| 摘要 | 第1-14页 |
| ABSTRACT | 第14-19页 |
| 符号与名词缩写 | 第19-21页 |
| 第一章 文献综述 | 第21-39页 |
| 1 复杂性状研究概况 | 第21-29页 |
| ·表型变异的遗传基础 | 第21页 |
| ·复杂性状的遗传解析 | 第21-29页 |
| ·复杂性状的遗传分析方法 | 第21-23页 |
| ·复杂性状基因的遗传鉴定 | 第23-26页 |
| ·QTL分析的原理和方法 | 第26-27页 |
| ·复杂性状研究的挑战和展望 | 第27-29页 |
| 2 真姬菇概述 | 第29页 |
| ·真姬菇的分类地位 | 第29页 |
| ·真姬菇的价值 | 第29页 |
| 3 遗传标记 | 第29-32页 |
| ·遗传标记在食用菌遗传育种中的应 | 第29-30页 |
| ·AFLP分子标记技术 | 第30-32页 |
| 4 酵母细胞絮凝 | 第32-38页 |
| ·酵母模式生物的应用 | 第32-33页 |
| ·酵母的絮凝 | 第33-38页 |
| ·酵母絮凝的机理 | 第33-35页 |
| ·酵母絮凝遗传学研究 | 第35-38页 |
| 5 研究目的和意义 | 第38-39页 |
| 第二章 真姬菇AFLP分子标记的建立和遗传多样性分析 | 第39-53页 |
| 1 试剂和材料 | 第39-41页 |
| ·药品和试剂 | 第39-40页 |
| ·溶液 | 第40-41页 |
| ·工具软件 | 第41页 |
| ·仪器 | 第41页 |
| ·菌株材料 | 第41页 |
| 2 实验方法 | 第41-45页 |
| ·真姬菇基因组DNA的提取 | 第41-43页 |
| ·AFLP标记技术分析 | 第43-45页 |
| ·基因组DNA的酶切 | 第43页 |
| ·酶切片断与人工接头连接 | 第43页 |
| ·预扩增反应 | 第43-44页 |
| ·选择性扩增反应 | 第44页 |
| ·自动化荧光检测和数据分析 | 第44-45页 |
| 3 结果和分析 | 第45-51页 |
| ·真姬菇AFLP标记技术方法 | 第45-47页 |
| ·AFLP标记多态性 | 第47-49页 |
| ·基于UPGMA方法的真姬菇遗传多样性分析 | 第49-50页 |
| ·主成分分析 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| ·真姬菇基因组DNA的提取 | 第51页 |
| ·真姬菇遗传多样性评价 | 第51-53页 |
| 第三章 酵母F_2单倍体分离群体的QTL作图 | 第53-67页 |
| 1 试剂和材料 | 第53-56页 |
| ·试剂 | 第53-54页 |
| ·溶液 | 第54-55页 |
| ·工具软件 | 第55页 |
| ·仪器 | 第55页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| 2 实验方法 | 第56-58页 |
| ·F_2分离群体的构建 | 第56页 |
| ·分离群体的表型测定 | 第56页 |
| ·SNP标记的设计 | 第56-57页 |
| ·酵母DNA提取 | 第57页 |
| ·DNA片断的回收纯化 | 第57-58页 |
| ·全基因组的QTL扫描 | 第58页 |
| 3 结果和分析 | 第58-65页 |
| ·F_2单倍体分离群体的构建和表型测定 | 第58-60页 |
| ·酵母全基因组QTL扫描 | 第60-61页 |
| ·PCR-RFLP的SNP检测 | 第61-62页 |
| ·精细作图 | 第62-65页 |
| 4 讨论与小结 | 第65-67页 |
| ·分类性状的遗传基础研究 | 第65页 |
| ·超亲分离是一种普遍存在的遗传现象 | 第65-67页 |
| 第四章 酵母絮凝主效基因的定位克隆 | 第67-115页 |
