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显性核不育亚麻可育、不育花蕾mRNA差异表达研究及差异片段分析

摘要第1-4页
Abstract第4-10页
1 引言第10-18页
   ·植物雄性不育第10-15页
     ·植物雄性不育的来源第10-11页
       ·天然不育源第10页
       ·杂交后代中分离第10-11页
       ·人工诱变第11页
       ·基因工程第11页
     ·雄性不育类型第11-14页
       ·细胞质雄性不育第11-12页
       ·细胞核雄性不育第12-13页
       ·核质互作雄性不育第13-14页
     ·植物雄性不育的细胞学研究第14-15页
       ·雄性不育系花粉败育的主要时期第14页
       ·绒毡层与雄性不育的关系第14-15页
   ·MRNA 差异显示技术第15-17页
     ·MRNA 差异显示的优点第15页
     ·MRNA 差异显示技术在实际应用中存在的问题第15-16页
     ·MRNA 差异显示技术的改进第16页
     ·MRNA 差异显示技术在植物雄性不育研究中的应用第16-17页
   ·亚麻雄性不育研究进展第17-18页
     ·亚麻概述第17页
     ·亚麻雄性不育的研究进展第17-18页
   ·本研究的目的和意义第18页
2 材料及方法第18-26页
   ·研究材料第18-21页
     ·植物材料第18页
     ·主要仪器设备第18-19页
     ·主要试剂第19页
     ·主要引物第19页
     ·主要试剂的配制第19-21页
   ·实验方法第21-26页
     ·花蕾总RNA 的提取第21页
     ·总RNA 质量的检测第21页
     ·反转录—CDNA 第一链的合成第21-22页
     ·CDNA 第一链的PCR 扩增第22页
     ·PCR 产物聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染第22-23页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第22-23页
       ·银染第23页
     ·差异片段的回收及二次扩增第23页
       ·差异片段的回收第23页
       ·差异片段的二次PCR 扩增第23页
     ·反向NORTHERN 杂交验证第23-25页
       ·探针的制备第23-24页
       ·点膜第24页
       ·预杂交第24页
       ·探针变性第24页
       ·杂交第24页
       ·洗膜第24页
       ·免疫检测第24-25页
     ·阳性CDNA 差异片段的克隆及序列分析第25-26页
       ·差异片段的回收纯化第25页
       ·差异片段的连接第25页
       ·连接产物的转化第25-26页
       ·蓝/白菌落筛选与划线培养第26页
       ·快速提取质粒检测阳性克隆第26页
       ·重组质粒的PCR 检测第26页
       ·序列测定第26页
       ·序列分析第26页
3 结果与分析第26-38页
   ·总RNA 质量的检测结果第26-27页
   ·MRNA 差异条带的显示第27-28页
   ·部分差异条带的显示结果第28页
   ·差异片段回收后的二次PCR 扩增第28-29页
   ·反向NORTHERN 杂交验证第29页
   ·阳性差异片段的克隆与检测第29-31页
   ·阳性差异片段的测序结果第31-33页
     ·不育花蕾特异片段序列第31-32页
     ·可育花蕾特异片段序列第32-33页
   ·序列同源性分析第33-38页
     ·阳性差异片段G+E07+100BP 的比对结果第33-34页
     ·阳性差异片段G+E07+330BP 的比对结果第34-35页
     ·阳性差异片段G+E07+830BP 的比对结果第35-36页
     ·阳性差异片段G+S273+500BP 的比对结果第36-37页
     ·阳性差异片段A+S267+300BP 的比对结果第37-38页
     ·阳性差异片段G+S274-250BP 和G+5274-450BP 的比对结果第38页
4 讨论第38-40页
   ·RNA 的提取第38页
   ·MRNA 差异显示第38-39页
   ·差异片段与亚麻雄性核不育的关系第39-40页
     ·不育差异片段G+E07+100BP 与育性的关系第39页
     ·不育差异片段G+E07+330BP 与育性的关系第39页
     ·不育差异片段G+E07+830BP 与育性的关系第39页
     ·不育差异片段G+S273+500BP 与育性的关系第39-40页
     ·不育差异片段A+S267+300BP 与育性的关系第40页
     ·可育差异片段G+S274-250BP 和G+5274-450BP 与育性的关系第40页
5 结论第40-42页
致谢第42-43页
参考文献第43-47页
附录第47-48页
作者简介第48页

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