中文摘要 | 第1-14页 |
ABSTRACT | 第14-16页 |
第一章 引言和文献综述 | 第16-39页 |
1 植原体概述 | 第16-30页 |
·植原体的分类 | 第16-19页 |
·植原体的基因组 | 第19-21页 |
·染色质基因组 | 第19-20页 |
·染色质外基因组 | 第20-21页 |
·植原体检测技术 | 第21-28页 |
·电子显微镜观察 | 第21-22页 |
·组织化学技术 | 第22-23页 |
·血清学方法 | 第23-24页 |
·核酸杂交技术 | 第24-25页 |
·PCR 技术 | 第25-28页 |
·植原体蛋白延伸因子(EF-Tu)研究 | 第28-29页 |
·植原体的寄主范围的研究 | 第29-30页 |
2 泡桐丛枝病研究 | 第30-36页 |
·发生和危害 | 第30-31页 |
·泡桐丛枝病病原及生物学 | 第31-32页 |
·泡桐丛枝病传播途径的研究 | 第32-33页 |
·泡桐-植原体互作关系研究 | 第33-36页 |
·染病植株组织学变化 | 第34页 |
·激素的变化 | 第34-35页 |
·蛋白质的变化 | 第35-36页 |
·泡桐丛枝病的防治技术 | 第36页 |
3 本研究的立论依据、研究内容及意义 | 第36-39页 |
·立题依据 | 第36-37页 |
·研究内容及意义 | 第37-39页 |
第二章 泡桐丛枝病植原体南阳分离物延伸因子tuf 基因原核表达、抗血清的制备及其血清学关系比较 | 第39-71页 |
1. 材料和方法 | 第39-55页 |
·材料 | 第39-43页 |
·植原体和染病苗组织培养 | 第39页 |
·生化及分子生物学试剂 | 第39-40页 |
·主要实验仪器 | 第40页 |
·实验常规试剂及配制 | 第40-41页 |
·本实验所需试剂及配制 | 第41-43页 |
·引物设计与合成 | 第43页 |
·方法 | 第43-55页 |
·总DNA 提取 | 第43-44页 |
·PaWB-NY tuf 基因的扩增 | 第44页 |
·电泳 | 第44-45页 |
·PaWB-NY tuf 基因的克隆与序列分析 | 第45-48页 |
·PaWB-NY tuf 基因的原核表达及抗血清的制备 | 第48-51页 |
·血清学反应 | 第51-55页 |
2. 结果与分析 | 第55-66页 |
·PaWB-NY tuf 基因的克隆与序列分析 | 第55-58页 |
·PaWB-NY tuf 基因的原核表达及抗血清的制备 | 第58-60页 |
·PaWB-NY tuf 基因的原核表达载体的构建 | 第58-59页 |
·PaWB-NY tuf 基因的诱导表达及SDS-PAGE 检测 | 第59-60页 |
·血清学反应 | 第60-66页 |
·Western blot | 第60页 |
·ACP-ELISA | 第60-63页 |
·Dot blot 检测 | 第63-64页 |
·间接免疫荧光显微镜观察 | 第64-66页 |
3. 结论与讨论 | 第66-71页 |
·植原体抗血清的制备 | 第66-67页 |
·序列分析结果与血清学关系 | 第67-68页 |
·三种血清学方法的比较 | 第68-69页 |
·几种抗原制备方法的比较 | 第69页 |
·PaWB-NY tuf 蛋白的预测分析 | 第69-71页 |
第三章 泡桐丛枝病原其他寄主的检测与鉴定 | 第71-94页 |
1. 材料和方法 | 第71-76页 |
·材料 | 第71-73页 |
·材料来源 | 第71页 |
·克隆菌株和载体 | 第71页 |
·生化及分子生物学试剂 | 第71页 |
·常规实验所需试剂及配制 | 第71-72页 |
·主要实验仪器 | 第72页 |
·引物设计与合成 | 第72页 |
·荧光显微镜观察所用试剂 | 第72页 |
·植物总DNA 提取试剂 | 第72-73页 |
·方法 | 第73-76页 |
·总DNA 提取 | 第73-74页 |
·田间采集植物植原体16S rRNA 基因的PCR 扩增 | 第74-75页 |
·楸树黄化植原体的tuf 基因的PCR 扩增 | 第75页 |
·琼脂糖电泳 | 第75页 |
·16S rRNA 基因和tuf 基因的克隆及序列分析 | 第75-76页 |
·楸树黄叶病组织DAPI 染色显微镜观察 | 第76页 |
·间接免疫荧光显微镜观察 | 第76页 |
2. 结果与分析 | 第76-89页 |
·采集作物、杂草和树木症状表现及采集地生境 | 第76-80页 |
·采集样品的16S rRNA 基因 PCR 检测结果 | 第80-81页 |
·CbY 植原体的tuf 基因的PCR 扩增 | 第81-82页 |
·PCR 产物的克隆及重组质粒PCR 鉴定结果 | 第82-83页 |
·16S rRNA 基因序列测定及分析 | 第83-86页 |
·CbY 植原体tuf 基因序列测定及分析 | 第86-87页 |
·CbY 组织DAPI 染色荧光显微镜观察 | 第87-89页 |
·CbY 组织的间接免疫荧光观察 | 第89页 |
3. 结论与讨论 | 第89-94页 |
第四章 两种植物植原体病害的初步检测与鉴定 | 第94-105页 |
1. 材料和方法 | 第94-95页 |
·材料 | 第94-95页 |
·样品采集 | 第94页 |
·菌株和载体 | 第94页 |
·生化及分子生物学试剂 | 第94页 |
·常规实验所需试剂及配制 | 第94页 |
·主要实验仪器 | 第94页 |
·引物设计与合成 | 第94-95页 |
·方法 | 第95页 |
·总DNA 提取 | 第95页 |
·田间采集植物植原体16S rRNA 基因的PCR 扩增 | 第95页 |
·16S rRNA 基因的克隆及序列分析 | 第95页 |
2. 结果与分析 | 第95-103页 |
·采集植物材料 | 第95页 |
·16S rRNA 基因 PCR 检测结果 | 第95-97页 |
·PCR 产物的克隆及重组质粒酶切鉴定结果 | 第97-98页 |
·16S rRNA 基因序列测定及分析 | 第98-100页 |
·丁香簇叶中植原体16S rDNA 序列SoP-2 的RFLP 分析 | 第100-103页 |
3. 结论与讨论 | 第103-105页 |
参考文献 | 第105-120页 |
致谢 | 第120-121页 |
硕士期间发表的学术论文 | 第121页 |