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泡桐丛枝病植原体延伸因子tuf基因分析及其他寄主植物的检测

中文摘要第1-14页
ABSTRACT第14-16页
第一章 引言和文献综述第16-39页
 1 植原体概述第16-30页
   ·植原体的分类第16-19页
   ·植原体的基因组第19-21页
     ·染色质基因组第19-20页
     ·染色质外基因组第20-21页
   ·植原体检测技术第21-28页
     ·电子显微镜观察第21-22页
     ·组织化学技术第22-23页
     ·血清学方法第23-24页
     ·核酸杂交技术第24-25页
     ·PCR 技术第25-28页
   ·植原体蛋白延伸因子(EF-Tu)研究第28-29页
   ·植原体的寄主范围的研究第29-30页
 2 泡桐丛枝病研究第30-36页
   ·发生和危害第30-31页
   ·泡桐丛枝病病原及生物学第31-32页
   ·泡桐丛枝病传播途径的研究第32-33页
   ·泡桐-植原体互作关系研究第33-36页
     ·染病植株组织学变化第34页
     ·激素的变化第34-35页
     ·蛋白质的变化第35-36页
   ·泡桐丛枝病的防治技术第36页
 3 本研究的立论依据、研究内容及意义第36-39页
   ·立题依据第36-37页
   ·研究内容及意义第37-39页
第二章 泡桐丛枝病植原体南阳分离物延伸因子tuf 基因原核表达、抗血清的制备及其血清学关系比较第39-71页
 1. 材料和方法第39-55页
   ·材料第39-43页
     ·植原体和染病苗组织培养第39页
     ·生化及分子生物学试剂第39-40页
     ·主要实验仪器第40页
     ·实验常规试剂及配制第40-41页
     ·本实验所需试剂及配制第41-43页
     ·引物设计与合成第43页
   ·方法第43-55页
     ·总DNA 提取第43-44页
     ·PaWB-NY tuf 基因的扩增第44页
     ·电泳第44-45页
     ·PaWB-NY tuf 基因的克隆与序列分析第45-48页
     ·PaWB-NY tuf 基因的原核表达及抗血清的制备第48-51页
     ·血清学反应第51-55页
 2. 结果与分析第55-66页
   ·PaWB-NY tuf 基因的克隆与序列分析第55-58页
   ·PaWB-NY tuf 基因的原核表达及抗血清的制备第58-60页
     ·PaWB-NY tuf 基因的原核表达载体的构建第58-59页
     ·PaWB-NY tuf 基因的诱导表达及SDS-PAGE 检测第59-60页
   ·血清学反应第60-66页
     ·Western blot第60页
     ·ACP-ELISA第60-63页
     ·Dot blot 检测第63-64页
     ·间接免疫荧光显微镜观察第64-66页
 3. 结论与讨论第66-71页
   ·植原体抗血清的制备第66-67页
   ·序列分析结果与血清学关系第67-68页
   ·三种血清学方法的比较第68-69页
   ·几种抗原制备方法的比较第69页
   ·PaWB-NY tuf 蛋白的预测分析第69-71页
第三章 泡桐丛枝病原其他寄主的检测与鉴定第71-94页
 1. 材料和方法第71-76页
   ·材料第71-73页
     ·材料来源第71页
     ·克隆菌株和载体第71页
     ·生化及分子生物学试剂第71页
     ·常规实验所需试剂及配制第71-72页
     ·主要实验仪器第72页
     ·引物设计与合成第72页
     ·荧光显微镜观察所用试剂第72页
     ·植物总DNA 提取试剂第72-73页
   ·方法第73-76页
     ·总DNA 提取第73-74页
     ·田间采集植物植原体16S rRNA 基因的PCR 扩增第74-75页
     ·楸树黄化植原体的tuf 基因的PCR 扩增第75页
     ·琼脂糖电泳第75页
     ·16S rRNA 基因和tuf 基因的克隆及序列分析第75-76页
     ·楸树黄叶病组织DAPI 染色显微镜观察第76页
     ·间接免疫荧光显微镜观察第76页
 2. 结果与分析第76-89页
   ·采集作物、杂草和树木症状表现及采集地生境第76-80页
   ·采集样品的16S rRNA 基因 PCR 检测结果第80-81页
   ·CbY 植原体的tuf 基因的PCR 扩增第81-82页
   ·PCR 产物的克隆及重组质粒PCR 鉴定结果第82-83页
   ·16S rRNA 基因序列测定及分析第83-86页
   ·CbY 植原体tuf 基因序列测定及分析第86-87页
   ·CbY 组织DAPI 染色荧光显微镜观察第87-89页
   ·CbY 组织的间接免疫荧光观察第89页
 3. 结论与讨论第89-94页
第四章 两种植物植原体病害的初步检测与鉴定第94-105页
 1. 材料和方法第94-95页
   ·材料第94-95页
     ·样品采集第94页
     ·菌株和载体第94页
     ·生化及分子生物学试剂第94页
     ·常规实验所需试剂及配制第94页
     ·主要实验仪器第94页
     ·引物设计与合成第94-95页
   ·方法第95页
     ·总DNA 提取第95页
     ·田间采集植物植原体16S rRNA 基因的PCR 扩增第95页
     ·16S rRNA 基因的克隆及序列分析第95页
 2. 结果与分析第95-103页
   ·采集植物材料第95页
   ·16S rRNA 基因 PCR 检测结果第95-97页
   ·PCR 产物的克隆及重组质粒酶切鉴定结果第97-98页
   ·16S rRNA 基因序列测定及分析第98-100页
   ·丁香簇叶中植原体16S rDNA 序列SoP-2 的RFLP 分析第100-103页
 3. 结论与讨论第103-105页
参考文献第105-120页
致谢第120-121页
硕士期间发表的学术论文第121页

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