| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 英文缩略词表 | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-23页 |
| ·纤维素 | 第10页 |
| ·纤维素酶的分子结构与降解机理 | 第10-12页 |
| ·高产纤维素酶生产菌的筛选 | 第12-13页 |
| ·纤维素酶的测活方法 | 第13-14页 |
| ·纤维素酶的分离纯化 | 第14-18页 |
| ·纤维素酶分离纯化的研究进展 | 第14-16页 |
| ·离子交换层析与纤维素酶的分离纯化 | 第16-17页 |
| ·内切葡聚糖酶的酶学性质 | 第17-18页 |
| ·纤维素酶的基因克隆研究 | 第18-19页 |
| ·细菌纤维素酶基因克隆 | 第18页 |
| ·真菌纤维素酶基因克隆 | 第18-19页 |
| ·动物内源纤维素酶基因克隆 | 第19页 |
| ·植物病原菌纤维素酶基因克隆 | 第19页 |
| ·纤维素酶的应用 | 第19-22页 |
| ·研究的背景、思路及意义 | 第22-23页 |
| 第二章 实验设备及材料 | 第23-28页 |
| ·主要仪器设备 | 第23-24页 |
| ·实验材料 | 第24-28页 |
| ·菌种 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·试剂与母液配制 | 第24-26页 |
| ·酶类 | 第26页 |
| ·试剂盒 | 第26页 |
| ·其它 | 第26-28页 |
| 第三章 实验方法 | 第28-47页 |
| ·纤维素酶的定性检测 | 第28-29页 |
| ·诱导培养基优化 | 第29-30页 |
| ·CMCase的活力测定 | 第30-31页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第31-32页 |
| ·CMCase的分离和纯化 | 第32-33页 |
| ·酶作用产物分析 | 第33页 |
| ·CMCase酶学性质分析 | 第33-36页 |
| ·酶分子量分析 | 第33-34页 |
| ·温度和pH对酶活力的影响 | 第34页 |
| ·酶的热稳定性和pH稳定性 | 第34-35页 |
| ·金属离子以及表面活性剂对酶活力的影响 | 第35页 |
| ·CMCase的米氏常数Km和最大反应速率Vmax的测定 | 第35-36页 |
| ·总RNA的提取 | 第36页 |
| ·RT-PCR | 第36-47页 |
| ·简并引物设计 | 第36-41页 |
| ·RT-PCR | 第41-45页 |
| ·切胶回收PCR产物 | 第45页 |
| ·TA克隆 | 第45-47页 |
| 第四章 实验结果 | 第47-65页 |
| ·纤维素酶的定性检测 | 第47-49页 |
| ·初筛结果 | 第47页 |
| ·复筛 | 第47-49页 |
| ·诱导培养基优化 | 第49页 |
| ·CMCase的分离、纯化 | 第49-54页 |
| ·分子筛脱盐 | 第50-51页 |
| ·弱阴离子交换柱层析 | 第51页 |
| ·强阴离子交换柱层析 | 第51-54页 |
| ·酶作用产物的分析 | 第54页 |
| ·CMCase酶学性质分析 | 第54-61页 |
| ·酶的分子量测定 | 第54页 |
| ·温度和pH对酶活力的影响 | 第54-56页 |
| ·温度稳定性和pH稳定性 | 第56-58页 |
| ·金属离子和表面活性剂对酶活力的影响 | 第58-59页 |
| ·CMCase的米氏常数Km和最大反应速率Vmax的测定 | 第59-61页 |
| ·总RNA提取的结果 | 第61页 |
| ·RT-PCR结果 | 第61-65页 |
| ·RT-PCR条件摸索 | 第61-64页 |
| ·酶切鉴定 | 第64-65页 |
| 第五章 讨论 | 第65-68页 |
| ·纤维素酶的定性检测和产酶培养基的优化 | 第65页 |
| ·CMCase纯化及酶学性质分析 | 第65-67页 |
| ·基因克隆的初步研究 | 第67-68页 |
| 小结 | 第68页 |
| 展望 | 第68-70页 |
| 特别致谢 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文及获奖情况 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |