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沙田柚花柱自交不亲和相关基因的克隆与鉴定

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 综述第8-25页
 1 抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)第8-11页
   ·SSH 技术的基本原理第8-9页
   ·SSH 技术的评价第9-10页
   ·SSH 技术在植物基因克隆上的应用第10-11页
 2 植物自交不亲和性第11-23页
   ·植物自交不亲和性的分类及其表现形式第11-13页
   ·植物自交不亲和性的分子基础第13-23页
     ·孢子体自交不亲和性的分子基础第13-14页
       ·SSI 的基因及蛋白第13页
       ·SSI 的信号转导第13-14页
     ·配子体自交不亲和性的分子基础第14-21页
       ·GSI 的基因及蛋白第14-15页
       ·GSI 的信号转导第15-21页
     ·泛素/265 蛋白酶体途径与显花植物自交不亲和性反应第21-23页
       ·泛素/265 蛋白酶体的组成第21-22页
       ·泛素/265 蛋白酶体途径在显花植物自交不亲和反应中的作用第22-23页
   ·配子体SI 信号转导存在的问题及展望第23页
 3 沙田柚配子体自交不亲和性研究的进展第23-25页
第二章 材料与方法第25-37页
 1 材料、仪器及试剂第25-26页
   ·实验材料第25页
   ·主要仪器设备第25页
   ·主要生化试剂第25页
   ·实验使用的试剂盒第25页
   ·溶液及LB 培养基的配方第25-26页
 2 实验方法第26-37页
   ·总RNA 的提取及mRNA 的纯化第26-29页
   ·抑制性消减杂交(Clontech公司的PCR-Select~(TM) cDNA Subtraction Kit)第29-35页
   ·cDNA 文库的构建第35页
   ·差异基因的筛选第35-36页
   ·cDNA 序列测定及ESTs 分析第36-37页
第三章 结果与分析第37-51页
 1 总RNA 的提取及MRNA 的纯化第37页
 2 双链CDNA 的合成及RSA I 酶切第37-38页
 3 消减杂交后两次PCR 的结果分析第38-39页
 4 SSH 文库的质量分析第39-41页
 5 阳性克隆的生物信息学分析第41-47页
   ·测序克隆的ESTs 同源性分析第41-46页
   ·差异基因的功能聚类第46-47页
 6 讨论第47-49页
   ·技术评价与选材第47页
   ·EST 功能分析第47-48页
   ·S-RNase 与沙田柚自交不亲和的关系第48页
   ·蛋白激酶与沙田柚自交不亲和信号转导的关系第48页
   ·泛素/265 蛋白酶体途径与沙田柚自交不亲和的关系第48-49页
   ·“膜受体”假说与沙田柚自交不亲和的关系第49页
 7 小结第49-50页
 8 创新点第50页
 9 本课题下一步的研究计划第50-51页
参考文献第51-60页
附录第60-64页
致谢第64-65页

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