中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
前言 | 第11-20页 |
一、体内发生的细胞融合 | 第11-12页 |
二、体外发生的细胞融合 | 第12-17页 |
三、肿瘤细胞的重新编程 | 第17-18页 |
四、本课题的研究内容和拟解决的问题 | 第18-20页 |
实验材料 | 第20-24页 |
一、主要器材和设备 | 第20页 |
二、主要试剂及其制备 | 第20-23页 |
三、实验动物 | 第23-24页 |
实验方法 | 第24-38页 |
一、Hygromycin-RFP质粒的制备 | 第24-27页 |
二、病毒包装及转染 | 第27-28页 |
三、细胞培养 | 第28-29页 |
四、慢病毒转染胚胎干细胞 | 第29页 |
五、瞬转PEGFPC1于肿瘤细胞Hepa1-6及P19,稳定建系 | 第29-30页 |
六、细胞融合 | 第30-31页 |
七、细胞染色体标本的制备 | 第31页 |
八、流式细胞仪检测细胞的DNA含量 | 第31-32页 |
九、细胞计数 | 第32页 |
十、细胞生长曲线的测定 | 第32页 |
十一、克隆形成实验 | 第32页 |
十二、细胞的致瘤性 | 第32页 |
十三、石蜡包埋和切片 | 第32-34页 |
十四、细胞免疫化学 | 第34页 |
十五、RT-PCR | 第34-35页 |
十六、Q-PCR分析基因相对表达量 | 第35-38页 |
实验结果 | 第38-55页 |
一、建立稳定的融合前转基因细胞株 | 第38-39页 |
二、融合后的杂合细胞 | 第39-55页 |
讨论 | 第55-60页 |
一、融合系统的选择 | 第55页 |
二、分化程度不同的肿瘤细胞在与胚胎干细胞融合后出现的差别及可能性分析 | 第55-56页 |
三、杂合细胞的多能性基因、组织特异性基因和肿瘤相关基因的表达 | 第56-57页 |
四、杂合细胞的分化潜能和肿瘤源性 | 第57-58页 |
五、胚胎干细胞和肿瘤细胞融合所得到的杂合细胞是畸胎瘤细胞 | 第58-60页 |
附录: Hygromycin RFP质粒图谱 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
综述: Cell fusion: from in-vivo to in-vitro | 第69-84页 |
致谢 | 第84页 |