摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 综述 | 第8-25页 |
1 抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH) | 第8-11页 |
·SSH 技术的基本原理 | 第8-9页 |
·SSH 技术的评价 | 第9-10页 |
·SSH 技术在植物基因克隆上的应用 | 第10-11页 |
2 植物自交不亲和性 | 第11-23页 |
·植物自交不亲和性的分类及其表现形式 | 第11-13页 |
·植物自交不亲和性的分子基础 | 第13-23页 |
·孢子体自交不亲和性的分子基础 | 第13-14页 |
·SSI 的基因及蛋白 | 第13页 |
·SSI 的信号转导 | 第13-14页 |
·配子体自交不亲和性的分子基础 | 第14-21页 |
·GSI 的基因及蛋白 | 第14-15页 |
·GSI 的信号转导 | 第15-21页 |
·泛素/265 蛋白酶体途径与显花植物自交不亲和性反应 | 第21-23页 |
·泛素/265 蛋白酶体的组成 | 第21-22页 |
·泛素/265 蛋白酶体途径在显花植物自交不亲和反应中的作用 | 第22-23页 |
·配子体SI 信号转导存在的问题及展望 | 第23页 |
3 沙田柚配子体自交不亲和性研究的进展 | 第23-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-37页 |
1 材料、仪器及试剂 | 第25-26页 |
·实验材料 | 第25页 |
·主要仪器设备 | 第25页 |
·主要生化试剂 | 第25页 |
·实验使用的试剂盒 | 第25页 |
·溶液及LB 培养基的配方 | 第25-26页 |
2 实验方法 | 第26-37页 |
·总RNA 的提取及mRNA 的纯化 | 第26-29页 |
·抑制性消减杂交(Clontech公司的PCR-Select~(TM) cDNA Subtraction Kit) | 第29-35页 |
·cDNA 文库的构建 | 第35页 |
·差异基因的筛选 | 第35-36页 |
·cDNA 序列测定及ESTs 分析 | 第36-37页 |
第三章 结果与分析 | 第37-51页 |
1 总RNA 的提取及MRNA 的纯化 | 第37页 |
2 双链CDNA 的合成及RSA I 酶切 | 第37-38页 |
3 消减杂交后两次PCR 的结果分析 | 第38-39页 |
4 SSH 文库的质量分析 | 第39-41页 |
5 阳性克隆的生物信息学分析 | 第41-47页 |
·测序克隆的ESTs 同源性分析 | 第41-46页 |
·差异基因的功能聚类 | 第46-47页 |
6 讨论 | 第47-49页 |
·技术评价与选材 | 第47页 |
·EST 功能分析 | 第47-48页 |
·S-RNase 与沙田柚自交不亲和的关系 | 第48页 |
·蛋白激酶与沙田柚自交不亲和信号转导的关系 | 第48页 |
·泛素/265 蛋白酶体途径与沙田柚自交不亲和的关系 | 第48-49页 |
·“膜受体”假说与沙田柚自交不亲和的关系 | 第49页 |
7 小结 | 第49-50页 |
8 创新点 | 第50页 |
9 本课题下一步的研究计划 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-60页 |
附录 | 第60-64页 |
致谢 | 第64-65页 |