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TIZ与卵巢癌关系的基因水平研究

致谢第1-8页
中文摘要第8-11页
英文摘要第11-15页
英文缩写第15-17页
第一章 卵巢癌相关的免疫学研究进展(文献综述)第17-81页
 1 肿瘤相关抗原的概念第17页
 2 肿瘤相关抗原的产生机制第17-22页
   ·原癌基因被激活第18-19页
   ·肿瘤抑制基因第19-21页
   ·肿瘤相关抗原基因第21-22页
 3 肿瘤相关抗原的分类及临床价值第22-25页
   ·过表达抗原第22-24页
   ·CT抗原第24-25页
   ·分化抗原第25页
 4 肿瘤相关抗原在肿瘤免疫中的作用第25-37页
   ·肿瘤免疫的基本过程第25-28页
   ·肿瘤抗原递呈细胞第28-31页
   ·抗肿瘤的细胞免疫应答及对肿瘤细胞的杀伤作用第31-37页
 5 肿瘤免疫逃逸第37-40页
   ·概念第37页
   ·肿瘤免疫逃逸的过程及可能机制第37-40页
 6 卵巢癌的免疫第40-46页
   ·卵巢癌患者机体细胞免疫状况第40-42页
   ·卵巢癌免疫诊断概述第42-44页
   ·卵巢癌免疫治疗概述第44-46页
 7 卵巢癌相关抗原筛选鉴定及临床价值第46-68页
   ·卵巢癌相关抗原筛选鉴定方法及优缺点第46-58页
   ·卵巢癌相关抗原筛选鉴定现况第58-67页
   ·已筛选鉴定并公认的卵巢癌相关抗原可能生物学功能列表第67-68页
 8 TIZ与肿瘤的关系第68-79页
   ·TIZ基因的结构、分布、作用第68-69页
   ·TRAF-6分子的结构和分布及参与的信号传导第69-72页
   ·核因子NF-κB第72-76页
   ·丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号转导通路第76-79页
 9 本实验的研究目的第79-81页
第二章 TIZ mRNA在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及其临床价值第81-100页
 1.前言第81页
 2.材料及方法第81-90页
   ·材料第81-85页
   ·实验方法及步骤第85-90页
 3.结果第90-96页
   ·卵巢肿瘤组织中TIZmRNA表达的PCR条件建立第90-91页
   ·PCR产物的测序结果第91-92页
   ·TIZ基因在不同卵巢组织中阳性表达率的比较第92-93页
   ·卵巢恶性肿瘤组织TIZ mRNA表达与临床病理特征的关系第93-95页
   ·卵巢恶性肿瘤组织TIZ mRNA阳性与阴性表达者生存时间的比较第95页
   ·卵巢恶性肿瘤患者TIZ mRNA阳性表达与预后的关系第95-96页
 4.讨论第96-100页
   ·TIZ mRNA阳性表达与卵巢恶性肿瘤的关系第96-98页
   ·TIZ mRNA阳性表达与卵巢恶性肿瘤的预后第98-100页
第三章 TIZ基因全长扩增和携带其基因的真核表达载体的构建第100-118页
 1.材料与方法第100-110页
   ·材料第100-103页
   ·引物设计与合成第103-104页
   ·实验方法第104-110页
 2.结果第110-115页
   ·1.0%琼脂糖凝胶电泳检测TIZ基因PCR产物结果第110页
   ·PCR法鉴定质粒及双酶切法鉴定质粒结果第110-111页
   ·TIZ全长测序结果及BLAST比对结果第111-115页
 3.讨论第115-118页
   ·TIZ基因的结构特点与测序结果分析第115-116页
   ·pcDNA3.1载体选择的意义第116-117页
   ·pcDNA3.1-TIZ真核表达载体的构建的意义第117-118页
第四章 真核转染TIZ基因对卵巢癌细胞系生物学行为影响的体外研究第118-139页
 1.材料和方法第118-129页
   ·材料第118-119页
   ·主要试剂、配制及仪器第119-120页
   ·实验方法第120-129页
 2.结果第129-137页
   ·不同种类卵巢癌细胞的TIZ基因表达情况第129-130页
   ·转染条件的确定第130-131页
   ·绿色荧光蛋白载体pEGFP-N1阳性对照结果第131页
   ·筛选HO-8910细胞的G418浓度的确定第131-132页
   ·G418细胞筛选携带TIZ-pcDNA3.1载体的HO-8910细胞结果第132页
   ·转染筛选出的HO-8910细胞RT-PCR检测TIZ表达结果第132-133页
   ·获得稳定转染的三种HO8910细胞后得到的生长曲线第133-134页
   ·筛选出的稳定转染的三种HO-8910检测细胞生长周期第134-135页
   ·细胞集落形成实验结果第135页
   ·细胞体外迁移能力的测定结果第135-136页
   ·细胞体外侵袭能力测定结果第136页
   ·细胞体外黏附能力测定第136-137页
 3.讨论第137-139页
第五章 RNA干扰TIZ基因对卵巢癌细胞系生物学功能影响的体外研究第139-166页
 1.材料和方法第139-148页
   ·材料第139-143页
   ·方法第143-148页
 2.结果第148-162页
   ·不同种类卵巢癌细胞的TIZ基因表达情况第148页
   ·构建好的β-actin-pTG19-T质粒测序结果第148-149页
   ·标准品QRT-PCR扩增标准曲线结果第149-150页
   ·标准品测定的实时荧光扩增融解曲线结果第150-151页
   ·siRNA转染SKOV3细胞48小时后在荧光显微镜下结果第151-153页
   ·PCR检测不同TIZ siRNA干扰片段对SKOV3细胞抑制效果第153页
   ·QRT-PCR检测转染不同siRNA后的SKOV3细胞TIZ基因表达情况第153-155页
   ·将三种干扰片段构建入干扰载体pGPU6/GFP/Neo并测序第155-156页
   ·筛选SKOV3细胞的G418浓度的确定第156-157页
   ·稳定转染干扰载体的SKOV3细胞筛选第157页
   ·RT-PCR检测载体干扰效果第157-158页
   ·细胞生长曲线测定(MTT法)结果第158-159页
   ·筛选出的稳定转染的两种SKOV3检测细胞生长周期第159-160页
   ·胞体集落形成实验结果第160-161页
   ·细胞体外迁移能力的测定结果第161页
   ·细胞体外侵袭能力测定结果第161-162页
   ·细胞体外黏附能力测定结果第162页
 3.讨论第162-166页
参考文献第166-195页

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