| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-13页 |
| 第2章 材料 | 第13-18页 |
| ·实验动物 | 第13页 |
| ·试剂 | 第13-14页 |
| ·主要试剂配制 | 第14-16页 |
| ·主要仪器设备 | 第16-17页 |
| ·支架材料 | 第17-18页 |
| ·PLGA 材料购自山东天罡生物材料公司 | 第17页 |
| ·PLGA 材料种植模型 | 第17-18页 |
| 第3章 方法 | 第18-27页 |
| ·实验流程 | 第18页 |
| ·骨髓间充质干细胞培养 | 第18-20页 |
| ·骨髓间充质干细胞原代培养 | 第18-19页 |
| ·BMSC 细胞的冻存 | 第19页 |
| ·BMSC 细胞复苏 | 第19页 |
| ·流式细胞术检测 | 第19-20页 |
| ·含 pEGFP-N2-VEGF 基因质粒的提取与纯化 | 第20-21页 |
| ·利用脂质体将pEGFP-N2-VEGF 基因转入骨髓间充质干细胞 | 第21-22页 |
| ·RT-PCR 检测诱导细胞 | 第22-24页 |
| ·诱导细胞总RNA 抽提 | 第22-23页 |
| ·逆转录(RT)反应 | 第23页 |
| ·PCR 扩增 | 第23-24页 |
| ·PCR 扩增引物系列 | 第24页 |
| ·免疫组织化学 | 第24-25页 |
| ·细胞涂片的准备 | 第24页 |
| ·免疫细胞化学染色 | 第24-25页 |
| ·在 PLGA 种植模型上种植骨髓间充质干细胞后转染 EGFP-VEGF 基因 | 第25页 |
| ·MTT 比色实验 | 第25-26页 |
| ·统计学处理 | 第26-27页 |
| 第4章 结果 | 第27-29页 |
| ·细胞培养 | 第27页 |
| ·质粒 DNA 浓度及纯度检测 | 第27页 |
| ·RT-PCR 反应 | 第27页 |
| ·免疫细胞化学染色 | 第27-28页 |
| ·荧光显微镜、扫描电镜观察 | 第28页 |
| ·MTT 比色实验 | 第28-29页 |
| 第5章 讨论 | 第29-34页 |
| ·种子细胞选择 | 第29-30页 |
| ·基因转染标记种子细胞的优点 | 第30-32页 |
| ·支架材料的使用 | 第32-34页 |
| 第6章 结论 | 第34-35页 |
| 致谢 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-39页 |
| 附图 | 第39-41页 |
| 综述 | 第41-47页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第47页 |
