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miR-199a-3p在上皮性卵巢癌的发展和铂类耐药中的作用研究

缩略语表第7-10页
中文摘要第10-16页
英文摘要第16-23页
前言第24-26页
文献回顾第26-42页
实验一 miR-199a-3p在EOC中的临床意义及其与铂类耐药的相关性研究第42-56页
    1 材料第42-44页
        1.1 临床资料第42-43页
        1.2 主要仪器第43-44页
        1.3 主要试剂第44页
        1.4 溶液配制第44页
    2 方法第44-48页
        2.1 临床资料收集第44-45页
        2.2 qRT-PCR检测上皮性卵巢癌组织中mi R-199a-3p的表达第45-48页
        2.3 数据分析和统计学处理第48页
    3 结果第48-53页
        3.1 miR-199a-3p在不同卵巢组织中的表达第48-49页
        3.2 EOC铂类化疗敏感和铂类化疗耐药组临床资料分析第49-50页
        3.3 miR-199a-3p在EOC不同分期中的表达第50页
        3.4 miR-199a-3p在EOC不同组织学分级中的表达第50-51页
        3.5 miR-199a-3p在EOC不同组织学类型中的表达第51-52页
        3.6 miR-199a-3p在EOC淋巴转移时的表达第52页
        3.7 miR-199a-3p在EOC铂类化疗敏感组和耐药组中的表达第52-53页
    4 讨论第53-56页
实验二 miR-199a-3p在人卵巢癌细胞中的表达及其对卵巢癌细胞生物学行为的影响第56-72页
    1 材料第56-58页
        1.1 主要仪器第56-57页
        1.2 主要试剂第57页
        1.3 溶液配制第57-58页
        1.4 细胞来源第58页
    2 方法第58-64页
        2.1 细胞复苏及培养第58-59页
        2.2 耐药细胞株的制备第59-60页
        2.3 SKOV3和SKOV3/DDP细胞生物学效能的检测第60-61页
        2.4 qRT-PCR检测miR-199a-3p在SKOV3和SKOV3/DDP中的表达第61-63页
        2.5 miR-199a-3p mimic/inhibitor转染SKOV3和SKOV3/DDP细胞第63页
        2.6 miR-199a-3p对SKOV3/DDP和SKOV3生物学行为影响的检测第63页
        2.7 数据分析和统计学处理第63-64页
    3 结果第64-70页
        3.1 卵巢癌顺铂耐药株SKOV3/DDP的构建第64页
        3.2 SKOV3和SKOV3/DDP生物学效能的比较第64-66页
        3.3 miR-199a-3p在SKOV3和SKOV3/DDP细胞中表达水平的比较第66-67页
        3.4 miR-199a-3p对SKOV3和SKOV3/DDP细胞生物学行为的影响第67-70页
    4 讨论第70-72页
实验三 miR-199a-3p在卵巢癌细胞中靶基因的预测和验证第72-89页
    1 材料第72-75页
        1.1 主要仪器第72-73页
        1.2 主要试剂第73-74页
        1.3 溶液配制第74-75页
    2 方法第75-80页
        2.1 细胞复苏与培养第75页
        2.2 miR-199a-3p生物信息功能分析第75页
        2.3 WB检测SKOV3和SKOV3/DDP细胞中靶基因蛋白表达第75-77页
        2.4 qRT-PCR检测SKOV3和SKOV3/DDP细胞中靶基因mRNA相对表达量第77-79页
        2.5 转染miR-199a-3p mimic /inhibitor后卵巢癌细胞中ITGB8的蛋白表达第79页
        2.6 双荧光素酶报告基因检测miR-199a-3p对ITGB8的调控作用第79-80页
        2.7 数据分析和统计学处理第80页
    3 结果第80-87页
        3.1 miR-199a-3p的生物信息分析及靶基因预测第80-82页
        3.2 SKOV3和SKOV3/DDP细胞中靶基因蛋白表达水平第82页
        3.3 SKOV3和SKOV3/DDP细胞中靶基因mRNA表达水平第82-83页
        3.4 下调miR-199a-3p促进SKOV3细胞中ITGB8的蛋白表达第83-84页
        3.5 上调miR-199a-3p抑制SKOV3/DDP细胞中ITGB8的蛋白表达第84页
        3.6 双荧光素酶报告基因验证miR-199a-3P对ITGB8的靶向调控作用第84-87页
    4 讨论第87-89页
实验四 miR-199a-3p靶向调控ITGB8对卵巢癌细胞生物学行为的影响第89-119页
    1 材料第89-91页
        1.1 主要仪器第89-90页
        1.2 主要试剂第90-91页
        1.3 试剂配制第91页
        1.4 实验分组第91页
    2 方法第91-99页
        2.1 构建ITGB8过表达载体第91-96页
        2.2 重组质粒pcDNA3.1-ITGB8转染效率的检测第96-97页
        2.3 检测miR-199a-3p通过靶向调控ITGB8对卵巢癌细胞生物学行为的影响第97-98页
        2.4 建立裸鼠卵巢癌原位异种模型第98-99页
        2.5 数据分析和统计学处理第99页
    3 结果第99-114页
        3.1 建立并鉴定重组质粒pcDNA3.1-ITGB8第99-101页
        3.2 miR-199a-3p通过靶向调控ITGB8对卵巢癌细胞生物学行为的影响第101-110页
        3.3 裸鼠模型卵巢癌原位成瘤组织中miR-199a-3p和ITGB8的表达和作用第110-114页
    4 讨论第114-119页
小结第119-121页
展望第121-123页
参考文献第123-137页
个人简历和研究成果第137-138页
致谢第138页

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