中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
前言 | 第9-13页 |
实验材料 | 第13-28页 |
实验方法 | 第28-67页 |
1.分子生物学实验方法 | 第28-36页 |
2.重组蛋白的表达和纯化 | 第36-44页 |
3.蛋白质电泳 | 第44-49页 |
4.Western blot | 第49-52页 |
5.酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第52-55页 |
6.抗体纯化 | 第55页 |
7.蛋白质活性测定 | 第55-56页 |
8.蛋白质相互作用 | 第56-59页 |
9.细胞生物学方法 | 第59-61页 |
10.细胞调亡流式检测 | 第61-62页 |
11.细胞信号通路实验 | 第62-63页 |
12.间接免疫荧光(IFA) | 第63页 |
13.量子点(QDs) | 第63-64页 |
14.细胞内吞实验 | 第64-65页 |
15.动物实验 | 第65-66页 |
16.小鼠细胞因子检测 | 第66-67页 |
实验结果 | 第67-137页 |
第一部分 疟原虫来源的巨噬细胞迁移抑制因子的功能性研究 | 第67-125页 |
实验流程图 | 第67-68页 |
一、恶性疟原虫来源的MIF蛋白相互作用分子的研究 | 第68-83页 |
1.人CD74的克隆表达和纯化 | 第68-73页 |
2.人Jab1的克隆表达和纯化 | 第73-77页 |
3.在真核系统中研究PfMIF和CD74以及Jab1的相互作用 | 第77-83页 |
二、约氏疟原虫来源的MIF内吞研究 | 第83-92页 |
1.PyMIF和MmMIF无标签蛋白的纯化 | 第83-86页 |
2.量子点标记PyMIF和MmMIF蛋白的研究 | 第86-92页 |
3.有机荧光染料标记PyMIF和MmMIF蛋白的研究 | 第92页 |
4.生物素标记PyMIF和MmMIF蛋白的研究 | 第92页 |
三、约氏疟原虫来源的MIF蛋白信号通路的研究 | 第92-101页 |
1.PyMIF和MmMIF蛋白的表达纯化以及内毒素去除 | 第92-94页 |
2.PyMIF和MmMIF对多种信号通路的研究 | 第94-101页 |
四.PyMIF对细胞命运的影响 | 第101-108页 |
1.PyMIF对纤维上皮细胞命运的影响 | 第101-103页 |
2.PyMIF对前B细胞命运的影响 | 第103-104页 |
3.PyMIF对小鼠巨噬细胞命运的影响 | 第104-108页 |
五.PyMIF和MmMIF联合作用的研究 | 第108-110页 |
六.重组PyMIF对小鼠感染过程的影响 | 第110-115页 |
1.感染小鼠体内注射rPyMIF并观察其对感染过程的影响 | 第110-111页 |
2.感染小鼠体内注射rPyMIF并检测小鼠细胞因子水平的变化 | 第111-114页 |
3.rPyMIF对感染小鼠配子体出现时间影响的观察 | 第114-115页 |
讨论 | 第115-124页 |
小结 | 第124-125页 |
第二部分 不同品系小鼠感染约氏疟原虫及用药后PyMIF水平观察 | 第125-131页 |
实验结果 | 第125-129页 |
讨论 | 第129-130页 |
小结 | 第130-131页 |
第三部分 三种去除巨噬细胞迁移抑制因子重组蛋白内毒素方法的比较 | 第131-137页 |
实验结果 | 第131-135页 |
讨论 | 第135-136页 |
小结 | 第136-137页 |
参考文献 | 第137-144页 |
文献综述一:巨噬细胞迁移抑制因子的分子作用机制研究进展 | 第144-159页 |
文献综述二:量子点在分子标记和细胞成像方面的应用 | 第159-165页 |
附录 | 第165-171页 |
附录Ⅰ:本论文所用的英文缩略语 | 第165-167页 |
附录Ⅱ:HuMIF-His重组蛋白内毒素检测报告 | 第167-170页 |
附录Ⅲ:硕博连读期间发表的文章和参加的会议 | 第170-171页 |
致谢 | 第171-172页 |