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干旱诱导TaNAC基因的克隆表达及转TPSP基因小麦材料的鉴定

致谢第1-8页
摘要第8-9页
1 文献综述第9-23页
   ·植物应对干旱胁迫的调节机制第9-11页
     ·气孔调节第9页
     ·渗透调节第9-10页
     ·干旱胁迫反应相关的功能蛋白第10-11页
   ·植物干旱胁迫信号的转导第11-14页
     ·植物干旱胁迫信号的感知第11-12页
     ·植物干旱胁迫信号在细胞间的传递第12-13页
     ·植物干旱胁迫诱导的基因表达调控第13-14页
   ·干旱胁迫响应的转录因子第14-15页
   ·NAC 转录因子及其在干旱胁迫反应中的功能第15-18页
     ·NAC 转录因子的分类与结构第15-16页
     ·NAC 转录因子的生物学功能第16-17页
     ·NAC 类转录因子的表达调控第17-18页
   ·海藻糖的研究进展第18-21页
     ·海藻糖的生物学功能第19-20页
       ·对活性蛋白质类的保护作用第19-20页
       ·对细胞的保护作用第20页
       ·对脂质体的保护作用第20页
     ·海藻糖合成相关基因在抗旱分子育种中的应用第20-21页
   ·小麦抗旱基因工程存在问题及解决方法第21-23页
2 引言第23-24页
3 材料与方法第24-38页
   ·实验材料第24-25页
     ·植物材料处理第24页
     ·菌株和质粒载体第24页
     ·工具酶及试剂盒第24-25页
     ·主要仪器第25页
     ·PCR 引物第25页
     ·LB 培养基第25页
   ·实验方法第25-38页
     ·总RNA 提取及质量鉴定第25-28页
       ·试剂和器皿的准备第25-26页
       ·试验准备第26页
       ·总RNA 提取操作步骤第26-28页
       ·总RNA 质量及浓度测定第28页
     ·目的基因的克隆第28-33页
       ·反转录cDNA 第一链的合成第28页
       ·基因克隆的PCR 反应第28页
       ·克隆基因的基因组结构分析第28-29页
       ·PCR 产物的回收和连接,酶切及测序第29-31页
       ·重组质粒的提取、鉴定及序列分析第31-33页
     ·cDNA 的获得及基因表达特性分析第33-34页
       ·反转录:cDNA 第一链的合成第33页
       ·内标基因Actin 循环数的确定第33-34页
       ·克隆基因表达特性分析及模板量的确定第34页
       ·克隆基因表达特性分析第34页
     ·TaNAC478 的原核表达第34-35页
       ·重组表达载体的构建第34页
       ·重组蛋白的诱导表达第34-35页
     ·SDS-PAGE 电泳第35-37页
     ·转TPSP 基因小麦中外源基因的表达第37-38页
       ·转基因小麦的分子鉴定第37页
       ·总RNA 的提取、纯化和cDNA 的合成第37页
       ·半定量RT-PCR 分析及抗旱性鉴定第37-38页
4 结果与分析第38-54页
   ·小麦水分胁迫反应相关基因的克隆与序列分析第38-44页
     ·RNA 质量检测及第一链的获得第38页
     ·TaNAC 基因的克隆及序列分析第38-41页
     ·小麦TaNAC56 的基因组结构分析第41-44页
   ·克隆基因的表达特性分析第44-49页
     ·在20% PEG6000 处理条件下的表达特性分析第44-45页
     ·PEG 介导的水分胁迫条件下小麦幼苗的表型及相对含水量的变化第45页
     ·在盐胁迫条件下的TaNACs 的表达特性第45-46页
     ·在ABA 处理条件下的表达特性分析第46-47页
     ·克隆基因在不同组织中的表达特性分析第47页
     ·克隆基因在种子发育过程中的表达特性分析第47-48页
     ·克隆基因在种子萌发过程中的表达特性第48-49页
   ·TaNAC478 基因的克隆和原核表达第49-51页
     ·TaNAC478 基因的克隆第49页
     ·TaNAC478 基因的cDNA 序列分析第49-50页
     ·重组原核表达载体的PCR 及酶切鉴定第50-51页
     ·融合蛋白 GST-Ta478 的诱导表达第51页
   ·转TPSP 基因小麦材料的鉴定第51-54页
     ·T1 代植株的PCR 鉴定第51-52页
     ·转基因小麦中TPSP 基因的表达及抗旱性初步鉴定第52-54页
5 讨论第54-55页
   ·在胁迫条件下TaNAC 基因的表达特性分析第54页
   ·TaNAC 基因的时空表达特性分析第54页
   ·转TPSP 基因小麦材料的抗旱特性分析第54-55页
参考文献第55-60页
英文摘要第60-61页

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