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胚胎干细胞重新编程肿瘤细胞的研究

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略词表第10-11页
前言第11-20页
 一、体内发生的细胞融合第11-12页
 二、体外发生的细胞融合第12-17页
 三、肿瘤细胞的重新编程第17-18页
 四、本课题的研究内容和拟解决的问题第18-20页
实验材料第20-24页
 一、主要器材和设备第20页
 二、主要试剂及其制备第20-23页
 三、实验动物第23-24页
实验方法第24-38页
 一、Hygromycin-RFP质粒的制备第24-27页
 二、病毒包装及转染第27-28页
 三、细胞培养第28-29页
 四、慢病毒转染胚胎干细胞第29页
 五、瞬转PEGFPC1于肿瘤细胞Hepa1-6及P19,稳定建系第29-30页
 六、细胞融合第30-31页
 七、细胞染色体标本的制备第31页
 八、流式细胞仪检测细胞的DNA含量第31-32页
 九、细胞计数第32页
 十、细胞生长曲线的测定第32页
 十一、克隆形成实验第32页
 十二、细胞的致瘤性第32页
 十三、石蜡包埋和切片第32-34页
 十四、细胞免疫化学第34页
 十五、RT-PCR第34-35页
 十六、Q-PCR分析基因相对表达量第35-38页
实验结果第38-55页
 一、建立稳定的融合前转基因细胞株第38-39页
 二、融合后的杂合细胞第39-55页
讨论第55-60页
 一、融合系统的选择第55页
 二、分化程度不同的肿瘤细胞在与胚胎干细胞融合后出现的差别及可能性分析第55-56页
 三、杂合细胞的多能性基因、组织特异性基因和肿瘤相关基因的表达第56-57页
 四、杂合细胞的分化潜能和肿瘤源性第57-58页
 五、胚胎干细胞和肿瘤细胞融合所得到的杂合细胞是畸胎瘤细胞第58-60页
附录: Hygromycin RFP质粒图谱第60-61页
参考文献第61-69页
综述: Cell fusion: from in-vivo to in-vitro第69-84页
致谢第84页

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