       ·基因和食物对Δ~6-脂肪酸脱氢酶的基因表达和活性的影响第25页
   ·RACE(Rapid apliaction of cDNA Ends)技术第25-27页
     ·5,RACE 技术第26页
     ·3,RACE 技术第26-27页
   ·研究的目的和意义第27-28页
2 引言第28-29页
3 鸡Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因cDNA的克隆及序列分析第29-54页
   ·材料第29-31页
   ·方法第31-39页
     ·部分编码序列的扩增第31-36页
       ·PCR引物的设计与合成第31页
       ·肝脏总RNA的提取第31页
       ·RT反应第31-32页
       ·PCR 反应第32页
       ·PCR产物的回收和纯化第32-33页
       ·PCR产物与pUCm-T载体的连接第33页
       ·连接液的转化第33-34页
       ·转化菌的筛选与鉴定第34-36页
       ·测序第36页
     ·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因5,端的扩增第36-37页
       ·PCR引物的设计与合成第36页
       ·肝脏总RNA 提取第36页
       ·反转录合成第一链cDNA第36页
       ·PCR反应第36-37页
       ·PCR 产物回收和克隆测序第37页
     ·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因3,UTR 的扩增第37-39页
       ·肝脏总RNA 提取第37页
       ·引物设计与合成第37页
       ·反转录反应第37-38页
       ·套式PCR 反应第38-39页
       ·Inner PCR 反应第39页
       ·PCR 产物回收和克隆测序第39页
   ·结果与分析第39-52页
     ·部分编码序列的扩增结果第39-44页
       ·从鸡肝脏中提取的RNA 鉴定结果第39-40页
       ·RT-PCR 结果第40页
       ·重组质粒的鉴定第40页
       ·质粒PCR 鉴定第40-41页
       ·酶切鉴定第41-42页
       ·重组质粒的序列测定结果第42页
       ·与预测的鸡的Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因序列的对比第42-43页
       ·核苷酸序列同源性分析第43-44页
       ·氨基酸同源性分析第44页
     ·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因5’端的扩增结果第44-46页
       ·RT-PCR结果第44-45页
       ·重组质粒的鉴定第45页
       ·质粒PCR 鉴定第45-46页
       ·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因5’端的测序结果第46页
     ·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因3’UTR的扩增结果第46-48页
       ·RT-PCR结果第46页
       ·重组质粒的鉴定第46页
       ·质粒PCR 鉴定第46-47页
       ·酶切鉴定第47页
       ·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因3’UTR的测序结果第47-48页
     ·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的序列分析第48-52页
       ·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的核苷酸序列分析第48-49页
       ·Δ~6-脂肪酸脱氢酶的氨基酸序列及结构分析第49-52页
   ·结论与讨论第52-54页
     ·鸡Δ~6-脂肪酸脱氢酶的研究现状第52页
     ·总RNA的提取第52页
     ·引物的设计和RT-PCR扩增第52-53页
     ·△~6-脂肪酸脱氢酶序列与结构分析第53-54页
4 利用半定量PCR检测鸡△~6-脂肪酸脱氢酶在不同组织中的表达第54-59页
   ·试验材料第54页
   ·方法第54-56页
     ·PCR引物设计与合成第54页
     ·提取各个组织中的总RNA第54页
     ·RNA浓度的测定第54页
     ·RNA的纯第54-55页
     ·反转录反应第55页
     ·PCR 反应第55-56页
     ·PCR 纯化产物测序第56页
     ·琼脂糖电泳第56页
     ·统计分析第56页
   ·结果与分析第56-58页
     ·RT-PCR 的电泳结果第56-57页
     ·测序结果第57页
     ·固始鸡不同组织Δ~6-脂肪酸脱氢酶mRNA 相对含量的比第57-58页
   ·结论与讨论第58-59页
     ·半定量PCR第58页
     ·PCR引物的设计第58页
     ·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因在不同组织中的表达第58-59页
5 总结第59-60页
参考文献第60-67页
ABSTRACT第67-68页

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