摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-34页 |
1 研究背景 | 第11-18页 |
·病原体 | 第11-15页 |
·流行病学研究 | 第15-17页 |
·临床症状 | 第17-18页 |
·病理变化 | 第18页 |
·病原的体外培养 | 第18页 |
2 研究目的及意义 | 第18-20页 |
3 巴贝斯虫研究进展 | 第20-34页 |
·巴贝斯虫致病的机理 | 第20-21页 |
·抗巴贝斯虫感染的免疫机制 | 第21-23页 |
·巴贝斯虫病的诊断 | 第23-30页 |
·巴贝斯虫基因工程疫苗研制方面的研究 | 第30-33页 |
·MSA-2C 基因的研究 | 第33-34页 |
第二章 牛巴贝斯虫裂殖子表面抗原MSA-2C 基因的克隆与序列分析 | 第34-44页 |
1 材料和主要试剂 | 第34页 |
·菌种和载体 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34页 |
·培养基和溶液 | 第34页 |
·病料 | 第34页 |
2 方法 | 第34-39页 |
·MSA-2C 基因的克隆 | 第34-36页 |
·MSA-2c 基因片段亚克隆载体的构建及序列分析 | 第36-39页 |
3 结果 | 第39-42页 |
·PCR 扩增结果 | 第39-40页 |
·PCR 扩增片段的克隆及酶切鉴定 | 第40页 |
·测序结果 | 第40-41页 |
·测序结果同源性比较 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-44页 |
第三章 新疆牛巴贝斯虫MSA-2c 基因的原核表达与重组蛋白的纯化及免疫反应性研究 | 第44-54页 |
1 材料和主要试剂 | 第44-45页 |
·菌种和载体 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44页 |
·培养基和溶液 | 第44页 |
·试验动物 | 第44-45页 |
2 方法 | 第45-50页 |
·MSA-2c 基因原核表达载体的构建 | 第45-46页 |
·MSA-2c 基因在原核细胞中的诱导表达及表达形式的确立 | 第46-48页 |
·GST-MSA-2c 融合蛋白的纯化 | 第48页 |
·ELISA 法检测GST-MSA-2c 融合蛋白的敏感性 | 第48-49页 |
·GST-MSA-2c 融合蛋白抗血清的获取 | 第49页 |
·ELISA 法测定抗体水平变化及效价 | 第49-50页 |
·GST-MSA-2c 融合蛋白的免疫活性分析 | 第50页 |
3 结果 | 第50-53页 |
·MSA-2c 基因在原核表达载体的构建 | 第50-51页 |
·GST-MSA-2c 融合蛋白的诱导表达及表达形式的确定 | 第51-52页 |
·GST-MSA-2c 融合蛋白抗血清效价评估结果 | 第52页 |
·蛋白定量结果 | 第52页 |
·Western blot 检测结果 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-54页 |
第四章 新疆牛巴贝斯虫MSA-2c 基因的的真核瞬时表达、重组质粒的纯化及免疫反应性研究 | 第54-62页 |
1 材料和主要试剂 | 第54页 |
·菌种和载体 | 第54页 |
·材料和试剂 | 第54页 |
·培养基和溶液 | 第54页 |
·试验动物 | 第54页 |
2 方法 | 第54-58页 |
·MSA-2c 基因真核表达载体的构建 | 第54-56页 |
·重组质粒的大量提取及纯化 | 第56-57页 |
·pCDNA3.1+-MSA-2c 重组质粒在小白鼠体内的瞬时表达 | 第57-58页 |
·pCDNA3.1+-MSA-2c 重组质粒抗血清的制备及抗体效价评估 | 第58页 |
·Western-blot 检测 | 第58页 |
3 结果 | 第58-60页 |
·真核表达载体的构建 | 第58页 |
·RT-PCR 结果 | 第58-59页 |
·MSA-2c 鼠源抗体效价评估 | 第59页 |
·Western-blot 检测结果 | 第59-60页 |
4 讨论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-77页 |
全文小结 | 第77-78页 |
附录I 常用试剂及配制 | 第78-82页 |
附录II 仪器设备 | 第82-83页 |
附录III 常用缩略语中英文对照表 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
个人简历 | 第85页 |