缩略语表 | 第7-10页 |
中文摘要 | 第10-16页 |
英文摘要 | 第16-23页 |
前言 | 第24-26页 |
文献回顾 | 第26-42页 |
实验一 miR-199a-3p在EOC中的临床意义及其与铂类耐药的相关性研究 | 第42-56页 |
1 材料 | 第42-44页 |
1.1 临床资料 | 第42-43页 |
1.2 主要仪器 | 第43-44页 |
1.3 主要试剂 | 第44页 |
1.4 溶液配制 | 第44页 |
2 方法 | 第44-48页 |
2.1 临床资料收集 | 第44-45页 |
2.2 qRT-PCR检测上皮性卵巢癌组织中mi R-199a-3p的表达 | 第45-48页 |
2.3 数据分析和统计学处理 | 第48页 |
3 结果 | 第48-53页 |
3.1 miR-199a-3p在不同卵巢组织中的表达 | 第48-49页 |
3.2 EOC铂类化疗敏感和铂类化疗耐药组临床资料分析 | 第49-50页 |
3.3 miR-199a-3p在EOC不同分期中的表达 | 第50页 |
3.4 miR-199a-3p在EOC不同组织学分级中的表达 | 第50-51页 |
3.5 miR-199a-3p在EOC不同组织学类型中的表达 | 第51-52页 |
3.6 miR-199a-3p在EOC淋巴转移时的表达 | 第52页 |
3.7 miR-199a-3p在EOC铂类化疗敏感组和耐药组中的表达 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-56页 |
实验二 miR-199a-3p在人卵巢癌细胞中的表达及其对卵巢癌细胞生物学行为的影响 | 第56-72页 |
1 材料 | 第56-58页 |
1.1 主要仪器 | 第56-57页 |
1.2 主要试剂 | 第57页 |
1.3 溶液配制 | 第57-58页 |
1.4 细胞来源 | 第58页 |
2 方法 | 第58-64页 |
2.1 细胞复苏及培养 | 第58-59页 |
2.2 耐药细胞株的制备 | 第59-60页 |
2.3 SKOV3和SKOV3/DDP细胞生物学效能的检测 | 第60-61页 |
2.4 qRT-PCR检测miR-199a-3p在SKOV3和SKOV3/DDP中的表达 | 第61-63页 |
2.5 miR-199a-3p mimic/inhibitor转染SKOV3和SKOV3/DDP细胞 | 第63页 |
2.6 miR-199a-3p对SKOV3/DDP和SKOV3生物学行为影响的检测 | 第63页 |
2.7 数据分析和统计学处理 | 第63-64页 |
3 结果 | 第64-70页 |
3.1 卵巢癌顺铂耐药株SKOV3/DDP的构建 | 第64页 |
3.2 SKOV3和SKOV3/DDP生物学效能的比较 | 第64-66页 |
3.3 miR-199a-3p在SKOV3和SKOV3/DDP细胞中表达水平的比较 | 第66-67页 |
3.4 miR-199a-3p对SKOV3和SKOV3/DDP细胞生物学行为的影响 | 第67-70页 |
4 讨论 | 第70-72页 |
实验三 miR-199a-3p在卵巢癌细胞中靶基因的预测和验证 | 第72-89页 |
1 材料 | 第72-75页 |
1.1 主要仪器 | 第72-73页 |
1.2 主要试剂 | 第73-74页 |
1.3 溶液配制 | 第74-75页 |
2 方法 | 第75-80页 |
2.1 细胞复苏与培养 | 第75页 |
2.2 miR-199a-3p生物信息功能分析 | 第75页 |
2.3 WB检测SKOV3和SKOV3/DDP细胞中靶基因蛋白表达 | 第75-77页 |
2.4 qRT-PCR检测SKOV3和SKOV3/DDP细胞中靶基因mRNA相对表达量 | 第77-79页 |
2.5 转染miR-199a-3p mimic /inhibitor后卵巢癌细胞中ITGB8的蛋白表达 | 第79页 |
2.6 双荧光素酶报告基因检测miR-199a-3p对ITGB8的调控作用 | 第79-80页 |
2.7 数据分析和统计学处理 | 第80页 |
3 结果 | 第80-87页 |
3.1 miR-199a-3p的生物信息分析及靶基因预测 | 第80-82页 |
3.2 SKOV3和SKOV3/DDP细胞中靶基因蛋白表达水平 | 第82页 |
3.3 SKOV3和SKOV3/DDP细胞中靶基因mRNA表达水平 | 第82-83页 |
3.4 下调miR-199a-3p促进SKOV3细胞中ITGB8的蛋白表达 | 第83-84页 |
3.5 上调miR-199a-3p抑制SKOV3/DDP细胞中ITGB8的蛋白表达 | 第84页 |
3.6 双荧光素酶报告基因验证miR-199a-3P对ITGB8的靶向调控作用 | 第84-87页 |
4 讨论 | 第87-89页 |
实验四 miR-199a-3p靶向调控ITGB8对卵巢癌细胞生物学行为的影响 | 第89-119页 |
1 材料 | 第89-91页 |
1.1 主要仪器 | 第89-90页 |
1.2 主要试剂 | 第90-91页 |
1.3 试剂配制 | 第91页 |
1.4 实验分组 | 第91页 |
2 方法 | 第91-99页 |
2.1 构建ITGB8过表达载体 | 第91-96页 |
2.2 重组质粒pcDNA3.1-ITGB8转染效率的检测 | 第96-97页 |
2.3 检测miR-199a-3p通过靶向调控ITGB8对卵巢癌细胞生物学行为的影响 | 第97-98页 |
2.4 建立裸鼠卵巢癌原位异种模型 | 第98-99页 |
2.5 数据分析和统计学处理 | 第99页 |
3 结果 | 第99-114页 |
3.1 建立并鉴定重组质粒pcDNA3.1-ITGB8 | 第99-101页 |
3.2 miR-199a-3p通过靶向调控ITGB8对卵巢癌细胞生物学行为的影响 | 第101-110页 |
3.3 裸鼠模型卵巢癌原位成瘤组织中miR-199a-3p和ITGB8的表达和作用 | 第110-114页 |
4 讨论 | 第114-119页 |
小结 | 第119-121页 |
展望 | 第121-123页 |
参考文献 | 第123-137页 |
个人简历和研究成果 | 第137-138页 |
致谢 | 第138页 |