致谢 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
英文摘要 | 第11-15页 |
英文缩写 | 第15-17页 |
第一章 卵巢癌相关的免疫学研究进展(文献综述) | 第17-81页 |
1 肿瘤相关抗原的概念 | 第17页 |
2 肿瘤相关抗原的产生机制 | 第17-22页 |
·原癌基因被激活 | 第18-19页 |
·肿瘤抑制基因 | 第19-21页 |
·肿瘤相关抗原基因 | 第21-22页 |
3 肿瘤相关抗原的分类及临床价值 | 第22-25页 |
·过表达抗原 | 第22-24页 |
·CT抗原 | 第24-25页 |
·分化抗原 | 第25页 |
4 肿瘤相关抗原在肿瘤免疫中的作用 | 第25-37页 |
·肿瘤免疫的基本过程 | 第25-28页 |
·肿瘤抗原递呈细胞 | 第28-31页 |
·抗肿瘤的细胞免疫应答及对肿瘤细胞的杀伤作用 | 第31-37页 |
5 肿瘤免疫逃逸 | 第37-40页 |
·概念 | 第37页 |
·肿瘤免疫逃逸的过程及可能机制 | 第37-40页 |
6 卵巢癌的免疫 | 第40-46页 |
·卵巢癌患者机体细胞免疫状况 | 第40-42页 |
·卵巢癌免疫诊断概述 | 第42-44页 |
·卵巢癌免疫治疗概述 | 第44-46页 |
7 卵巢癌相关抗原筛选鉴定及临床价值 | 第46-68页 |
·卵巢癌相关抗原筛选鉴定方法及优缺点 | 第46-58页 |
·卵巢癌相关抗原筛选鉴定现况 | 第58-67页 |
·已筛选鉴定并公认的卵巢癌相关抗原可能生物学功能列表 | 第67-68页 |
8 TIZ与肿瘤的关系 | 第68-79页 |
·TIZ基因的结构、分布、作用 | 第68-69页 |
·TRAF-6分子的结构和分布及参与的信号传导 | 第69-72页 |
·核因子NF-κB | 第72-76页 |
·丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号转导通路 | 第76-79页 |
9 本实验的研究目的 | 第79-81页 |
第二章 TIZ mRNA在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及其临床价值 | 第81-100页 |
1.前言 | 第81页 |
2.材料及方法 | 第81-90页 |
·材料 | 第81-85页 |
·实验方法及步骤 | 第85-90页 |
3.结果 | 第90-96页 |
·卵巢肿瘤组织中TIZmRNA表达的PCR条件建立 | 第90-91页 |
·PCR产物的测序结果 | 第91-92页 |
·TIZ基因在不同卵巢组织中阳性表达率的比较 | 第92-93页 |
·卵巢恶性肿瘤组织TIZ mRNA表达与临床病理特征的关系 | 第93-95页 |
·卵巢恶性肿瘤组织TIZ mRNA阳性与阴性表达者生存时间的比较 | 第95页 |
·卵巢恶性肿瘤患者TIZ mRNA阳性表达与预后的关系 | 第95-96页 |
4.讨论 | 第96-100页 |
·TIZ mRNA阳性表达与卵巢恶性肿瘤的关系 | 第96-98页 |
·TIZ mRNA阳性表达与卵巢恶性肿瘤的预后 | 第98-100页 |
第三章 TIZ基因全长扩增和携带其基因的真核表达载体的构建 | 第100-118页 |
1.材料与方法 | 第100-110页 |
·材料 | 第100-103页 |
·引物设计与合成 | 第103-104页 |
·实验方法 | 第104-110页 |
2.结果 | 第110-115页 |
·1.0%琼脂糖凝胶电泳检测TIZ基因PCR产物结果 | 第110页 |
·PCR法鉴定质粒及双酶切法鉴定质粒结果 | 第110-111页 |
·TIZ全长测序结果及BLAST比对结果 | 第111-115页 |
3.讨论 | 第115-118页 |
·TIZ基因的结构特点与测序结果分析 | 第115-116页 |
·pcDNA3.1载体选择的意义 | 第116-117页 |
·pcDNA3.1-TIZ真核表达载体的构建的意义 | 第117-118页 |
第四章 真核转染TIZ基因对卵巢癌细胞系生物学行为影响的体外研究 | 第118-139页 |
1.材料和方法 | 第118-129页 |
·材料 | 第118-119页 |
·主要试剂、配制及仪器 | 第119-120页 |
·实验方法 | 第120-129页 |
2.结果 | 第129-137页 |
·不同种类卵巢癌细胞的TIZ基因表达情况 | 第129-130页 |
·转染条件的确定 | 第130-131页 |
·绿色荧光蛋白载体pEGFP-N1阳性对照结果 | 第131页 |
·筛选HO-8910细胞的G418浓度的确定 | 第131-132页 |
·G418细胞筛选携带TIZ-pcDNA3.1载体的HO-8910细胞结果 | 第132页 |
·转染筛选出的HO-8910细胞RT-PCR检测TIZ表达结果 | 第132-133页 |
·获得稳定转染的三种HO8910细胞后得到的生长曲线 | 第133-134页 |
·筛选出的稳定转染的三种HO-8910检测细胞生长周期 | 第134-135页 |
·细胞集落形成实验结果 | 第135页 |
·细胞体外迁移能力的测定结果 | 第135-136页 |
·细胞体外侵袭能力测定结果 | 第136页 |
·细胞体外黏附能力测定 | 第136-137页 |
3.讨论 | 第137-139页 |
第五章 RNA干扰TIZ基因对卵巢癌细胞系生物学功能影响的体外研究 | 第139-166页 |
1.材料和方法 | 第139-148页 |
·材料 | 第139-143页 |
·方法 | 第143-148页 |
2.结果 | 第148-162页 |
·不同种类卵巢癌细胞的TIZ基因表达情况 | 第148页 |
·构建好的β-actin-pTG19-T质粒测序结果 | 第148-149页 |
·标准品QRT-PCR扩增标准曲线结果 | 第149-150页 |
·标准品测定的实时荧光扩增融解曲线结果 | 第150-151页 |
·siRNA转染SKOV3细胞48小时后在荧光显微镜下结果 | 第151-153页 |
·PCR检测不同TIZ siRNA干扰片段对SKOV3细胞抑制效果 | 第153页 |
·QRT-PCR检测转染不同siRNA后的SKOV3细胞TIZ基因表达情况 | 第153-155页 |
·将三种干扰片段构建入干扰载体pGPU6/GFP/Neo并测序 | 第155-156页 |
·筛选SKOV3细胞的G418浓度的确定 | 第156-157页 |
·稳定转染干扰载体的SKOV3细胞筛选 | 第157页 |
·RT-PCR检测载体干扰效果 | 第157-158页 |
·细胞生长曲线测定(MTT法)结果 | 第158-159页 |
·筛选出的稳定转染的两种SKOV3检测细胞生长周期 | 第159-160页 |
·胞体集落形成实验结果 | 第160-161页 |
·细胞体外迁移能力的测定结果 | 第161页 |
·细胞体外侵袭能力测定结果 | 第161-162页 |
·细胞体外黏附能力测定结果 | 第162页 |
3.讨论 | 第162-166页 |
参考文献 | 第166-195页 |