中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-12页 |
第一章 紫杉烷13α-,14β-羟基化酶基因调控研究 | 第12-91页 |
一 引言 | 第12-42页 |
1 紫杉醇生物合成的研究现状 | 第12-17页 |
2 紫杉醇代谢的研究 | 第17-19页 |
3 转基因技术在紫杉醇生物合成中的应用 | 第19-23页 |
4 小RNA与RNA干扰技术在植物转基因工程中的应用 | 第23-38页 |
5 立论依据和研究意义 | 第38-40页 |
6 研究的主要内容 | 第40-41页 |
7 技术路线 | 第41-42页 |
二 材料与方法 | 第42-57页 |
1 紫杉烷1 3α-羟基化酶基因正向表达载体的构建 | 第42-43页 |
2 14-β羟基化酶基因反义RNA表达载体的构建 | 第43-45页 |
3 14-β羟基化酶基因RNAi表达载体的构建 | 第45-49页 |
4 几种miRNA表达载体的构建 | 第49-51页 |
5 高效转基因体系的建立 | 第51-52页 |
6 转基因材料的检测 | 第52-57页 |
三 结果与分析 | 第57-70页 |
1 影响转基因体系的几种因素 | 第57-58页 |
2 利用pZ14aRNAi载体转化红豆杉细胞 | 第58-61页 |
3 利用pZ14bRNAi载体转化红豆杉细胞 | 第61-64页 |
4 利用pZ14 c反义RNA载体转化红豆杉细胞 | 第64页 |
5 利用pC13OH载体转化红豆杉细胞 | 第64-67页 |
6 利用pE415载体转化红豆杉细胞 | 第67-68页 |
7 其他转化红豆杉细胞的实验 | 第68-70页 |
四 讨论 | 第70-72页 |
五 结论 | 第72-74页 |
六 参考文献 | 第74-91页 |
第二章 茉莉酸甲酯诱导下红豆杉细胞中蛋白质的表达 | 第91-128页 |
一 引言 | 第91-105页 |
1 蛋白质组学的研究进展 | 第91-99页 |
2 茉莉酸甲酯的生理学特性及应用 | 第99-102页 |
3 立论依据和研究意义 | 第102-104页 |
4 研究目标和主要内容 | 第104-105页 |
5 技术路线 | 第105页 |
二 材料与方法 | 第105-115页 |
1 材料 | 第106-108页 |
2 方法 | 第108-115页 |
三 结果与分析 | 第115-120页 |
1 茉莉酸甲酯诱导中国红豆杉愈伤组织细胞的生长情况 | 第115页 |
2 蛋白质浓度测定 | 第115-117页 |
3 单向凝胶电泳结果 | 第117-118页 |
4 双向电泳的重复性 | 第118页 |
5 蛋白质表达的差异分析 | 第118页 |
6 差异蛋白的肽指纹图谱分析 | 第118-119页 |
7 质谱分析 | 第119-120页 |
四 讨论 | 第120-121页 |
五结论 | 第121页 |
六 参考文献 | 第121-128页 |
第三章 抗凋亡抑制剂DEVD-CapaseⅢ对紫杉醇生物合成的影响 | 第128-136页 |
一 引言 | 第128-131页 |
1 细胞凋亡的研究概述 | 第128-129页 |
2 研究意义 | 第129-130页 |
3 研究目标和主要内容 | 第130-131页 |
4 技术路线 | 第131页 |
二 材料与方法 | 第131-132页 |
1 材料 | 第131-132页 |
2 方法 | 第132页 |
三 结果与分析 | 第132-133页 |
1. 红豆杉愈伤组织细胞的生长情况 | 第132页 |
2. HPLC分析实验样品中的紫杉烷种类及含量的变化 | 第132-133页 |
四 讨论 | 第133-134页 |
五 结论 | 第134页 |
六 参考文献 | 第134-136页 |
第四章 未知化合物的鉴定 | 第136-146页 |
一 电喷雾离子阱二级质谱法(LC-ESI-MS/MS)分析 | 第138-139页 |
二 HPLC-HRMS分析 | 第139-142页 |
三 HPLC二极管阵列检测器(DAD)检测分析 | 第142-143页 |
四 对未知成分的纯化 | 第143页 |
1 实验材料 | 第143页 |
2 实验仪器 | 第143页 |
3 方法 | 第143页 |
五 结果与讨论 | 第143-145页 |
1 结果 | 第143-144页 |
2 讨论 | 第144-145页 |
六 结论 | 第145-146页 |
附录 | 第146-154页 |
致谢 | 第154-156页 |