| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 英文缩略词表 | 第11-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-31页 |
| 1 ANXA2的研究进展 | 第13-25页 |
| ·Annexins家族简介 | 第13页 |
| ·ANXA2的生物学结构特征 | 第13-14页 |
| ·ANXA2的生物学功能 | 第14-18页 |
| ·ANXA2与人类疾病 | 第18-25页 |
| 2 RNAi的研究进展 | 第25-31页 |
| ·RNAi的发现史 | 第25-26页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第26页 |
| ·RNAi的作用特点 | 第26-27页 |
| ·siRNA制备的方法 | 第27-28页 |
| ·RNAi的应用前景 | 第28-31页 |
| 第二章 研究论文的立论依据、目的意义及技术路线 | 第31-33页 |
| 第三章 ANXA2-siRNA真核表达载体的构建和鉴定 | 第33-43页 |
| 1 实验材料 | 第33-35页 |
| ·菌种、质粒 | 第33页 |
| ·实验试剂 | 第33页 |
| ·实验仪器 | 第33-34页 |
| ·常用试剂的配置 | 第34-35页 |
| 2 实验方法 | 第35-38页 |
| ·siRNA序列的设计 | 第35页 |
| ·重组质粒的构建 | 第35-36页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的大量提取与纯化 | 第37-38页 |
| ·重组质粒浓度和纯度测定 | 第38页 |
| 3 实验结果 | 第38-40页 |
| ·四个靶向ANXA2的siRNA序列的选择 | 第38页 |
| ·重组质粒的酶切及DNA测序鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组质粒的浓度及纯度 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| 第四章 siRNA对Caco-2细胞ANXA2表达的抑制 | 第43-66页 |
| 1 实验材料 | 第43-48页 |
| ·细胞株 | 第43页 |
| ·实验试剂 | 第43-44页 |
| ·实验仪器 | 第44页 |
| ·主要试剂的配制 | 第44-48页 |
| 2 实验方法 | 第48-56页 |
| ·实验分组 | 第48页 |
| ·细胞培养 | 第48-49页 |
| ·细胞转染 | 第49-50页 |
| ·RT-PCR检测ANXA2基因表达水平 | 第50-53页 |
| ·Western blot检测ANXA2蛋白表达水平 | 第53-55页 |
| ·细胞免疫化学检测ANXA2蛋白表达及定位 | 第55-56页 |
| ·统计学方法 | 第56页 |
| 3 实验结果 | 第56-62页 |
| ·siRNA干扰ANXA2基因表达对Caco-2细胞形态的影响 | 第56页 |
| ·细胞转染效率的间接估计 | 第56-57页 |
| ·细胞总RNA电泳结果 | 第57-58页 |
| ·细胞总RNA浓度的测定 | 第58页 |
| ·RT-PCR检测ANXA2mRNA水平的结果 | 第58-61页 |
| ·Western blot检测ANXA2蛋白表达水平的结果 | 第61-62页 |
| ·细胞免疫化学染色检测ANXA2蛋白表达及定位的结果 | 第62页 |
| 4 讨论 | 第62-66页 |
| 第五章 RNAi沉默ANXA2对Caco-2细胞生物学行为的影响 | 第66-75页 |
| 1 实验材料 | 第66-67页 |
| ·细胞株 | 第66页 |
| ·实验试剂 | 第66-67页 |
| ·实验仪器 | 第67页 |
| ·主要试剂的配制 | 第67页 |
| 2 实验方法 | 第67-69页 |
| ·实验分组 | 第67页 |
| ·细胞培养 | 第67页 |
| ·细胞增殖检测 | 第67-68页 |
| ·细胞运动力检测 | 第68页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第68-69页 |
| ·统计学方法 | 第69页 |
| 3 实验结果 | 第69-72页 |
| ·细胞增殖力的变化 | 第69-70页 |
| ·细胞运动力的变化 | 第70-71页 |
| ·细胞凋亡检测结果 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-75页 |
| 总结 | 第75-76页 |
| 课题的创新之处及未来研究设想 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 攻读硕士学位期间的科研成果 | 第87页 |
