摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-10页 |
1 引言 | 第10-18页 |
·植物雄性不育 | 第10-15页 |
·植物雄性不育的来源 | 第10-11页 |
·天然不育源 | 第10页 |
·杂交后代中分离 | 第10-11页 |
·人工诱变 | 第11页 |
·基因工程 | 第11页 |
·雄性不育类型 | 第11-14页 |
·细胞质雄性不育 | 第11-12页 |
·细胞核雄性不育 | 第12-13页 |
·核质互作雄性不育 | 第13-14页 |
·植物雄性不育的细胞学研究 | 第14-15页 |
·雄性不育系花粉败育的主要时期 | 第14页 |
·绒毡层与雄性不育的关系 | 第14-15页 |
·MRNA 差异显示技术 | 第15-17页 |
·MRNA 差异显示的优点 | 第15页 |
·MRNA 差异显示技术在实际应用中存在的问题 | 第15-16页 |
·MRNA 差异显示技术的改进 | 第16页 |
·MRNA 差异显示技术在植物雄性不育研究中的应用 | 第16-17页 |
·亚麻雄性不育研究进展 | 第17-18页 |
·亚麻概述 | 第17页 |
·亚麻雄性不育的研究进展 | 第17-18页 |
·本研究的目的和意义 | 第18页 |
2 材料及方法 | 第18-26页 |
·研究材料 | 第18-21页 |
·植物材料 | 第18页 |
·主要仪器设备 | 第18-19页 |
·主要试剂 | 第19页 |
·主要引物 | 第19页 |
·主要试剂的配制 | 第19-21页 |
·实验方法 | 第21-26页 |
·花蕾总RNA 的提取 | 第21页 |
·总RNA 质量的检测 | 第21页 |
·反转录—CDNA 第一链的合成 | 第21-22页 |
·CDNA 第一链的PCR 扩增 | 第22页 |
·PCR 产物聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染 | 第22-23页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第22-23页 |
·银染 | 第23页 |
·差异片段的回收及二次扩增 | 第23页 |
·差异片段的回收 | 第23页 |
·差异片段的二次PCR 扩增 | 第23页 |
·反向NORTHERN 杂交验证 | 第23-25页 |
·探针的制备 | 第23-24页 |
·点膜 | 第24页 |
·预杂交 | 第24页 |
·探针变性 | 第24页 |
·杂交 | 第24页 |
·洗膜 | 第24页 |
·免疫检测 | 第24-25页 |
·阳性CDNA 差异片段的克隆及序列分析 | 第25-26页 |
·差异片段的回收纯化 | 第25页 |
·差异片段的连接 | 第25页 |
·连接产物的转化 | 第25-26页 |
·蓝/白菌落筛选与划线培养 | 第26页 |
·快速提取质粒检测阳性克隆 | 第26页 |
·重组质粒的PCR 检测 | 第26页 |
·序列测定 | 第26页 |
·序列分析 | 第26页 |
3 结果与分析 | 第26-38页 |
·总RNA 质量的检测结果 | 第26-27页 |
·MRNA 差异条带的显示 | 第27-28页 |
·部分差异条带的显示结果 | 第28页 |
·差异片段回收后的二次PCR 扩增 | 第28-29页 |
·反向NORTHERN 杂交验证 | 第29页 |
·阳性差异片段的克隆与检测 | 第29-31页 |
·阳性差异片段的测序结果 | 第31-33页 |
·不育花蕾特异片段序列 | 第31-32页 |
·可育花蕾特异片段序列 | 第32-33页 |
·序列同源性分析 | 第33-38页 |
·阳性差异片段G+E07+100BP 的比对结果 | 第33-34页 |
·阳性差异片段G+E07+330BP 的比对结果 | 第34-35页 |
·阳性差异片段G+E07+830BP 的比对结果 | 第35-36页 |
·阳性差异片段G+S273+500BP 的比对结果 | 第36-37页 |
·阳性差异片段A+S267+300BP 的比对结果 | 第37-38页 |
·阳性差异片段G+S274-250BP 和G+5274-450BP 的比对结果 | 第38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
·RNA 的提取 | 第38页 |
·MRNA 差异显示 | 第38-39页 |
·差异片段与亚麻雄性核不育的关系 | 第39-40页 |
·不育差异片段G+E07+100BP 与育性的关系 | 第39页 |
·不育差异片段G+E07+330BP 与育性的关系 | 第39页 |
·不育差异片段G+E07+830BP 与育性的关系 | 第39页 |
·不育差异片段G+S273+500BP 与育性的关系 | 第39-40页 |
·不育差异片段A+S267+300BP 与育性的关系 | 第40页 |
·可育差异片段G+S274-250BP 和G+5274-450BP 与育性的关系 | 第40页 |
5 结论 | 第40-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
附录 | 第47-48页 |
作者简介 | 第48页 |