| 1 试剂和材料 | 第68-71页 |
| ·试剂 | 第68页 |
| ·溶液 | 第68-71页 |
| ·工具软件 | 第71页 |
| ·仪器 | 第71页 |
| 2 实验方法 | 第71-90页 |
| ·基因敲除 | 第71-76页 |
| ·FPQ2敲除引物设计 | 第71-72页 |
| ·置换片断PCR扩增 | 第72页 |
| ·酵母转化 | 第72-73页 |
| ·转化子验证 | 第73页 |
| ·2号染色体QTL区域其余非必需基因的敲除 | 第73-76页 |
| ·FPQ2编码区及部分上游间隔区序列分析 | 第76页 |
| ·FPQ2编码蛋白与同源蛋白的多序列比对及蛋白结构域预测 | 第76页 |
| ·FPQ2等位基因置换 | 第76-82页 |
| ·长片断PCR扩增 | 第77页 |
| ·T载体克隆 | 第77-78页 |
| ·细菌转化 | 第78-79页 |
| ·连接反应 | 第79-80页 |
| ·基因置换质粒的构建 | 第80页 |
| ·酵母转化 | 第80-82页 |
| ·定点突变和QTN鉴定 | 第82-84页 |
| ·定点突变引物设计 | 第82页 |
| ·基因拼接 | 第82-84页 |
| ·FPQ2表达水平检测 | 第84-88页 |
| ·酵母RNA提取 | 第84-85页 |
| ·逆转录 | 第85页 |
| ·定量PCR | 第85-86页 |
| ·Western印迹分析 | 第86-88页 |
| ·QTL基因FPQl5的鉴定 | 第88页 |
| ·QTL基因的加性和互作效应 | 第88-89页 |
| ·QTL基因表型贡献率的计算 | 第88页 |
| ·多基因敲除菌株的构建 | 第88-89页 |
| ·子细胞特异表达基因的表达量分析 | 第89页 |
| ·FPQ2缺失对酵母乙醇耐受性的影响 | 第89-90页 |
| 3 结果和分析 | 第90-105页 |
| ·基因敲除 | 第90-91页 |
| ·获得正确敲除FPQ2基因的酵母菌株 | 第90页 |
| ·FPQ2基因敲除菌株的絮凝表型测定 | 第90-91页 |
| ·两亲本FPQ2基因编码区序列差异 | 第91页 |
| ·FPQ2编码蛋白与同源蛋白的多序列比对及蛋白结构域预测 | 第91-93页 |
| ·FPQ2等位基因置换 | 第93-94页 |
| ·置换质粒的构建 | 第93页 |
| ·酵母转化 | 第93-94页 |
| ·等位基因置换菌株的表型测定 | 第94页 |
| ·QTN的鉴定 | 第94-96页 |
| ·FPQ2表达水平检测 | 第96-97页 |
| ·QTL基因FPQ15的鉴定 | 第97-101页 |
| ·FPQ15的功能验证 | 第97-98页 |
| ·FPQ15的结构分析 | 第98-101页 |
| ·QTL基因的加性和互作效应 | 第101-103页 |
| ·4个QTL基因对絮凝表型变异的贡献率 | 第101页 |
| ·多基因敲除菌株的构建和表型测定 | 第101-103页 |
| ·子细胞特异表达基因的表达量分析 | 第103页 |
| ·细胞絮凝对酵母乙醇耐受性的影响 | 第103-105页 |
| 4 讨论 | 第105-115页 |
| ·运用简单模型研究复杂性状是切实可行的 | 第105页 |
| ·絮凝性状复杂遗传结构解析 | 第105-106页 |
| ·絮凝多基因网络的初步探讨 | 第106-107页 |
| ·絮凝QTL基因的遗传互作 | 第107-110页 |
| ·对FPQ2和FPQ15影响絮凝的作用方式的假设 | 第110-115页 |
| 第五章 全文总结 | 第115-117页 |
| 展望 | 第117-119页 |
| 参考文献 | 第119-129页 |
| 致谢 | 第129-131页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第131页 |
